摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-18页 |
·热激蛋白 | 第11-13页 |
·热激蛋白的发现 | 第11-12页 |
·热激蛋白的功能与特点 | 第12页 |
·热激蛋白的分类 | 第12-13页 |
·寄生虫的热激蛋白 | 第13-17页 |
·原虫的热激蛋白 | 第13-15页 |
·线虫的热激蛋白 | 第15-16页 |
·吸虫的热激蛋白 | 第16-17页 |
·展望 | 第17-18页 |
第二章 柔嫩艾美耳球虫sHSP和HSP60基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析 | 第18-42页 |
·引言 | 第18页 |
·材料与方法 | 第18-27页 |
·实验动物 | 第18页 |
·实验虫株 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·主要试剂配制 | 第19-20页 |
·EST来源 | 第20页 |
·RACE引物 | 第20页 |
·全长cDNA扩增的引物 | 第20-21页 |
·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的制备 | 第21-22页 |
·E.tenella孢子化卵囊、子孢子Total RNA的提取 | 第22页 |
·HSPs基因的3'和5'RACE扩增 | 第22-23页 |
·PCR产物的回收 | 第23页 |
·PCR回收产物与pGEM-T-easy vector连接转化 | 第23页 |
·阳性克隆的鉴定及测序 | 第23-24页 |
·拼接全长序列 | 第24页 |
·HSPs基因全长cDNA序列的扩增、克隆和测序 | 第24页 |
·HSPs基因的生物信息学分析 | 第24页 |
·HSPs基因不同发育阶段表达差异分析 | 第24-27页 |
·结果 | 第27-39页 |
·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的收集和纯化 | 第27-28页 |
·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的Total RNA的提取 | 第28页 |
·E.tenella HSPs基因全长cDNA的克隆 | 第28-29页 |
·E.tenella HSP60 cDNA序列的生物信息学分析及虫体不同发育阶段的特异性转录 | 第29-35页 |
·E.tenella sHSP cDNA序列的生物信息学分析及虫体不同发育阶段的特异性转录 | 第35-39页 |
·讨论 | 第39-42页 |
第三章 柔嫩艾美耳球虫sHSP和HSP60基因在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析 | 第42-55页 |
·引言 | 第42页 |
·材料与方法 | 第42-47页 |
·实验材料 | 第42-45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·结果 | 第47-52页 |
·E.tenella HSPs重组表达质粒的构建 | 第47页 |
·重组蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第47-52页 |
·重组表达蛋白抗原性的鉴定 | 第52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
第四章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
附录:pET-28a(+)载体图谱和多克隆位点区 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |