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小麦TαTOC1-A、TαTOC1-B和TαTOC1-D基因的克隆与表达分析

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-24页
   ·植物生物钟与植物生长发育第12-14页
   ·植物生物钟的分子基础第14-18页
     ·节律同步——生物钟的输入途径第14-15页
     ·植物生物钟核心振荡器的分子组成第15-18页
     ·植物生物钟的昼夜节律信号的输出第18页
   ·TOC1 同源基因在植物生物钟中的关键作用第18-20页
   ·小麦生物钟基因及部分同源基因的研究现状第20-23页
     ·小麦生物钟基因的研究进展第20页
     ·小麦部分同源基因的研究现状第20-23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-43页
   ·实验材料第24-25页
     ·植物材料及其生长条件第24页
     ·菌株与载体第24页
     ·酶及其它生化试剂第24-25页
     ·PCR 引物第25页
   ·实验方法第25-43页
     ·目的基因的分离第25-36页
       ·基因组DNA 的提取及检测第25-26页
       ·总RNA 的提取及检测第26-28页
       ·反转录cDNA 第一链的合成第28页
       ·PCR 扩增第28-29页
       ·DNA 目的片段的回收第29-30页
       ·连接反应第30页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第30-32页
       ·碱法小量质粒DNA 的提取第32-33页
       ·DNA 序列的测定第33页
       ·5' RACE第33-35页
       ·hiTAIL-PCR第35-36页
     ·小麦基因的染色体定位第36-37页
       ·中国春缺体-四体小麦基因组DNA 的提取第36页
       ·等位基因特异PCR 定位小麦基因第36-37页
     ·基因的时空表达模式分析第37-38页
       ·取材第37页
       ·小麦基因的时空表达模式检测第37-38页
     ·转化拟南芥用过量表达载体的构建第38-39页
     ·根癌农杆菌感受态细胞的制备与转化第39-40页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第39页
       ·冻融法转化农杆菌第39-40页
     ·拟南芥的种植、转基因及遗传杂交技术第40-41页
       ·拟南芥的栽培第40页
       ·拟南芥的转化第40-41页
       ·转基因植株分析第41页
       ·拟南芥的遗传杂交第41页
     ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因的RNAi 载体的构建第41-43页
3 结果与分析第43-65页
   ·小麦TaTOC1-1、TaTOC1-2 和TaTOC1-3 基因的分离第43-44页
   ·TaTOC1-1、TaTOC1-2 和TaTOC1-3 基因的染色体定位第44-46页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 的氨基酸序列分析第46-50页
   ·小麦祖先物种中TOC1 同源基因的序列比较第50-52页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因在不同器官中的表达分析第52-53页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和 TaTOC1-D 基因的昼夜节律性表达 分析第53-57页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因的上游调控序列的分析第57-59页
   ·TaTOC1-D 可能是 TaMIR408 的靶基因第59-62页
   ·缺体-四体小麦的抽穗时间及TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因的表达变化第62-65页
4 讨论第65-72页
   ·小麦TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因是拟南芥TOC1 的同源基因第65页
   ·小麦进化过程中TOC1 同源基因之间的重组第65-66页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因的昼夜节律性表达受到光的调控第66-68页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因对小麦生物钟的贡献第68-69页
   ·小麦生物钟可能受到microRNA 的直接调控第69-70页
   ·TaTOC1-A、TaTOC1-B 和TaTOC1-D 基因在小麦开花途径中的功能第70-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-85页
附录第85-91页
攻读学位期间发表论文情况第91-92页
致谢第92页

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