| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·禾谷镰刀菌概况 | 第12-16页 |
| ·小麦赤霉病概述 | 第12-14页 |
| ·禾谷镰刀菌的基本生物学特性 | 第14页 |
| ·禾谷镰刀菌基因功能研究概述 | 第14-16页 |
| ·真菌遗传转化方法概述 | 第16-17页 |
| ·原生质体-PEG 介导的转化 | 第16页 |
| ·农杆菌介导法 | 第16页 |
| ·基因沉默 | 第16页 |
| ·转座子插入突变法 | 第16-17页 |
| ·限制酶介导的转化 | 第17页 |
| ·电击转化法 | 第17页 |
| ·醋酸锂转化法 | 第17页 |
| ·脂质体转化法 | 第17页 |
| ·Sch9 研究进展 | 第17-20页 |
| ·激酶基因概述 | 第17-18页 |
| ·Sch9 研究概述 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 禾谷镰刀菌Sch9 基因敲除转化子的获得及突变体的筛选和验证 | 第21-36页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·材料、试剂、仪器及培养基 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·试剂、耗材及仪器 | 第21页 |
| ·培养基及主要试剂配方 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-31页 |
| ·禾谷镰刀菌Sch9 基因核酸序列下载 | 第22-23页 |
| ·侧翼序列扩增引物和检测引物的设计 | 第23页 |
| ·禾谷镰刀菌的培养 | 第23页 |
| ·CTAB 法提取基因组DNA | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌 DH10B 感受态的制备 | 第24页 |
| ·质粒 pCB1003 的电击转化 | 第24-25页 |
| ·质粒 pCB1003 的提取 | 第25页 |
| ·重叠PCR(split PCR) | 第25-27页 |
| ·琼脂糖凝胶DNA 回收 | 第27页 |
| ·PCR 产物浓缩 | 第27页 |
| ·原生质体制备及PGE 介导的转化 | 第27-28页 |
| ·快速提取转化子DNA | 第28页 |
| ·PCR 检测转化子 | 第28-29页 |
| ·Southern blot 验证突变体 | 第29-31页 |
| ·突变体的保存 | 第31页 |
| ·实验结果与分析 | 第31-34页 |
| ·引物设计 | 第31-33页 |
| ·获得的转化子 | 第33-34页 |
| ·Southern blot 验证结果 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 突变体Sch9 的生物学特征观察以及致病性测试 | 第36-43页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料、器材及培养基 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-38页 |
| ·突变体菌株的形态观察 | 第36页 |
| ·突变体的分生孢子数目统计和形态观察 | 第36-37页 |
| ·突变体菌丝形态观察 | 第37页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体有性生殖试验 | 第37页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体接种小麦穗的致病性实验 | 第37页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体接种玉米的致病性实验 | 第37-38页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体在不同平板上的压力筛选 | 第38页 |
| ·实验结果与分析 | 第38-42页 |
| ·突变体菌落形态及生长速度 | 第38-39页 |
| ·突变体孢子形态和产孢量 | 第39页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体菌丝形态 | 第39-40页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体在胡萝卜培养基上的有性生殖实验 | 第40页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体接种小麦穗的致病性实验 | 第40-41页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体接种玉米的致病性实验 | 第41-42页 |
| ·Sch9 基因缺失突变体在四中选择压力条件下的生长情况 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
