| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-41页 |
| 1 研究背景 | 第15-16页 |
| 2 三江源自然保护区概况 | 第16-17页 |
| 3 土壤产N_2O微生物生态学研究 | 第17-21页 |
| ·土壤N_2O产生及排放的机理 | 第17-18页 |
| ·反硝化作用 | 第17页 |
| ·硝化作用 | 第17-18页 |
| ·影响土壤N_2O排放的主要因素 | 第18-21页 |
| ·土壤温度 | 第18页 |
| ·土壤含水量 | 第18-19页 |
| ·土壤pH值 | 第19页 |
| ·土壤质地 | 第19-20页 |
| ·农业管理措施 | 第20页 |
| ·土壤冰冻与融化 | 第20-21页 |
| 4 土壤微生物生态学研究内容 | 第21-30页 |
| ·土壤微生物量的研究 | 第21-23页 |
| ·土壤微生物量的基本特征 | 第21-22页 |
| ·土壤微生物量测定方法 | 第22-23页 |
| ·土壤酶的研究 | 第23-24页 |
| ·土壤酶的基本特征 | 第23-24页 |
| ·土壤酶的测定方法 | 第24页 |
| ·土壤微生物多样性的研究 | 第24-30页 |
| ·土壤微生物多样性的基本特征 | 第24-27页 |
| ·土壤微生物多样性的研究方法 | 第27-30页 |
| 5 T-RFLP技术在环境微生物研究中的应用 | 第30-35页 |
| ·T-RFLP技术的原理 | 第30-31页 |
| ·T-RFLP技术分析微生物群落的基本步骤 | 第31-32页 |
| ·T-RFLP技术的关键环节—样品总DNA的提取 | 第32-34页 |
| ·T-RFLP分析技术在微生物群落研究中的应用 | 第34-35页 |
| 6 土壤硝化和反硝微生物多样性研究 | 第35-39页 |
| ·硝化微生物多样性研究进展 | 第36-37页 |
| ·反硝化微生物多样性研究进展 | 第37-39页 |
| 7 论文研究内容、特色和技术路线 | 第39-41页 |
| ·主要研究内容 | 第39页 |
| ·研究特色 | 第39-40页 |
| ·技术路线 | 第40-41页 |
| 第二章 三江源地区高寒草原土壤微生物活性和微生物量研究 | 第41-53页 |
| 1 材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·土壤样品 | 第41-42页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·研究地概况和样品采集 | 第42-43页 |
| ·土壤理化性状测量 | 第43-44页 |
| ·土壤微生物群落计数 | 第44页 |
| ·土壤酶活性测定 | 第44-46页 |
| ·土壤微生物量碳、氮测定 | 第46-47页 |
| ·数据分析方法 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| ·土壤有机碳和全氮含量 | 第47页 |
| ·土壤微生物区系组成 | 第47-48页 |
| ·土壤酶活性 | 第48-49页 |
| ·微生物生物量碳氮含量 | 第49-50页 |
| ·土壤微生物活性和微生物量与海拔的相关性分析 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 结论 | 第52-53页 |
| 第三章 土壤微生物总DNA的提取和纯化 | 第53-62页 |
| 1 材料与方法 | 第53-58页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·土壤样品的采集及预处理 | 第54页 |
| ·土壤总DNA提取和纯化 | 第54-57页 |
| ·方法一 | 第54-55页 |
| ·方法二 | 第55-56页 |
| ·方法三 | 第56-57页 |
| ·土壤微生物总DNA的浓度和纯度测定 | 第57页 |
| ·16S rDNA扩增及产物检测 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-61页 |
| ·土壤微生物总DNA的浓度和纯度测定 | 第58-60页 |
| ·土壤微生物总DNANanoDrop检测结果 | 第58-59页 |
| ·土壤总DNA的琼脂糖电泳结果 | 第59-60页 |
| ·PCR扩增产物检测结果 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61页 |
| 4 结论 | 第61-62页 |
| 第四章 不同海拔高度高寒草甸土硝化基因(amoA)的多样性研究 | 第62-74页 |
| 1 材料和方法 | 第63-66页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·土壤样品 | 第63页 |
| ·常用试剂及仪器 | 第63页 |
| ·方法 | 第63-66页 |
| ·DNA的提取和纯化 | 第63页 |
| ·amoA基因扩增 | 第63-64页 |
| ·PCR产物检测与回收 | 第64页 |
| ·T-RFLP限制性酶切与基因扫描(Genescan) | 第64-65页 |
| ·数据分析 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-72页 |
| ·土壤情况 | 第66-67页 |
| ·带荧光标记的硝化菌扩增结果 | 第67页 |
| ·酶切图谱分析结果 | 第67-69页 |
| ·硝化菌的群落结构 | 第69-70页 |
| ·样地内amoA基因多样性分析 | 第70页 |
| ·样地间amoA基因的多样性分析 | 第70-71页 |
| ·硝化菌群落结构多样性与生态因子相关性分析结果 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-73页 |
| 4 结论 | 第73-74页 |
| 第五章 不同海拔高度高寒草甸土反硝化基因(nirK、nosZ)的多样性研究 | 第74-90页 |
| 1 材料和方法 | 第74-78页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·土壤样品 | 第74页 |
| ·常用试剂及仪器 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75-78页 |
| ·DNA的提取和纯化 | 第75页 |
| ·nirK和nosZ基因扩增 | 第75-76页 |
| ·PCR产物检测与回收 | 第76-77页 |
| ·限制性酶切及基因指纹图谱分析 | 第77页 |
| ·数据分析 | 第77-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-87页 |
| ·土壤情况 | 第78-79页 |
| ·酶切图谱分析结果 | 第79-83页 |
| ·反硝化菌的群落结构 | 第83-84页 |
| ·样地内nirK和nosZ基因多样性分析 | 第84-85页 |
| ·样地间nirK基因和nosZ基因的多样性分析 | 第85-86页 |
| ·反硝化菌群落结构多样性与生态因子相关性分析结果 | 第86-87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 4 结论 | 第89-90页 |
| 第六章 不同海拔高度三江源高寒草地土壤细菌分子多样性研究 | 第90-100页 |
| 1 材料和方法 | 第90-93页 |
| ·材料 | 第90-91页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-93页 |
| ·样品采集 | 第91页 |
| ·土壤微生物总DNA的提取与纯化 | 第91页 |
| ·土壤微生物16S rRNA基因扩增方法 | 第91-92页 |
| ·PCR产物检测与回收 | 第92页 |
| ·T-RFLP限制性酶切与基因扫描(Genescan) | 第92页 |
| ·数据分析 | 第92-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-97页 |
| ·土壤情况 | 第93-94页 |
| ·样品总DNA提取和16S rRNA基因扩增结果 | 第94页 |
| ·T-RFLP酶切图谱分析结果 | 第94-96页 |
| ·4个样地细菌的群落结构组成 | 第96页 |
| ·样地间T—RFLP图谱的相似性分析 | 第96-97页 |
| ·细菌多样性分析及与生态因子的相关性分析 | 第97页 |
| 3 讨论 | 第97-98页 |
| 4 结论 | 第98-100页 |
| 第七章 结论 | 第100-103页 |
| 参考文献 | 第103-122页 |
| 附表A amoA基因T-RFLP分析Hae Ⅲ酶切T-RF片段大小(bp)及相对荧光强度 | 第122-123页 |
| 附表B 5个样地nirk基因T—RFLP分析Hha Ⅰ酶切T—RF片段大小(bp)及相对荧光强度 | 第123-124页 |
| 附表C 5个样地nosZ基因T—RFLP分析Hae Ⅲ酶切T—RF片段大小(bp)及相对荧光强度 | 第124-125页 |
| 附表D 4个样地16Sr基因T—RFLP分析Hae Ⅲ酶切T—RF片段大小(bp)及相对荧光强度 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 作者简介 | 第128页 |
