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印度芥菜BjCRP1基因的克隆、表达与抗逆性分析

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
1 综述第10-19页
   ·植物抗逆的分子生物学机制第10-12页
     ·植物抗重金属的分子生物学机制第10-11页
     ·植物耐盐的分子生物学机制第11页
     ·植物抗干旱的分子生物学机制第11-12页
   ·基因工程改良植物重金属抗性的研究进展第12-16页
     ·根际金属离子的生物利用第12-13页
     ·金属离子跨膜运载蛋白基因第13-14页
     ·植物重金属化学转化及挥发作用的遗传改变第14-15页
     ·金属硫蛋白和过量生产金属螯合肽或复合物第15-16页
   ·RAMP4 家族第16-18页
   ·本研究的内容和意义第18-19页
2 材料和方法第19-31页
   ·材料第19页
     ·植物材料第19页
     ·菌株及质粒载体第19页
     ·酶和试剂第19页
     ·主要仪器第19页
   ·方法第19-31页
     ·印度芥菜cDNA 第一条链获得方法第19-21页
     ·BjCRP1 基因的克隆、原核载体构建及表达第21-25页
     ·重组大肠杆菌BL21(pET32a- BjCRP1)的抗逆性鉴定第25-26页
     ·半定量RT-PCR 分析第26页
     ·BjCRP1 基因真核表达载体构建第26-29页
     ·拟南芥的遗传转化第29-30页
     ·BjCRP1 基因编码蛋白的生物信息学分析第30-31页
3 结果与分析第31-48页
   ·印度芥菜 BjCRP1 基因的克隆及原核表达载体构建与表达第31-34页
     ·印度芥菜总RNA 检测第31页
     ·BjCRP1 原核表达载体的构建第31-33页
     ·BjCRP1 原核诱导表达分析第33-34页
   ·重组大肠杆菌BL21(pET32a- BjCRP1)的抗逆性分析第34-36页
     ·重组大肠杆菌BL21(pET32a- BjCRP1)对CdC12 的抗性第34页
     ·重组大肠杆菌BL21(pET32a- BjCRP1)对NaCl 的抗性第34-36页
   ·BjCRP1 基因响应非生物胁迫的转录表达分析第36-40页
     ·最佳循环数的确定第36页
     ·未处理印度芥菜中不同组织BjCRP1 的mRNA 水平分析第36-37页
     ·不同胁迫条件下印度芥菜BjCRP1 基因的转录丰度变化第37-40页
   ·BjCRP1 基因真核表达载体的构建第40-42页
     ·BjCRP1 中间重组子的构建第40-41页
     ·真核表达载体和目的基因的连接第41-42页
   ·BjCRP1 基因生物信息学分析第42-48页
     ·肽链的亲/疏水性分析第42页
     ·编码蛋白的氨基酸序列分析第42-43页
     ·二级结构分析第43页
     ·信号肽分析第43-44页
     ·BjCRP1 基因跨膜域分析第44-45页
     ·BjCRP1 基因编码蛋白的亚细胞定位预测第45页
     ·BjCRP1 基因编码蛋白的功能预测第45-46页
     ·BjCRP1 基因编码蛋白的膜体预测第46-47页
     ·BjCRP1 和其它作物同源性分析第47-48页
4 讨论第48-52页
   ·关于原核表达和重组大肠杆菌的抗逆性分析第48页
   ·关于半定量RT-PCR第48-49页
   ·关于生物信息学分析第49-52页
参考文献第52-57页
附录第57-60页
在读期间发表论文第60-61页
作者简历第61页
申报国家发明专利第61页
国际基因数据库注册新基因第61-62页
致谢第62-63页

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