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肽聚糖识别蛋白参与埃及伊蚊的抗细菌免疫反应

摘要第7-8页
1 前言第8-15页
    1.1 节肢动物天然免疫系统的组成第8页
    1.2 天然免疫系统防御病原体的机制第8-10页
    1.3 模式识别受体在免疫通路中的作用机制第10页
    1.4 肽聚糖识别蛋白第10-14页
        1.4.1 病原体病原相关分子模式第10-11页
        1.4.2 肽聚糖识别蛋白的结构第11-12页
        1.4.3 肽聚糖识别蛋白的分类第12-13页
        1.4.4 肽聚糖识别蛋白的功能第13页
        1.4.5 已知肽聚糖识别蛋白的作用模式第13-14页
    1.5 立题依据第14-15页
2 试验材料与方法第15-29页
    2.1 试验材料第15-17页
        2.1.1 供试昆虫第15-16页
        2.1.2 细菌侵染与材料采集第16-17页
    2.2 试验试剂第17-18页
    2.3 主要仪器与设备第18页
    2.4 双链RNA干扰第18-19页
    2.5 不同条件下埃及伊蚊免疫相关基因的转录水平第19-23页
        2.5.1 RNA提取第19-20页
        2.5.2 cDNA的合成第20-21页
        2.5.3 qPCR引物的设计与合成第21-23页
        2.5.4 qPCR反应第23页
        2.5.5 数据处理第23页
    2.6 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白基因AaPGRP-LC的克隆第23-28页
        2.6.1 埃及伊蚊RNA的提取第23-24页
        2.6.2 cDNA的合成第24页
        2.6.3 引物设计及PCR第24页
        2.6.4 载体线性化和PCR扩增第24-25页
        2.6.5 构建基因AaPGRP-LC全长载体第25-28页
    2.7 AaPGRP-LC蛋白的表达和纯化第28-29页
        2.7.1 表达第28页
        2.7.2 纯化第28-29页
        2.7.3 免疫印迹分析第29页
3 结果与分析第29-39页
    3.1 阴沟肠杆菌的感染可以激活埃及伊蚊抗菌肽基因的表达第29-30页
    3.2 AaPGRP-LC调节抗菌肽基因的表达第30-32页
    3.3 AaPGRP-LC调节IMD通路下游基因的表达第32页
    3.4 AaPGRP-LC调节Toll通路下游基因的表达第32-34页
    3.5 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白基因AaPGRP-LC的克隆第34-38页
        3.5.1 埃及伊蚊全蚊RNA提取结果第34页
        3.5.2 PCR扩增结果第34-35页
        3.5.3 菌落PCR结果第35-36页
        3.5.4 测序结果分析第36-38页
    3.6 埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AaPGRP-LC的表达纯化第38-39页
4 讨论第39-41页
    4.1 研究肽聚糖识别蛋白的意义第39页
    4.2 抗菌肽在埃及伊蚊免疫监视机制中的作用第39-40页
    4.3 肽聚糖识别蛋白对埃及伊蚊免疫监视机制的影响第40-41页
5 小结第41-42页
参考文献第42-47页
Abstract第47页
研究生期间发表论文第49-51页
致谢第51-52页

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