| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 口蹄疫研究概述 | 第9-25页 |
| ·口蹄疫概况 | 第9页 |
| ·口蹄疫病毒的分型 | 第9-10页 |
| ·口蹄疫病毒分子生物学研究进展 | 第10-18页 |
| ·FMDV 的形态和构成 | 第10-11页 |
| ·FMDV 的基因组结构及功能 | 第11-15页 |
| ·FMDV 蛋白编码区及其产物的功能 | 第15-18页 |
| ·FMDV 的抗原特异性及变异性 | 第18-19页 |
| ·抗原特异性 | 第18-19页 |
| ·抗原变异性 | 第19页 |
| ·FMDV 的检测方法 | 第19-25页 |
| ·血清学诊断 | 第20-22页 |
| ·生物学试验 | 第22-23页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第23-25页 |
| 第二章 原核表达系统的研究现状 | 第25-29页 |
| ·表达外源基因的条件 | 第25-26页 |
| ·外源基因在大肠杆菌中的表达 | 第26-29页 |
| 第三章 重组原核表达质粒 PET28-KZ/03VP1 的构建 | 第29-48页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·毒株及载体 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-41页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·PCR 反应 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第31-32页 |
| ·目的片段VP1 基因的克隆 | 第32-34页 |
| ·阳性菌落的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒pGEM-KZ-VP1 的提取 | 第35-36页 |
| ·重组表达质粒pET28-KZ/03VP1 的构建 | 第36-40页 |
| ·VP1 序列的测定 | 第40-41页 |
| ·试验结果 | 第41-46页 |
| ·VP1 基因PCR 扩增与回收 | 第41-42页 |
| ·目的片段VP1 基因的克隆与鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组表达质粒pET28-KZ/03VP1 的构建及鉴定 | 第43-45页 |
| ·重组质粒pET28-KZ/03VP1 的序列分析 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·pET-28a 表达载体的利用 | 第46-47页 |
| ·VP1 片段与pGEM-T easy 载体的连接 | 第47-48页 |
| 第四章 重组表达质粒表达条件的优化 | 第48-56页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·质粒 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·主要试验仪器 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-51页 |
| ·VP1 蛋白鉴定 | 第49页 |
| ·IPTG 不同浓度诱导表达 | 第49页 |
| ·不同时间诱导表达 | 第49页 |
| ·样品处理与SDS-PAGE 电泳 | 第49-51页 |
| ·Western blot 分析 | 第51页 |
| ·试验结果 | 第51-53页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第51-53页 |
| ·Western blot 分析 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
