| 英文缩写表 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-16页 |
| 1 ITSN蛋白简介 | 第8-11页 |
| ·ITSN蛋白的结构 | 第8-9页 |
| ·ITSN蛋白的功能 | 第9-11页 |
| 2 RABEP1蛋白简介 | 第11-12页 |
| 3 网格蛋白有被小泡与转铁蛋白的内吞 | 第12-14页 |
| ·网格蛋白有被小泡(clathrin-coated vesicle) | 第12-13页 |
| ·转铁蛋白(transferrin)受体介导的内吞 | 第13-14页 |
| 4 泛素—蛋白酶体途径 | 第14-16页 |
| ·蛋白质泛素化系统 | 第14-15页 |
| ·蛋白酶体 | 第15-16页 |
| 第一部分 材料与方法 | 第16-28页 |
| 1 材料 | 第16-18页 |
| ·菌种和细胞株 | 第16页 |
| ·载体、工具酶和si-RNA | 第16页 |
| ·质粒 | 第16-17页 |
| ·抗体 | 第17页 |
| ·相关试剂 | 第17页 |
| ·所需溶液 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-28页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第18-19页 |
| ·GST pull-down实验验证ITSN2-L与RABEP1体外相互作用 | 第19-21页 |
| ·细胞培养 | 第21-22页 |
| ·免疫共沉淀实验验证ITSN2-L与RABEP1体内相互作用 | 第22-23页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第23-24页 |
| ·RNA干扰实验 | 第24-26页 |
| ·转铁蛋白内吞实验 | 第26-28页 |
| 第二部分 结果与分析 | 第28-41页 |
| 1 酵母双杂交筛选ITSN2-L的相互作用蛋白 | 第28-29页 |
| 2 ITSN2-L与RABEP1蛋白的相互作用 | 第29-35页 |
| ·酵母双杂交验证ITSN2-L与RABEP1相互作用 | 第29-30页 |
| ·GST pull-down实验验证ITSN2-L与RABEP1体外相互作用 | 第30-32页 |
| ·免疫共沉淀实验验证ITSN2-L与RABEP1体内相互作用 | 第32-34页 |
| ·细胞免疫荧光实验验ITSN2-L与RABEP1在细胞内共定位 | 第34-35页 |
| 3 过表达ITSN2-L促进RABEP1蛋白降解 | 第35-38页 |
| ·过表达ITSN2-L促进RABEP1蛋白降解 | 第35-37页 |
| ·干扰ITSN2-L蛋白的表达抑制RABEP1蛋白降解 | 第37-38页 |
| 4 ITSN2-L与RABEP1蛋白影响转铁蛋白的内吞 | 第38-41页 |
| 第三部分 讨论 | 第41-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
