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利用基因沉默技术研究map-1和Cg-1基因对南方根结线虫毒性的影响

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第10-11页
上篇 文献综述第11-33页
    第一章 根结线虫的发生、危害及防治第13-17页
        1 根结线虫的发生与分布第13页
        2 根结线虫的危害第13-15页
        3 根结线虫的防治第15-17页
    第二章 根结线虫的抗性基因第17-22页
        1 已克隆和定位的植物抗线虫基因第17-18页
        2 植物的根结线虫抗性基因第18-22页
            2.1 野生番茄中的抗性基因Mi第18-20页
            2.2 辣椒属植物中的抗性基因N和Me第20-22页
    第三章 植物与线虫的互作及线虫的RNAi研究第22-33页
        1 植物的免疫系统PTI和ETI第22-24页
        2 根结线虫效应分子的研究进展第24-26页
        3 RNAi在植物寄生线虫基因功能研究中的应用第26-33页
            3.1 RNAi概述第26-28页
            3.2 植物寄生线虫的离体RNAi第28-31页
            3.3 植物寄生线虫的活体RNAi第31页
            3.4 TRV介导的线虫基因沉默第31-33页
下篇 研究内容第33-63页
    第一章 南方根结线虫无毒性相关基因map-1和Cg-1的离体RNAi第35-49页
        1 材料与方法第36-41页
            1.1 试剂与仪器第36-37页
            1.2 供试生物材料第37页
            1.3 南方根结线虫J2的收集第37-38页
            1.4 无毒群体2龄幼虫的RNA提取和cDNA第一链的合成第38页
            1.5 dsRNA的合成第38-40页
            1.6 靶基因map-1和Cg-1的离体RNAi第40页
            1.7 靶基因map-1和Cg-1的RT-qRCR检测第40页
            1.8 线虫接种及表型检测第40-41页
            1.9 统计方差分析第41页
        2 结果与分析第41-47页
            2.1 靶基因map-1和Cg-1的dsRNA合成第41-43页
            2.2 间苯二酚刺激J2取食的观察第43页
            2.3 离体RNAi的靶基因RT-qPCR检测第43页
            2.4 线虫离体RNAi的表型检测第43-47页
        3 讨论第47-49页
    第二章 TRV介导的map-1和Cg-1基因的活体沉默第49-63页
        1 材料与方法第51-54页
            1.1 试剂与仪器第51页
            1.2 供试生物材料第51页
            1.3 无毒群体2龄幼虫的RNA提取和cDNA第一链的合成第51页
            1.4 map-1和Cg-1重组载体的获得第51-52页
            1.5 pTRV2重组载体的构建与农杆菌转化第52-53页
            1.6 农杆菌注射抗性番茄第53-54页
            1.7 RT-PCR检测重组TRV第54页
            1.8 线虫接种后的表型变化检测第54页
            1.9 统计方差分析第54页
        2 结果与分析第54-61页
            2.1 南方根结线虫map-1和Cg-1目的基因片段的获得第54-55页
            2.2 map-1和Cg-1基因片段的重组载体构建第55页
            2.3 pTRV2沉默载体的构建第55-57页
            2.4 沉默载体的农杆菌转化及注射番茄后的表型观察第57-58页
            2.5 重组TRV的RT-PCR检测第58-59页
            2.6 线虫接种后的表型检测第59-61页
        3 讨论第61-63页
全文结论第63-65页
参考文献第65-79页
附录第79-81页
致谢第81页

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