摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 魔芋简介 | 第11-12页 |
1.2 珠芽魔芋研究概况 | 第12-14页 |
1.2.1 珠芽魔芋简述 | 第12页 |
1.2.2 珠芽魔芋的繁殖方式 | 第12-13页 |
1.2.3 珠芽魔芋的无融合生殖 | 第13-14页 |
1.3 珠芽魔芋种子休眠研究进展 | 第14-16页 |
1.3.1 珠芽魔芋种子休眠的原因及打破休眠的方法 | 第14-15页 |
1.3.2 种子萌发中内含物的变化 | 第15-16页 |
1.3.2.1 贮藏淀粉的转变 | 第15-16页 |
1.3.2.2 贮藏蛋白质的转变 | 第16页 |
1.4 ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因ADP-GLUCOSE PYROPHOSPHORYLASE(AGP)基因研究现状 | 第16-18页 |
1.4.1 AGP与植物淀粉的关系 | 第16-17页 |
1.4.2 ADP-焦磷酸化酶(AGP)的结构 | 第17页 |
1.4.3 AGP与葡甘聚糖的关系 | 第17-18页 |
1.5 珠芽魔芋内参基因的研究 | 第18-19页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 八种珠芽魔芋无融合生殖性状鉴定 | 第21页 |
2.1.1 八种珠芽魔芋花器官性状调查试验 | 第21页 |
2.1.2 八种珠芽魔芋无融合生殖率的统计 | 第21页 |
2.2 弥勒魔芋种子提早萌发和生理生化测定 | 第21-24页 |
2.2.1 实验药品 | 第21页 |
2.2.2 主要仪器 | 第21-22页 |
2.2.3 实验材料 | 第22页 |
2.2.4 赤霉素对弥勒魔芋种子萌发的影响 | 第22页 |
2.2.5 萌发种子生理生化测定 | 第22-24页 |
2.3 弥勒魔芋AmAGP基因的克隆 | 第24-29页 |
2.3.1 实验材料 | 第24页 |
2.3.2 菌株 | 第24-25页 |
2.3.3 载体 | 第25页 |
2.3.4 酶、试剂及培养基 | 第25页 |
2.3.5 PCR引物 | 第25页 |
2.3.6 仪器 | 第25页 |
2.3.7 CTAB法提取RNA | 第25-26页 |
2.3.8 RNA含量与纯度检测 | 第26页 |
2.3.9 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
2.3.10 基因扩增 | 第27页 |
2.3.11 目的片段的回收 | 第27-28页 |
2.3.12 连接反应 | 第28页 |
2.3.13 感受态细胞的转化 | 第28页 |
2.3.14 大肠杆菌转化的筛选 | 第28-29页 |
2.3.15 AmAGP基因的生物学分析 | 第29页 |
2.4 弥勒魔芋内参基因18S的克隆 | 第29-30页 |
2.4.1 PCR引物 | 第30页 |
2.4.2 弥勒魔芋18S基因的生物信息学分析 | 第30页 |
2.5 弥勒魔芋AGP半定量和定量测定 | 第30-33页 |
2.5.1 弥勒魔芋半定量测定 | 第30-31页 |
2.5.1.1 材料 | 第30页 |
2.5.1.2 主要仪器 | 第30页 |
2.5.1.3 RNA提取及cDNA的获得 | 第30页 |
2.5.1.4 半定量PCR引物 | 第30-31页 |
2.5.1.5 AmAGP基因的半定量测定 | 第31页 |
2.5.2 弥勒魔芋定量测定 | 第31-33页 |
2.5.2.1 材料 | 第31页 |
2.5.2.2 主要仪器 | 第31-32页 |
2.5.2.3 定量PCR引物 | 第32页 |
2.5.2.4 AmAGP基因的实时荧光定量PCR检测组织特异性表达 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 八种珠芽魔芋生殖发育性状田间观察 | 第33-38页 |
3.1.1 八种珠芽魔芋花器官性状调查 | 第33-35页 |
3.1.2 珠芽魔芋无融合生殖率统计 | 第35-37页 |
3.1.3 弥勒魔芋生长发育特性观察 | 第37-38页 |
3.2 弥勒魔芋种子赤霉素处理及内含物检测 | 第38-40页 |
3.2.1 不同浓度赤霉素溶液对弥勒魔芋种子萌发率的影响 | 第38-39页 |
3.2.2 萌发种子内含物的检测 | 第39-40页 |
3.3 AmAGP基因的克隆与生物信息学分析 | 第40-45页 |
3.3.1 AmAGP序列同源性分析 | 第41页 |
3.3.2 弥勒魔芋AGP蛋白的同源性分析 | 第41-42页 |
3.3.3 弥勒魔芋AmAGP蛋白的生物信息学分析 | 第42-43页 |
3.3.4 弥勒魔芋AmAGP蛋白序列进化树分析 | 第43-45页 |
3.4 弥勒魔芋内参基因18S分析 | 第45-46页 |
3.5 弥勒魔芋AmAGP基因的时空表达分析 | 第46-47页 |
3.5.1 AmAGP基因不同部位半定量分析 | 第46页 |
3.5.2 AmAGP基因不同部位定量分析 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-52页 |
4.1 珠芽魔芋的生殖性状研究 | 第47页 |
4.2 弥勒魔芋种子萌发的因素及解决途径 | 第47-49页 |
4.2.1 弥勒魔芋种子的休眠类型 | 第47-48页 |
4.2.2 促进弥勒魔芋种子发芽的因素 | 第48-49页 |
4.3 弥勒魔芋AmAGP基因的功能研究 | 第49页 |
4.4 弥勒魔芋内参基因的研究 | 第49-50页 |
4.5 弥勒魔芋AmAGP基因的表达分析 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
5.1 弥勒魔芋具有无融合生殖性状 | 第52页 |
5.2 赤霉素促进弥勒魔芋种子的萌发 | 第52页 |
5.3 AmAGP基因的克隆与时空表达 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
缩略词表 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
在读期间获得成果 | 第61页 |