摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-33页 |
第一章 根结线虫的发生、危害及防治 | 第13-17页 |
1 根结线虫的发生与分布 | 第13页 |
2 根结线虫的危害 | 第13-15页 |
3 根结线虫的防治 | 第15-17页 |
第二章 根结线虫的抗性基因 | 第17-22页 |
1 已克隆和定位的植物抗线虫基因 | 第17-18页 |
2 植物的根结线虫抗性基因 | 第18-22页 |
2.1 野生番茄中的抗性基因Mi | 第18-20页 |
2.2 辣椒属植物中的抗性基因N和Me | 第20-22页 |
第三章 植物与线虫的互作及线虫的RNAi研究 | 第22-33页 |
1 植物的免疫系统PTI和ETI | 第22-24页 |
2 根结线虫效应分子的研究进展 | 第24-26页 |
3 RNAi在植物寄生线虫基因功能研究中的应用 | 第26-33页 |
3.1 RNAi概述 | 第26-28页 |
3.2 植物寄生线虫的离体RNAi | 第28-31页 |
3.3 植物寄生线虫的活体RNAi | 第31页 |
3.4 TRV介导的线虫基因沉默 | 第31-33页 |
下篇 研究内容 | 第33-63页 |
第一章 南方根结线虫无毒性相关基因map-1和Cg-1的离体RNAi | 第35-49页 |
1 材料与方法 | 第36-41页 |
1.1 试剂与仪器 | 第36-37页 |
1.2 供试生物材料 | 第37页 |
1.3 南方根结线虫J2的收集 | 第37-38页 |
1.4 无毒群体2龄幼虫的RNA提取和cDNA第一链的合成 | 第38页 |
1.5 dsRNA的合成 | 第38-40页 |
1.6 靶基因map-1和Cg-1的离体RNAi | 第40页 |
1.7 靶基因map-1和Cg-1的RT-qRCR检测 | 第40页 |
1.8 线虫接种及表型检测 | 第40-41页 |
1.9 统计方差分析 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-47页 |
2.1 靶基因map-1和Cg-1的dsRNA合成 | 第41-43页 |
2.2 间苯二酚刺激J2取食的观察 | 第43页 |
2.3 离体RNAi的靶基因RT-qPCR检测 | 第43页 |
2.4 线虫离体RNAi的表型检测 | 第43-47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第二章 TRV介导的map-1和Cg-1基因的活体沉默 | 第49-63页 |
1 材料与方法 | 第51-54页 |
1.1 试剂与仪器 | 第51页 |
1.2 供试生物材料 | 第51页 |
1.3 无毒群体2龄幼虫的RNA提取和cDNA第一链的合成 | 第51页 |
1.4 map-1和Cg-1重组载体的获得 | 第51-52页 |
1.5 pTRV2重组载体的构建与农杆菌转化 | 第52-53页 |
1.6 农杆菌注射抗性番茄 | 第53-54页 |
1.7 RT-PCR检测重组TRV | 第54页 |
1.8 线虫接种后的表型变化检测 | 第54页 |
1.9 统计方差分析 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-61页 |
2.1 南方根结线虫map-1和Cg-1目的基因片段的获得 | 第54-55页 |
2.2 map-1和Cg-1基因片段的重组载体构建 | 第55页 |
2.3 pTRV2沉默载体的构建 | 第55-57页 |
2.4 沉默载体的农杆菌转化及注射番茄后的表型观察 | 第57-58页 |
2.5 重组TRV的RT-PCR检测 | 第58-59页 |
2.6 线虫接种后的表型检测 | 第59-61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
全文结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-79页 |
附录 | 第79-81页 |
致谢 | 第81页 |