| 致谢 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1 叶色突变体 | 第16-19页 |
| ·叶色突变体的遗传规律 | 第16页 |
| ·叶色突变体的分子机理 | 第16-19页 |
| ·叶绿素合成受阻 | 第16-17页 |
| ·叶绿体发育受阻 | 第17页 |
| ·质-核信号传导途径受阻 | 第17-18页 |
| ·叶绿体蛋白转运受阻 | 第18-19页 |
| ·其它相关基因的突变 | 第19页 |
| 2 叶绿体前体蛋白的加工 | 第19-26页 |
| ·SPP的发现 | 第19-20页 |
| ·SPP的结构特点和酶活性 | 第20-22页 |
| ·SPP识别的底物范围 | 第22-24页 |
| ·SPP在叶绿体功能中的研究 | 第24-26页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 突变体Osspp的筛选及表型分析 | 第27-35页 |
| 1 水稻突变体筛选 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·突变体筛选 | 第27页 |
| ·水稻营养液配方 | 第27页 |
| ·水稻生长条件 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28页 |
| 2 突变体表型分析 | 第28-33页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·表型观测 | 第28页 |
| ·植株生长与根系参数测定 | 第28页 |
| ·侧根原基形成的观察 | 第28-29页 |
| ·不定根原基观察 | 第29页 |
| ·盆栽及农艺学性状分析 | 第29页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第29页 |
| ·叶绿体透射电镜 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·突变体的表型 | 第30-31页 |
| ·侧根原基形成的观察 | 第31-32页 |
| ·不定根原基形成的观察 | 第32页 |
| ·叶绿素含量和叶绿体透射电镜分析 | 第32-33页 |
| 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 OsSPP基因克隆 | 第35-49页 |
| 1 F_2群体的构建及遗传分析 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35页 |
| ·F_2群体的构建 | 第35页 |
| ·突变体的遗传分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-36页 |
| 2 突变基因的克隆 | 第36-48页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-46页 |
| ·F_2突变体样品DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·水稻DNA的快速提取 | 第37页 |
| ·多态标记的选择 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增 | 第38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·候选基因的确定 | 第39-41页 |
| ·cDNA第一链的制备 | 第39-40页 |
| ·目的基因PCR扩增 | 第40页 |
| ·连接T载体 | 第40-41页 |
| ·连接产物热激转化DH5α | 第41页 |
| ·测序和序列比对 | 第41页 |
| ·回复载体的构建 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·回复载体的构建 | 第41-42页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的准备 | 第42-43页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第43页 |
| ·农杆菌的培养 | 第43页 |
| ·共培养及抗性愈伤的筛选 | 第43-44页 |
| ·抗性愈伤的分化及成苗 | 第44页 |
| ·转基因苗的锻炼和移栽 | 第44页 |
| ·RT-PCR分析 | 第44页 |
| ·荧光定量RT-PCR | 第44-45页 |
| ·southern-blot分析 | 第45-46页 |
| ·基因组DNA抽提 | 第45-46页 |
| ·Southern Blot | 第46页 |
| ·转基因株系的表型分析 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-48页 |
| ·突变基因的图位克隆 | 第46-47页 |
| ·候选基因的确定 | 第47页 |
| ·OsSPP功能回复验证 | 第47-48页 |
| 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 OsSPP基因的表达分析和其蛋白的亚细胞定位 | 第49-56页 |
| 1 OsSPP基因的组织特异性表达分析 | 第49-52页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·半定量分析 | 第49页 |
| ·启动子融合GUS载体的构建 | 第49-50页 |
| ·GUS染色及显微观察 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-52页 |
| ·半定量PCR结果分析 | 第50-52页 |
| 2 OsSPP蛋白的亚细胞定位分析 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·sGFP融合载体的构建 | 第52-53页 |
| ·根癌农杆菌的培养 | 第53页 |
| ·转化烟草 | 第53页 |
| ·GFP荧光的观察 | 第53-54页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-55页 |
| 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 水稻OsSPP的生物信息学分析 | 第56-63页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| ·基因的结构分析 | 第56页 |
| ·基因拷贝数确定(电子分析) | 第56页 |
| ·蛋白的结构域分析 | 第56页 |
| ·基因的启动子分析 | 第56页 |
| ·信号肽和亚细胞定位预测 | 第56-57页 |
| ·蛋白二级结构变化预测 | 第57页 |
| ·基因家族的进化分析 | 第57页 |
| ·基因的联配比较 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-62页 |
| ·OsSPP的基因结构 | 第58页 |
| ·基因拷贝数确定(电子分析) | 第58页 |
| ·OsSPP蛋白结构域分析 | 第58-59页 |
| ·OsSPP的启动子元件分析 | 第59页 |
| ·OsSPP的信号肽和亚细胞定位预测 | 第59-60页 |
| ·蛋白二级结构变化预测 | 第60页 |
| ·进化树分析 | 第60-61页 |
| ·蛋白的多序列联配 | 第61-62页 |
| 本章小结 | 第62-63页 |
| 第六章 水稻叶绿体发育相关基因的表达模式分析 | 第63-67页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-64页 |
| ·植物地上部总RNA的提取 | 第63页 |
| ·荧光定量RT-PCR | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-65页 |
| 本章小结 | 第65-67页 |
| 第七章 结论与展望 | 第67-70页 |
| 1 结论 | 第67-68页 |
| 2 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |