摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
·以PMI基因为安全标记基因在植物转基因中的应用 | 第9-13页 |
·植物转基因的发展现状 | 第9页 |
·转基因作物的安全性问题 | 第9页 |
·生物安全标记基因研究现状 | 第9-11页 |
·甘露糖筛选体系在植物转基因中的应用 | 第11-13页 |
·耐盐碱基因DHAR的生物学功能 | 第13-14页 |
·盐碱胁迫对植物的影响 | 第13页 |
·脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的生物学功能 | 第13-14页 |
·菊花转基因研究 | 第14-16页 |
·改变菊花花色的基因工程 | 第15页 |
·改变菊花形态的基因工程 | 第15-16页 |
·改变菊花花期的基因工程 | 第16页 |
·提高菊花抗性的基因工程 | 第16页 |
·研究的目的意义 | 第16-18页 |
2 PMI-PtDHAR植物表达载体的构建 | 第18-31页 |
·试验材料 | 第18-19页 |
·试验方法 | 第19-26页 |
·大肠杆菌PMI基因的克隆 | 第19-22页 |
·pCAMBIA1301-PMI载体的构建 | 第22-23页 |
·pCAMBIA1301-PMI-2D载体的构建 | 第23页 |
·LR反应构建pCAMBIA1301-PMI-PtDHAR植物表达载体 | 第23-24页 |
·农杆菌电转化及鉴定 | 第24-26页 |
·结果与分析 | 第26-31页 |
·PMI基因的克隆 | 第26-28页 |
·pCAMBIA1301-PMI载体的构建 | 第28页 |
·pCAMBIA1301-PMI-2D载体的构建 | 第28-29页 |
·LR反应构建pCAMBIA1301-PMI-PtDHAR植物表达载体 | 第29页 |
·重组质粒的转化及鉴定 | 第29-31页 |
3 露地菊甘露糖筛选体系的建立及转基因植株的获得 | 第31-47页 |
·试验材料 | 第31-32页 |
·植物材料 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·根癌农杆菌菌株和植物表达载体 | 第31-32页 |
·基本培养基 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-36页 |
·露地菊‘火焰’无菌苗体系的建立 | 第32页 |
·培养条件 | 第32页 |
·甘露糖筛选体系的优化 | 第32-33页 |
·农杆菌介导的叶盘法遗传转化及抗性苗筛选 | 第33-35页 |
·露地菊抗性植株PCR检测 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-43页 |
·甘露糖筛选体系的优化 | 第36-38页 |
·农杆菌介导的叶盘法遗传转化及抗性苗筛选 | 第38-42页 |
·抗性植株的PCR检测 | 第42-43页 |
·本章小结 | 第43页 |
·讨论 | 第43-47页 |
·甘露糖的浓度变化和加入时机 | 第43-45页 |
·筛选培养中头孢霉素的浓度变化 | 第45页 |
·遗传转化过程中各条件的优化 | 第45-46页 |
·筛选过程中抗性植株的生长发育延迟问题 | 第46页 |
·抗性植株的假阳性问题 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |