| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-18页 |
| 1 cDNA 文库的研究进展 | 第10-12页 |
| ·cDNA 文库的分类 | 第10页 |
| ·全长cDNA 文库构建方法 | 第10-11页 |
| ·SMART 技术 | 第11页 |
| ·cDNA 文库的应用 | 第11-12页 |
| 2 植物转录因子研究进展 | 第12-13页 |
| 3 植物WRKY 转录因子 | 第13-17页 |
| ·WRKY 转录因子的结构特点 | 第14-15页 |
| ·WRKY 转录因子的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·WRKY 转录因子的应答反应模式 | 第16-17页 |
| 4 论文研究的内容和意义 | 第17-18页 |
| 第一章 野生西瓜 PI296341 根部组织 cDNA 文库的构建 | 第18-34页 |
| 1 材料和方法 | 第18-27页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·供试菌株 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料的处理 | 第18页 |
| ·RNA 的提取 | 第18-20页 |
| ·cDNA 的合成 | 第20-23页 |
| ·cDNA 片段与λTriplE×2 载体的连接 | 第23页 |
| ·噬菌体包装 | 第23页 |
| ·未扩增文库滴度的测定 | 第23-24页 |
| ·PCR 检测文库克隆重组率及重组片段长度 | 第24-25页 |
| ·文库扩增 | 第25页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第25-26页 |
| ·文库的保存 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-31页 |
| ·总RNA 的质量 | 第27页 |
| ·双链cDNA 的合成与鉴定 | 第27-28页 |
| ·cDNA 片段的分级分离 | 第28页 |
| ·cDNA 文库质量检测 | 第28-31页 |
| ·原始文库的滴度测定 | 第28-29页 |
| ·文库插入片段的PCR 检测 | 第29-30页 |
| ·原始文库的扩增 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| ·实验材料的选取 | 第31页 |
| ·RNA 质量 | 第31页 |
| ·cDNA 文库的构建及评价 | 第31-33页 |
| ·SMART 技术 | 第31-32页 |
| ·cDNA 文库的评价 | 第32-33页 |
| 4 结论 | 第33-34页 |
| 第二章 ClWRKY1 转录因子的克隆 | 第34-57页 |
| 1 材料和方法 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·酶及主要试剂 | 第34页 |
| ·载体与菌株 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-43页 |
| ·RNA 的提取 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34-36页 |
| ·西瓜ClWRKY1 基因保守区EST 的获得 | 第36-39页 |
| ·利用3′RACE 技术获得ClWRKY1 基因3′UTR | 第39-41页 |
| ·利用同源克隆的方法获得ClWRKY1 基因的5′UTR | 第41-42页 |
| ·ClWRKY1 基因5′UTR 和3′UTR 片段回收测序 | 第42页 |
| ·西瓜ClWRKY1 编码蛋白生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2 结果和分析 | 第43-54页 |
| ·ClWRKY1 保守区域的 PCR 扩增 | 第43-44页 |
| ·ClWRKY1 基因3′末端序列PCR 扩增 | 第44-45页 |
| ·ClWRKY1 基因5′末端序列PCR 扩增 | 第45-46页 |
| ·ClWRKY1 基因全长cDNA 的获得 | 第46-47页 |
| ·ClWRKY1 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第47-54页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的氨基酸序列分析 | 第47-48页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的模体预测 | 第48-49页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的亲疏水性分析 | 第49页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的信号肽分析 | 第49-50页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的跨膜域预测 | 第50页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的亚细胞定位预测 | 第50-51页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的保守结构域分析 | 第51页 |
| ·ClWRKY1 编码蛋白的功能预测 | 第51-52页 |
| ·ClWRKY1 编码的蛋白和其它作物同源性分析 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| ·同源克隆技术获得ClWRKY1 基因 | 第54页 |
| ·ClWRKY1 转录因子编码的蛋白分析 | 第54-55页 |
| ·RACE 技术获得ClWRKY1 基因的3′端 | 第55-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
