| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 中英文缩略表 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-35页 |
| 第一章 多西环素的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.1 多西环素的历史 | 第15-16页 |
| 1.2 抗菌活性及耐药性产生机制 | 第16页 |
| 1.3 四环素的非抑菌活性 | 第16-19页 |
| 1.3.1 抑制基质金属蛋白酶 | 第17页 |
| 1.3.2 多西环素抑制细胞炎症因子的表达 | 第17-18页 |
| 1.3.3 多西环素抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡 | 第18页 |
| 1.3.4 多西环素损伤线粒体的功能 | 第18-19页 |
| 1.4 多西环素在兽医临床上的应用 | 第19-21页 |
| 第二章 线粒体自噬的研究进展 | 第21-26页 |
| 2.1 NIX/BNIP3L和BNIP3是线粒体自噬的受体 | 第21-22页 |
| 2.2 FUNDC1及其翻译后修饰影响线粒体自噬 | 第22页 |
| 2.3 线粒体动态和线粒体自噬的关系 | 第22-23页 |
| 2.4 受体介导的线粒体自噬通路 | 第23页 |
| 2.5 自噬和先天性免疫的关系 | 第23-25页 |
| 2.5.1 免疫信号分子调控自噬进程 | 第23页 |
| 2.5.2 自噬相关蛋白调节先天性免疫反应 | 第23-25页 |
| 2.6 线粒体动态调节先天性免疫反应 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二篇 试验部分 | 第35-69页 |
| 第三章 多西环素诱导肠上皮细胞线粒体自噬的研究 | 第35-57页 |
| 3.1 试验材料和方法 | 第36-42页 |
| 3.1.1 细胞 | 第36页 |
| 3.1.2 试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 抗体和质粒 | 第37页 |
| 3.1.4 试验仪器 | 第37页 |
| 3.1.5 主要缓冲液及试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.1.6 CCK-8检测多西环素对IPEC-J2细胞活力的影响 | 第38页 |
| 3.1.7 流式细胞术检测多西环素对IPEC-J2细胞凋亡的影响 | 第38页 |
| 3.1.8 多西环素对IPEC-J2细胞活性氧,线粒体活性氧和线粒体膜电位的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.9 荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞抗氧化基因(Nrf2和SOD2)mRNA水平 | 第39页 |
| 3.1.10 流式检测多西环素处理后细胞线粒体损伤 | 第39-40页 |
| 3.1.11 Western Blot检测多西环素处理后细胞LC3B的表达 | 第40页 |
| 3.1.12 荧光显微镜观察多西环素处理后细胞中mTFP-L3C的分布 | 第40页 |
| 3.1.13 荧光显微镜观察多西环素处理后细胞中mRFP-mWasabi-LC3 | 第40页 |
| 3.1.13 透射电镜观察多西环素处理后细胞中线粒体的形态 | 第40-41页 |
| 3.1.14 激光共聚焦显微镜多西环素处理后细胞中的线粒体自噬 | 第41页 |
| 3.1.15 激光共聚焦显微镜观察多西环素处理后细胞完全线粒体自噬 | 第41-42页 |
| 3.1.16 统计分析 | 第42页 |
| 3.2 结果 | 第42-52页 |
| 3.2.1 多西环素对IPEC-J2细胞活力没有影响也不会诱导细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 3.2.2 多西环素引起IPEC-J2细胞氧化应激并引起线粒体损伤 | 第44-46页 |
| 3.2.3 多西环素诱导IPEC-J2细胞完全自噬 | 第46-48页 |
| 3.2.4 多西环素诱导IPEC-J2细胞完全线粒体自噬 | 第48-52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 第四章 多西环素抑制肠上皮细胞IFNβ产生的研究 | 第57-69页 |
| 4.1 试验材料和方法 | 第58-60页 |
| 4.1.1 细胞和病毒 | 第58页 |
| 4.1.2 主要试剂和质粒 | 第58页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第58页 |
| 4.1.4 转染Poly (I:C)对IPEC-J2细胞的影响 | 第58-59页 |
| 4.1.5 多西环素对IFNβ,IFIT1和DDX58 mRNA表达的影响 | 第59页 |
| 4.1.6 多西环素对ISRE和NF-κB活性的影响 | 第59页 |
| 4.1.7 多西环素对TGEV在IPEC-J2细胞上复制的影响 | 第59-60页 |
| 4.1.8 多西环素对干扰ATG5的IPEC-J2细胞线粒体的影响 | 第60页 |
| 4.1.9 干扰ATG5后,多西环素对TGEV复制和IFNβ产生的影响 | 第60页 |
| 4.2 实验结果 | 第60-65页 |
| 4.2.1 Poly (I:C)在IPEC-J2细胞上的最适转染浓度 | 第60-61页 |
| 4.2.2 多西环素对IPEC-J2细胞IFNβ产生及其通路的影响 | 第61-63页 |
| 4.2.3 多西环素诱导IPEC-J2细胞自噬促进TGEV的复制 | 第63-64页 |
| 4.2.3 干扰ATG5抑制多西环素对TGEV复制的促进作用 | 第64-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-69页 |
| 全文结论 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 论文发表情况 | 第73页 |
