摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
1.1 神经干细胞 | 第14-16页 |
1.1.1 神经干细胞概述 | 第14页 |
1.1.2 NSCs的生物学特性 | 第14-15页 |
1.1.3 人胚胎干细胞来源的神经干细胞 | 第15-16页 |
1.1.4 NSCs对坐骨神经损伤的作用 | 第16页 |
1.2 细胞外微囊泡与坐骨神经 | 第16-18页 |
1.2.1 微囊泡概述 | 第16-17页 |
1.2.2 MVs对坐骨神经损伤的作用 | 第17-18页 |
1.3 小结 | 第18-19页 |
第二章 研究目的意义、方法、内容 | 第19-21页 |
2.1 研究目的及意义 | 第19页 |
2.2 研究方法 | 第19页 |
2.3 研究内容 | 第19-21页 |
2.3.1 hESC-NSCs的诱导及鉴定 | 第19-20页 |
2.3.2 hESC-NSC-MVs对坐骨神经5mm缺损性损伤的修复作用 | 第20-21页 |
第三章 胚胎干细胞的神经干细胞诱导分化及鉴定 | 第21-36页 |
3.1 材料 | 第21-23页 |
3.1.1 细胞来源 | 第21页 |
3.1.2 主要仪器 | 第21页 |
3.1.3 试剂 | 第21-23页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第23页 |
3.2 方法 | 第23-26页 |
3.2.1 无饲养层hESCs的培养 | 第23页 |
3.2.2 hESCs诱导成NSCs | 第23-24页 |
3.2.3 贴壁-球转化 | 第24页 |
3.2.4 神经球自发分化 | 第24页 |
3.2.5 流式细胞检测 | 第24页 |
3.2.6 免疫荧光检测 | 第24-25页 |
3.2.7 PCR检测 | 第25-26页 |
3.3 统计分析 | 第26-27页 |
3.4 结果 | 第27-33页 |
3.4.1 hESCs向hESC-NSCs分化 | 第27页 |
3.4.2 hESC-NSCs的神经标志物特征 | 第27-28页 |
3.4.3 不同代数的hESC-NSCs的神经标志物特征 | 第28-29页 |
3.4.4 贴壁hESC-NSCs形成的神经球的自发分化 | 第29-31页 |
3.4.5 hESC-NSCs的贴壁-球转化 | 第31-33页 |
3.5 讨论 | 第33-36页 |
第四章 人胚胎干细胞源神经干细胞的微囊泡对坐骨神经缺损性损伤的修复作用 | 第36-51页 |
4.1 材料 | 第36-38页 |
4.1.1 细胞来源 | 第36页 |
4.1.2 实验用动物 | 第36-37页 |
4.1.3 仪器 | 第37页 |
4.1.4 试剂 | 第37页 |
4.1.5 试剂配制 | 第37-38页 |
4.2 方法 | 第38-41页 |
4.2.1 hESC-NSC-MVs的提取与浓度测定 | 第38页 |
4.2.2 Nanosight可视型纳米微粒分析仪检測hESC-NSC-MVs的直径分布 | 第38页 |
4.2.3 DRG的提取 | 第38页 |
4.2.4 DRG的培养和纯化 | 第38-39页 |
4.2.5 hESC-NSC-MVs与DRG共培养 | 第39页 |
4.2.6 构建大鼠坐骨神经缺损性损伤模型 | 第39-40页 |
4.2.7 分组和给药剂量 | 第40页 |
4.2.8 外部体征观察 | 第40页 |
4.2.9 坐骨神经功能指数 | 第40-41页 |
4.2.10 腓肠肌湿重及恢复率检测 | 第41页 |
4.2.11 标本组织的收集和制备 | 第41页 |
4.3 统计分析 | 第41页 |
4.4 结果 | 第41-48页 |
4.4.1 hESC-NSC-MVs及鉴定 | 第41-42页 |
4.4.2 hESC-NSC-MVs促进DRG轴突生长 | 第42-43页 |
4.4.3 术后外部体征观察 | 第43-44页 |
4.4.4 坐骨神经指数测定和腓肠肌湿重恢复率 | 第44-45页 |
4.4.5 再生神经纤维结构 | 第45-47页 |
4.4.6 腓肠肌HE染色 | 第47-48页 |
4.5 讨论 | 第48-51页 |
实验结论及展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
综述 | 第61-73页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
期间发表文章 | 第74页 |