| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| 1.1 节肢动物天然免疫系统的组成 | 第8页 |
| 1.2 天然免疫系统防御病原体的机制 | 第8-10页 |
| 1.3 模式识别受体在免疫通路中的作用机制 | 第10页 |
| 1.4 肽聚糖识别蛋白 | 第10-14页 |
| 1.4.1 病原体病原相关分子模式 | 第10-11页 |
| 1.4.2 肽聚糖识别蛋白的结构 | 第11-12页 |
| 1.4.3 肽聚糖识别蛋白的分类 | 第12-13页 |
| 1.4.4 肽聚糖识别蛋白的功能 | 第13页 |
| 1.4.5 已知肽聚糖识别蛋白的作用模式 | 第13-14页 |
| 1.5 立题依据 | 第14-15页 |
| 2 试验材料与方法 | 第15-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第15-16页 |
| 2.1.2 细菌侵染与材料采集 | 第16-17页 |
| 2.2 试验试剂 | 第17-18页 |
| 2.3 主要仪器与设备 | 第18页 |
| 2.4 双链RNA干扰 | 第18-19页 |
| 2.5 不同条件下埃及伊蚊免疫相关基因的转录水平 | 第19-23页 |
| 2.5.1 RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.5.2 cDNA的合成 | 第20-21页 |
| 2.5.3 qPCR引物的设计与合成 | 第21-23页 |
| 2.5.4 qPCR反应 | 第23页 |
| 2.5.5 数据处理 | 第23页 |
| 2.6 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白基因AaPGRP-LC的克隆 | 第23-28页 |
| 2.6.1 埃及伊蚊RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.6.2 cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.6.3 引物设计及PCR | 第24页 |
| 2.6.4 载体线性化和PCR扩增 | 第24-25页 |
| 2.6.5 构建基因AaPGRP-LC全长载体 | 第25-28页 |
| 2.7 AaPGRP-LC蛋白的表达和纯化 | 第28-29页 |
| 2.7.1 表达 | 第28页 |
| 2.7.2 纯化 | 第28-29页 |
| 2.7.3 免疫印迹分析 | 第29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| 3.1 阴沟肠杆菌的感染可以激活埃及伊蚊抗菌肽基因的表达 | 第29-30页 |
| 3.2 AaPGRP-LC调节抗菌肽基因的表达 | 第30-32页 |
| 3.3 AaPGRP-LC调节IMD通路下游基因的表达 | 第32页 |
| 3.4 AaPGRP-LC调节Toll通路下游基因的表达 | 第32-34页 |
| 3.5 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白基因AaPGRP-LC的克隆 | 第34-38页 |
| 3.5.1 埃及伊蚊全蚊RNA提取结果 | 第34页 |
| 3.5.2 PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| 3.5.3 菌落PCR结果 | 第35-36页 |
| 3.5.4 测序结果分析 | 第36-38页 |
| 3.6 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AaPGRP-LC的表达纯化 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 4.1 研究肽聚糖识别蛋白的意义 | 第39页 |
| 4.2 抗菌肽在埃及伊蚊免疫监视机制中的作用 | 第39-40页 |
| 4.3 肽聚糖识别蛋白对埃及伊蚊免疫监视机制的影响 | 第40-41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| Abstract | 第47页 |
| 研究生期间发表论文 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
