| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-28页 |
| ·猪2型链球菌病 | 第14-24页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·病原学及流行病学 | 第14-15页 |
| ·毒力相关因子 | 第15-20页 |
| ·致病机理研究 | 第20-21页 |
| ·临床症状 | 第21-22页 |
| ·猪链球菌2型感染模型 | 第22-23页 |
| ·疫苗研究 | 第23-24页 |
| ·猪链球菌2型感染宿主免疫应答研究 | 第24-25页 |
| ·基因芯片在病原微生物中的应用 | 第25-28页 |
| ·基因芯片在疾病诊断中的应用 | 第25页 |
| ·基因芯片用于病原与宿主互作 | 第25-26页 |
| ·TREM-1在病原感染过程中的作用研究 | 第26-28页 |
| 第2章 猪链球菌2型感染仔猪脾脏基因表达谱研究 | 第28-69页 |
| ·前言 | 第28-29页 |
| ·材料与方法 | 第29-42页 |
| ·菌株及培养条件 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·试验分组 | 第29-30页 |
| ·猪链球菌2型抗体的ELISA检测 | 第30页 |
| ·细菌计数 | 第30-31页 |
| ·人工感染及样品采集 | 第31页 |
| ·SS2分离鉴定 | 第31页 |
| ·脾脏总RNA提取 | 第31-32页 |
| ·RNA纯化 | 第32页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第32-33页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第33页 |
| ·双链cDNA纯化 | 第33-34页 |
| ·生物素标记cRNA | 第34页 |
| ·cRNA纯化 | 第34-35页 |
| ·cRNA片段化 | 第35页 |
| ·基因芯片杂交及分析 | 第35-36页 |
| ·芯片结果实时荧光定量PCR(qPCR)验证 | 第36-38页 |
| ·细胞信号受体表达水平分析 | 第38-39页 |
| ·小鼠感染后TREM-1的qPCR检测 | 第39页 |
| ·小鼠感染剂量确定 | 第39-41页 |
| ·TREM-1的抑制/激活对感染的影响 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-61页 |
| ·感染前SS2检测 | 第42页 |
| ·SS2感染后仔猪症状 | 第42-43页 |
| ·样品RNA质量检测 | 第43-44页 |
| ·芯片杂交结果及差异表达基因聚类分析 | 第44-46页 |
| ·差异表达基因Biological Process Gene Ontology(GO)分析 | 第46-54页 |
| ·芯片结果的qPCR验证 | 第54-55页 |
| ·细胞水平检测细胞受体表达情况 | 第55-56页 |
| ·人工感染SS2后小鼠TREM-1表达情况 | 第56-57页 |
| ·感染剂量确定 | 第57页 |
| ·细胞因子检测 | 第57-58页 |
| ·感染后细胞因子检测 | 第58-60页 |
| ·SS2感染后血液含菌量检测 | 第60页 |
| ·小鼠感染存活率 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-69页 |
| 第3章 猪链球菌2型新型亚单位疫苗研究 | 第69-93页 |
| ·前言 | 第69-70页 |
| ·材料与方法 | 第70-76页 |
| ·菌株 | 第70页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第70-71页 |
| ·蛋白表达、纯化相关试剂 | 第71页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂 | 第71-72页 |
| ·Western Blotting相关试剂 | 第72页 |
| ·ELISA相关试剂 | 第72页 |
| ·主要仪器 | 第72页 |
| ·引物设计与合成 | 第72-73页 |
| ·猪链球菌2型细菌基因组DNA提取 | 第73-74页 |
| ·目的基因PCR扩增 | 第74页 |
| ·诱导表达蛋白的SDS-PAGE鉴定 | 第74-75页 |
| ·重组蛋白的Western Blotting检测 | 第75页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第75-76页 |
| ·重组蛋白的浓度测定 | 第76页 |
| ·亚单位疫苗效果评价 | 第76-78页 |
| ·试验动物 | 第76页 |
| ·亚单位疫苗对小鼠免疫效果评价 | 第76-77页 |
| ·亚单位疫苗对仔猪免疫效果评价 | 第77-78页 |
| ·结果及分析 | 第78-91页 |
| ·疫苗用抗原蛋白基因分布检测 | 第78-80页 |
| ·纯化重组蛋白的SDS-PAGE及Western Blotting鉴定 | 第80页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第80页 |
| ·亚单位疫苗免疫后各蛋白抗体水平检测 | 第80-83页 |
| ·小鼠半数致死量测定 | 第83页 |
| ·亚单位疫苗的小鼠免疫保护力评价 | 第83-84页 |
| ·亚单位疫苗对猪的安全性评价 | 第84页 |
| ·疫苗ELISA抗体检测 | 第84-87页 |
| ·仔猪免疫保护力评价 | 第87-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| 第4章 结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-109页 |
| 附表 | 第109-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 个人资料 | 第119页 |
| 教育经历 | 第119页 |
| 在读期间发表的主要文章 | 第119-120页 |
| 已申报专利 | 第120页 |