| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-20页 |
| ·硫氧还蛋白系统简介 | 第10-11页 |
| ·硫氧还蛋白(Thioredoxin) | 第11-14页 |
| ·硫氧还蛋白介绍 | 第11页 |
| ·硫氧还蛋白的发现及分类 | 第11-12页 |
| ·硫氧还蛋白的晶体三维结构 | 第12-13页 |
| ·硫氧还蛋白的生物学活性 | 第13-14页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin reductase) | 第14-18页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶介绍 | 第14-15页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶的分类 | 第15-16页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶的结构 | 第16-17页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶的生物学活性 | 第17-18页 |
| ·课题的研究目的与研究内容 | 第18-20页 |
| ·依据和目的 | 第18页 |
| ·论文的主要研究内容 | 第18-19页 |
| ·论文课题受资助情况 | 第19-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-31页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·菌种 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·A.ferrooxidans菌基因组抽提试剂 | 第21页 |
| ·质粒提取试剂 | 第21页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| ·胶回收试剂 | 第21页 |
| ·不连续体系SDS-PAGE电泳 | 第21-22页 |
| ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置 | 第22页 |
| ·蛋白亲和纯化试剂 | 第22-23页 |
| ·实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·酶切PCR产物及载体pLM1 | 第25页 |
| ·载体和目的片段连接反应 | 第25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第25-26页 |
| ·蛋白质表达转化 | 第26页 |
| ·蛋白质的条件表达 | 第26页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第26-28页 |
| ·蛋白质的纯化 | 第28页 |
| ·定点突变 | 第28-30页 |
| ·引物的设计 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增 | 第29页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第29页 |
| ·突变蛋白质的表达及纯化 | 第29-30页 |
| ·测试分析方法 | 第30-31页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30页 |
| ·紫外分光光度计(UV Scanning) | 第30页 |
| ·分子结构模型图的模拟(Molecular structure modeling) | 第30-31页 |
| 第三章 硫氧还蛋白的表达、纯化及C33、C36定点突变 | 第31-41页 |
| ·硫氧还蛋白基因的克隆 | 第31-33页 |
| ·硫氧还蛋白基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| ·硫氧还蛋白的表达 | 第33-37页 |
| ·硫氧还蛋白表达条件的确定 | 第33页 |
| ·硫氧还蛋白大规模的表达 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE分析硫氧还蛋白 | 第33-34页 |
| ·UV/Vis分析硫氧还蛋白 | 第34-35页 |
| ·分子模拟硫氧还蛋白 | 第35-37页 |
| ·硫氧还蛋白C33、C36定点突变 | 第37-39页 |
| ·硫氧还蛋白定点突变 | 第37页 |
| ·突变蛋白质的表达、纯化 | 第37页 |
| ·突变蛋白质的SDS-PAGE检测 | 第37-38页 |
| ·活性测定 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第四章 硫氧还蛋白还原酶的表达、纯化及C142、C145定点突变 | 第41-51页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶基因的克隆 | 第41-43页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶基因的克隆 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第42-43页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶的表达 | 第43-47页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶蛋白表达条件的确定 | 第43页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶大规模的表达 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE分析纯化的样品 | 第43-44页 |
| ·紫外扫描(UV/vis) | 第44-45页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶分子结构模拟 | 第45-47页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶C142、C145定点突变 | 第47-49页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶C142、C145定点突变 | 第47页 |
| ·突变蛋白质的表达、纯化 | 第47页 |
| ·突变蛋白质的SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
| ·活性测定 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 研究成果 | 第60页 |
