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柔嫩艾美耳球虫sHSP与HSP60基因的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-18页
   ·热激蛋白第11-13页
     ·热激蛋白的发现第11-12页
     ·热激蛋白的功能与特点第12页
     ·热激蛋白的分类第12-13页
   ·寄生虫的热激蛋白第13-17页
     ·原虫的热激蛋白第13-15页
     ·线虫的热激蛋白第15-16页
     ·吸虫的热激蛋白第16-17页
   ·展望第17-18页
第二章 柔嫩艾美耳球虫sHSP和HSP60基因全长cDNA的克隆与生物信息学分析第18-42页
   ·引言第18页
   ·材料与方法第18-27页
     ·实验动物第18页
     ·实验虫株第18页
     ·主要试剂第18页
     ·主要仪器第18-19页
     ·主要试剂配制第19-20页
     ·EST来源第20页
     ·RACE引物第20页
     ·全长cDNA扩增的引物第20-21页
     ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的制备第21-22页
     ·E.tenella孢子化卵囊、子孢子Total RNA的提取第22页
     ·HSPs基因的3'和5'RACE扩增第22-23页
     ·PCR产物的回收第23页
     ·PCR回收产物与pGEM-T-easy vector连接转化第23页
     ·阳性克隆的鉴定及测序第23-24页
     ·拼接全长序列第24页
     ·HSPs基因全长cDNA序列的扩增、克隆和测序第24页
     ·HSPs基因的生物信息学分析第24页
     ·HSPs基因不同发育阶段表达差异分析第24-27页
   ·结果第27-39页
     ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的收集和纯化第27-28页
     ·E.tenella未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的Total RNA的提取第28页
     ·E.tenella HSPs基因全长cDNA的克隆第28-29页
     ·E.tenella HSP60 cDNA序列的生物信息学分析及虫体不同发育阶段的特异性转录第29-35页
     ·E.tenella sHSP cDNA序列的生物信息学分析及虫体不同发育阶段的特异性转录第35-39页
   ·讨论第39-42页
第三章 柔嫩艾美耳球虫sHSP和HSP60基因在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析第42-55页
   ·引言第42页
   ·材料与方法第42-47页
     ·实验材料第42-45页
     ·实验方法第45-47页
   ·结果第47-52页
     ·E.tenella HSPs重组表达质粒的构建第47页
     ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化第47-52页
     ·重组表达蛋白抗原性的鉴定第52页
   ·讨论第52-55页
第四章 全文结论第55-56页
参考文献第56-61页
附录:pET-28a(+)载体图谱和多克隆位点区第61-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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