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弥勒魔芋生殖发育特性分析及淀粉合成相关基因AmAGP的克隆

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 前言第11-21页
    1.1 魔芋简介第11-12页
    1.2 珠芽魔芋研究概况第12-14页
        1.2.1 珠芽魔芋简述第12页
        1.2.2 珠芽魔芋的繁殖方式第12-13页
        1.2.3 珠芽魔芋的无融合生殖第13-14页
    1.3 珠芽魔芋种子休眠研究进展第14-16页
        1.3.1 珠芽魔芋种子休眠的原因及打破休眠的方法第14-15页
        1.3.2 种子萌发中内含物的变化第15-16页
            1.3.2.1 贮藏淀粉的转变第15-16页
            1.3.2.2 贮藏蛋白质的转变第16页
    1.4 ADP-葡萄糖焦磷酸化酶基因ADP-GLUCOSE PYROPHOSPHORYLASE(AGP)基因研究现状第16-18页
        1.4.1 AGP与植物淀粉的关系第16-17页
        1.4.2 ADP-焦磷酸化酶(AGP)的结构第17页
        1.4.3 AGP与葡甘聚糖的关系第17-18页
    1.5 珠芽魔芋内参基因的研究第18-19页
    1.6 本研究的目的及意义第19-21页
2 材料与方法第21-33页
    2.1 八种珠芽魔芋无融合生殖性状鉴定第21页
        2.1.1 八种珠芽魔芋花器官性状调查试验第21页
        2.1.2 八种珠芽魔芋无融合生殖率的统计第21页
    2.2 弥勒魔芋种子提早萌发和生理生化测定第21-24页
        2.2.1 实验药品第21页
        2.2.2 主要仪器第21-22页
        2.2.3 实验材料第22页
        2.2.4 赤霉素对弥勒魔芋种子萌发的影响第22页
        2.2.5 萌发种子生理生化测定第22-24页
    2.3 弥勒魔芋AmAGP基因的克隆第24-29页
        2.3.1 实验材料第24页
        2.3.2 菌株第24-25页
        2.3.3 载体第25页
        2.3.4 酶、试剂及培养基第25页
        2.3.5 PCR引物第25页
        2.3.6 仪器第25页
        2.3.7 CTAB法提取RNA第25-26页
        2.3.8 RNA含量与纯度检测第26页
        2.3.9 cDNA第一链的合成第26-27页
        2.3.10 基因扩增第27页
        2.3.11 目的片段的回收第27-28页
        2.3.12 连接反应第28页
        2.3.13 感受态细胞的转化第28页
        2.3.14 大肠杆菌转化的筛选第28-29页
        2.3.15 AmAGP基因的生物学分析第29页
    2.4 弥勒魔芋内参基因18S的克隆第29-30页
        2.4.1 PCR引物第30页
        2.4.2 弥勒魔芋18S基因的生物信息学分析第30页
    2.5 弥勒魔芋AGP半定量和定量测定第30-33页
        2.5.1 弥勒魔芋半定量测定第30-31页
            2.5.1.1 材料第30页
            2.5.1.2 主要仪器第30页
            2.5.1.3 RNA提取及cDNA的获得第30页
            2.5.1.4 半定量PCR引物第30-31页
            2.5.1.5 AmAGP基因的半定量测定第31页
        2.5.2 弥勒魔芋定量测定第31-33页
            2.5.2.1 材料第31页
            2.5.2.2 主要仪器第31-32页
            2.5.2.3 定量PCR引物第32页
            2.5.2.4 AmAGP基因的实时荧光定量PCR检测组织特异性表达第32-33页
3 结果与分析第33-47页
    3.1 八种珠芽魔芋生殖发育性状田间观察第33-38页
        3.1.1 八种珠芽魔芋花器官性状调查第33-35页
        3.1.2 珠芽魔芋无融合生殖率统计第35-37页
        3.1.3 弥勒魔芋生长发育特性观察第37-38页
    3.2 弥勒魔芋种子赤霉素处理及内含物检测第38-40页
        3.2.1 不同浓度赤霉素溶液对弥勒魔芋种子萌发率的影响第38-39页
        3.2.2 萌发种子内含物的检测第39-40页
    3.3 AmAGP基因的克隆与生物信息学分析第40-45页
        3.3.1 AmAGP序列同源性分析第41页
        3.3.2 弥勒魔芋AGP蛋白的同源性分析第41-42页
        3.3.3 弥勒魔芋AmAGP蛋白的生物信息学分析第42-43页
        3.3.4 弥勒魔芋AmAGP蛋白序列进化树分析第43-45页
    3.4 弥勒魔芋内参基因18S分析第45-46页
    3.5 弥勒魔芋AmAGP基因的时空表达分析第46-47页
        3.5.1 AmAGP基因不同部位半定量分析第46页
        3.5.2 AmAGP基因不同部位定量分析第46-47页
4 讨论第47-52页
    4.1 珠芽魔芋的生殖性状研究第47页
    4.2 弥勒魔芋种子萌发的因素及解决途径第47-49页
        4.2.1 弥勒魔芋种子的休眠类型第47-48页
        4.2.2 促进弥勒魔芋种子发芽的因素第48-49页
    4.3 弥勒魔芋AmAGP基因的功能研究第49页
    4.4 弥勒魔芋内参基因的研究第49-50页
    4.5 弥勒魔芋AmAGP基因的表达分析第50-52页
5 结论第52-53页
    5.1 弥勒魔芋具有无融合生殖性状第52页
    5.2 赤霉素促进弥勒魔芋种子的萌发第52页
    5.3 AmAGP基因的克隆与时空表达第52-53页
参考文献第53-59页
缩略词表第59-60页
致谢第60-61页
在读期间获得成果第61页

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