| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-34页 |
| ·金黄色葡萄球菌和致病性 | 第12-22页 |
| ·金黄色葡萄球菌的基本生物学特征及其分类 | 第12-13页 |
| ·金黄色葡萄球菌的分布 | 第13页 |
| ·金黄色葡萄球菌的致病性及主要致病因子 | 第13-16页 |
| ·重要的金黄色葡萄球菌全局毒力调控因子及相关调控途径 | 第16-20页 |
| ·金黄色葡萄球菌的耐药性 | 第20-21页 |
| ·金黄色葡萄球菌感染的检出、医学控制和治疗的方法及其发展方向 | 第21-22页 |
| ·金黄色葡萄球菌的机体感染及其宿主免疫防御逃逸机制 | 第22-26页 |
| ·宿主对抗金黄色葡萄球菌感染的主要免疫防御机制 | 第22-23页 |
| ·金黄色葡萄球菌对抗免疫防御的重要毒力因子及其机理 | 第23-25页 |
| ·金黄色葡萄球菌被吞噬后的免疫逃逸 | 第25-26页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物膜形成及其特性 | 第26-34页 |
| ·微生物生物膜的基本概念和特性 | 第26页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物膜的发生、成熟和转移 | 第26-28页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物膜的致病性 | 第28页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物膜形成的相关粘附因子 | 第28-29页 |
| ·金黄色葡萄球菌粘附因子在基因转录及蛋白表达水平的调控 | 第29-31页 |
| ·对金黄色葡萄球菌聚集和生物膜发生的诱导因子 | 第31页 |
| ·金黄色葡萄球菌生物膜相关感染的防治手段及其研究进展 | 第31-34页 |
| 第2章 实验结果 | 第34-48页 |
| ·免疫球蛋白具有诱导金黄色葡萄球菌聚集成团的作用 | 第34-37页 |
| ·血清诱导的金黄色葡萄球菌聚集 | 第34-35页 |
| ·血清诱导的聚集反应触发了细菌生理状态的改变 | 第35-36页 |
| ·免疫球蛋白是血清中诱导金黄色葡萄球菌聚集的重要因子 | 第36-37页 |
| ·免疫球蛋白的结构完整性可能并不是诱导聚集所必须的 | 第37-39页 |
| ·可选择Sigma因子B介导了免疫球蛋白诱导金黄色葡萄球菌生理状态切换过程中的信号传导 | 第39-43页 |
| ·agr系统在该过程中不起主导作用 | 第39-40页 |
| ·二元信号系统没有参与该过程的信号传递 | 第40页 |
| ·SarA转录水平随免疫球蛋白诱导过程逐渐加强 | 第40-42页 |
| ·可选择性sigma因子SigB介导了免疫球蛋白诱导金黄色葡萄球菌聚集的信号通路 | 第42-43页 |
| ·免疫球蛋白诱导金黄色葡萄球切换生理状态有利于细菌抗巨噬细胞吞噬和吞噬后的免疫逃逸 | 第43-48页 |
| ·巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌模型的建立 | 第43-45页 |
| ·免疫球蛋白诱导金黄色葡萄球菌聚集有利于抗巨噬细胞吞噬 | 第45页 |
| ·免疫球蛋白诱导金黄色葡萄球菌后的生理状态少许加强了细菌被吞噬后在胞内的存活能力 | 第45-48页 |
| 第3章 结果讨论 | 第48-52页 |
| ·免疫球蛋白刺激对金黄色葡萄球菌而言可能是一种特异性的机体侵入环境信号 | 第48-49页 |
| ·金黄色葡萄球菌如何感知免疫球蛋白刺激信号还有待研究 | 第49-52页 |
| 第4章 材料与方法 | 第52-74页 |
| ·菌株和细胞培养 | 第52-54页 |
| ·研究中用到的细菌菌株 | 第52-53页 |
| ·培养基、抗生素添加及培养条件 | 第53-54页 |
| ·质粒的构建和转化 | 第54-61页 |
| ·本次研究中使用的质粒 | 第54-55页 |
| ·金黄色葡萄球菌基因组DNA的提取(BBI公司的基因组抽提试剂盒) | 第55-56页 |
| ·常规PCR反应步骤 | 第56页 |
| ·搭桥法PCR反应步骤 | 第56-57页 |
| ·大肠杆菌CaCl_2感受态细胞的制备 | 第57-58页 |
| ·感受态细胞转化率的测定方法 | 第58页 |
| ·酶切反应 | 第58-59页 |
| ·线形质粒DNA的去磷化 | 第59页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA片断的回收 | 第59-60页 |
| ·DNA的连接反应 | 第60页 |
| ·大肠杆菌质粒的热激转化 | 第60页 |
| ·碱裂解法快速小量质粒抽提 | 第60-61页 |
| ·金黄色葡萄球菌的质粒转化和基因突变方法 | 第61-64页 |
| ·金黄色葡萄球菌电转化法感受态制备方法 | 第61页 |
| ·金黄色葡萄球菌的电转化法 | 第61-62页 |
| ·金黄色葡萄球菌的质粒抽提 | 第62页 |
| ·用PBT2质粒对金黄色葡萄球菌基因组进行基因位点插入失活 | 第62-63页 |
| ·用pMAD质粒对金黄色葡萄球菌基因组进行基因敲除 | 第63-64页 |
| ·金黄色葡萄球菌的RNA提取和目标RNA分析方法 | 第64-69页 |
| ·金黄色葡萄球菌的总RNA抽提(Trizol法) | 第64-65页 |
| ·用DNA酶消化提取的RNA中残余DNA污染 | 第65页 |
| ·反转录反应 | 第65-66页 |
| ·荧光实时定量PCR | 第66-67页 |
| ·Northern印迹 | 第67-69页 |
| ·地高辛标记的DNA双链探针的制备(Roche试剂盒) | 第69页 |
| ·蛋白质分析相关实验 | 第69-71页 |
| ·用Protein A偶联的琼脂糖树脂亲和纯化免疫球蛋白 | 第69-70页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白电泳 | 第70页 |
| ·蛋白质电泳湿法转膜 | 第70-71页 |
| ·Western印迹 | 第71页 |
| ·巨噬细胞吞噬细菌试验 | 第71-74页 |
| ·诱导U937单核细胞分化巨噬细胞 | 第71页 |
| ·U937巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌试验 | 第71-74页 |
| 参考文献 | 第74-94页 |
| 缩略词表 | 第94-96页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
