| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-35页 |
| ·代谢工程 | 第18-20页 |
| ·酿酒酵母代谢工程 | 第19-20页 |
| ·辅酶在代谢中的作用及辅酶代谢工程(Cofacotr engineering)的研究进展 | 第20-25页 |
| ·酿酒酵母的辅酶代谢 | 第20-24页 |
| ·酿酒酵母辅酶代谢工程的研究进展 | 第24-25页 |
| ·重组酿酒酵母木糖代谢工程的研究进展 | 第25-29页 |
| ·重组酿酒酵母木糖代谢过程中辅酶氧化还原不平衡问题的研究进展 | 第29-33页 |
| ·改变XR或XDH的辅酶结合特异性解决木糖代谢过程中辅酶氧化还原不平衡问题 | 第30页 |
| ·利用辅酶代谢工程解决木糖代谢过程中辅酶氧化还原不平衡问题 | 第30-33页 |
| ·本论文的研究意义以及主要内容 | 第33-35页 |
| 第二章 改变木糖醇脱氢酶的辅酶结合特异性对重组酿酒酵母木糖代谢的影响 | 第35-50页 |
| ·导言 | 第35-36页 |
| ·材料与方法 | 第36-42页 |
| ·分子克隆用酶和试剂 | 第36-37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·微生物学技术 | 第37-38页 |
| ·分子生物学方法 | 第38-40页 |
| ·粗酶液的制备 | 第40-41页 |
| ·酶活测定方法 | 第41页 |
| ·葡萄糖木糖共发酵试验 | 第41页 |
| ·发酵生长曲线的测定 | 第41-42页 |
| ·发酵产物分析 | 第42页 |
| ·结果 | 第42-49页 |
| ·重组质粒和菌株的构建 | 第42-46页 |
| ·木糖还原酶以及木糖醇脱氢酶酶活性的测定 | 第46-47页 |
| ·重组菌株木糖发酵实验 | 第47-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 超表达NADH激酶对重组酿酒酵母葡萄糖代谢以及木糖代谢的影响 | 第50-66页 |
| ·导言 | 第50-53页 |
| ·材料与方法 | 第53-55页 |
| ·分子操作用酶及试剂盒 | 第53页 |
| ·培养基的制备 | 第53-54页 |
| ·菌株生长及发酵条件 | 第54页 |
| ·菌体细胞干重的测定 | 第54页 |
| ·胞外代谢物的测定 | 第54-55页 |
| ·结果 | 第55-64页 |
| ·重组质粒和菌株的构建 | 第55-56页 |
| ·酶活测定 | 第56-59页 |
| ·以葡萄糖为碳源的分批发酵 | 第59-61页 |
| ·以葡萄糖木糖为碳源的厌氧分批发酵 | 第61-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 辅酶水平的扰动对酿酒酵母中心糖代谢的影响 | 第66-85页 |
| ·导言 | 第66-67页 |
| ·材料与方法 | 第67-71页 |
| ·分子操作用酶及试剂盒 | 第67页 |
| ·培养基 | 第67-68页 |
| ·菌株生长及发酵条件 | 第68页 |
| ·菌体细胞干重的测定 | 第68-69页 |
| ·胞外代谢物的测定 | 第69页 |
| ·胞内代谢物的抽提 | 第69页 |
| ·细胞内代谢物的测定 | 第69页 |
| ·数学模型的建立 | 第69-71页 |
| ·结果 | 第71-83页 |
| ·重组质粒和菌株的构建 | 第71-73页 |
| ·分批培养重组菌株的生理特性的研究 | 第73-75页 |
| ·重组菌株胞内辅酶的水平 | 第75-78页 |
| ·重组菌株胞内代谢物的水平 | 第78-80页 |
| ·稀释率不断增加的恒化培养条件下重组菌株的生理特性 | 第80-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| 第五章 增加NADH的浓度对酿酒酵母代谢流的影响 | 第85-100页 |
| ·引言 | 第85页 |
| ·材料与方法 | 第85-88页 |
| ·分子操作用酶及试剂盒 | 第85-86页 |
| ·培养基 | 第86页 |
| ·菌株生长及发酵条件的控制 | 第86-87页 |
| ·菌体细胞干重的测定 | 第87页 |
| ·胞外代谢物的测定 | 第87页 |
| ·胞内代谢物的抽提 | 第87-88页 |
| ·细胞内代谢物的测定 | 第88页 |
| ·荧光显微照片的获得 | 第88页 |
| ·结果 | 第88-97页 |
| ·重组质粒和菌株的构建 | 第88-90页 |
| ·甲酸脱氢酶的定位 | 第90-91页 |
| ·重组菌株对甲酸吸收的研究 | 第91-92页 |
| ·增加NADH的浓度对代谢产物的影响 | 第92-95页 |
| ·增加NADH的水平对细胞内代谢物的影响 | 第95-97页 |
| ·讨论 | 第97-100页 |
| ·恒化培养添加甲酸的分析 | 第98页 |
| ·添加甲酸的调控分析 | 第98-100页 |
| 第六章 调节的NADH水平降低甘油积累 | 第100-110页 |
| ·导言 | 第100-101页 |
| ·材料与方法 | 第101-103页 |
| ·分子操作用酶及试剂盒 | 第101页 |
| ·培养基 | 第101-102页 |
| ·菌株生长及发酵条件 | 第102页 |
| ·菌体细胞干重的测定 | 第102-103页 |
| ·胞外代谢物的测定 | 第103页 |
| ·结果与讨论 | 第103-110页 |
| ·重组质粒和菌株的构建 | 第103-105页 |
| ·重组菌株的生理特性 | 第105-110页 |
| 全文总结 | 第110-112页 |
| 附录1 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第123-124页 |
| 外文论文1 | 第124-146页 |
| 外文论文2 | 第146-173页 |
