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镰形扇头蜱抗凝血分子基因的克隆表达和产物活性分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 蜱及蜱抗凝血分子的研究进展第8-18页
   ·蜱类简介第8-10页
   ·蜱抗凝血分子研究进展及应用前景第10-18页
第二章 材料与方法第18-49页
   ·材料与试剂第18-27页
   ·镰形扇头蜱的实验室饲养第27页
   ·镰形扇头蜱总RNA 的提取及鉴定第27-29页
   ·镰形扇头蜱C18、C201 基因EST 序列的获取第29页
   ·镰形扇头蜱C201 基因的克隆第29-35页
   ·RT-PCR 分析C18 基因的表达特点及分布情况第35-36页
   ·镰形扇头蜱C18 基因的克隆第36-37页
   ·镰形扇头蜱抗凝血蛋白(C18)基因的原核表达第37-42页
   ·融合蛋白的纯化第42-45页
   ·Western-blot 分析蛋白质免疫原性第45-47页
   ·C18 抗凝血活性的鉴定第47-49页
第三章 结果与分析第49-65页
   ·镰形扇头蜱的实验室饲养第49页
   ·总RNA 的提取第49-50页
   ·EST 序列结果及序列分析第50页
   ·目的基因5’端的克隆第50-52页
   ·C201 全长基因的克隆结果及C201 基因的分析第52-58页
   ·C18 基因在蜱吸血前后的表达情况第58-59页
   ·基因的原核表达第59-62页
   ·重组蛋白浓度的测定第62页
   ·Western-blot 分析第62-63页
   ·C18 的活性鉴定第63-65页
第四章 讨论第65-73页
   ·镰形扇头蜱的实验室饲养第65页
   ·RNA 提取及检测第65-66页
   ·RACE 方法克隆 C201 基因第66-68页
   ·RT-PCR 方法分析 C18 基因表达模式第68-69页
   ·开发蜱源抗凝药物的探索第69-71页
   ·抗凝血分子的活性试验第71-73页
结论第73-74页
参考文献第74-78页
附录第78-80页
致谢第80-81页
作者简介第81页

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