摘要 | 第9-11页 |
abstract | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第13-21页 |
1.1 肝癌简述 | 第13页 |
1.2 药用植物治疗肝癌的作用机制简述 | 第13-14页 |
1.3 肝癌细胞凋亡简述 | 第14-15页 |
1.4 凋亡相关基因简述 | 第15-16页 |
1.4.1 Bcl-2 基因家族 | 第15页 |
1.4.2 P53基因 | 第15页 |
1.4.3 Ced基因家族 | 第15页 |
1.4.4 ICE基因家族 | 第15-16页 |
1.4.5 Fas和Fas配体(FasL) | 第16页 |
1.4.6 C-myc基因 | 第16页 |
1.5 药用植物治疗肝癌的信号通路简述 | 第16-17页 |
1.5.1 死亡受体通路 | 第16-17页 |
1.5.2 线粒体通路 | 第17页 |
1.5.3 内质网通路 | 第17页 |
1.6 药用植物治疗肝癌疾病的研究意义及展望 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-21页 |
第二章 药用植物提取物的抗肝癌活性筛选 | 第21-28页 |
2.1 前言 | 第21页 |
2.2 实验材料、仪器与试剂 | 第21-22页 |
2.2.1 实验材料 | 第21页 |
2.2.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.2.3 实验试剂 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-24页 |
2.3.1 细胞培养 | 第22页 |
2.3.2 细胞传代 | 第22-23页 |
2.3.3 细胞冻存与复苏 | 第23页 |
2.3.4 药用植物的提取物制备 | 第23-24页 |
2.3.5 MTT法筛选具有抗肝癌活性的药用植物提取物 | 第24页 |
2.4 实验结果 | 第24-25页 |
2.5 讨论 | 第25-26页 |
参考文献 | 第26-28页 |
第三章 池杉的抗肝癌活性及其作用机制研究 | 第28-51页 |
3.1 前言 | 第28页 |
3.2 实验材料、仪器与试剂 | 第28-31页 |
3.2.1 实验材料 | 第28页 |
3.2.2 实验仪器 | 第28-29页 |
3.2.3 实验试剂 | 第29-31页 |
3.3 单体化合物的分离与纯化 | 第31-32页 |
3.3.1 药材的提取 | 第31页 |
3.3.2 LC-PDA-ESIMS分析方法 | 第31-32页 |
3.3.3 分离与纯化 | 第32页 |
3.4 体外实验 | 第32-35页 |
3.4.1 细胞活力的测定 | 第32-33页 |
3.4.2 倒置相差显微镜观察形态学变化 | 第33页 |
3.4.3 Hoechst 33258 染色实验 | 第33页 |
3.4.4 流式细胞术(FACS)分析 | 第33页 |
3.4.5 DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳分析 | 第33-34页 |
3.4.6 Western Blot检测相关凋亡蛋白的表达 | 第34-35页 |
3.5 体内实验 | 第35-36页 |
3.5.1 实验动物 | 第35页 |
3.5.2 H22移植瘤的建立及药物治疗 | 第35页 |
3.5.3 Hoechst 33258 染色瘤切片实验 | 第35-36页 |
3.5.4 全血和血清生化指标的检测 | 第36页 |
3.5.5 急毒实验 | 第36页 |
3.5.6 数据统计 | 第36页 |
3.6 实验结果 | 第36-45页 |
3.6.1 化学成分分析 | 第36-37页 |
3.6.2 MTT法检测肿瘤细胞的活力 | 第37-38页 |
3.6.3 倒置相差显微镜观察形态学变化 | 第38-39页 |
3.6.4 荧光显微镜观察形态学变化 | 第39页 |
3.6.5 流式细胞术(FACS)分析 | 第39-41页 |
3.6.6 TALE对细胞DNA双链断裂的影响 | 第41页 |
3.6.7 TALE对凋亡相关蛋白的表达水平的影响 | 第41-42页 |
3.6.8 TALE对H22荷瘤小鼠脏器指数的影响 | 第42-44页 |
3.6.9 荧光染色检测移植瘤细胞核的变化 | 第44-45页 |
3.6.10 TALE对H22荷瘤小鼠血常规及肝肾功能的影响 | 第45页 |
3.6.11 TALE对昆明小鼠毒性的影响 | 第45页 |
3.7 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
第四章 云木香的体内外抗肝癌活性研究 | 第51-59页 |
4.1 前言 | 第51页 |
4.2 实验材料、仪器与试剂 | 第51-52页 |
4.2.1 实验材料 | 第51页 |
4.2.2 实验仪器 | 第51-52页 |
4.2.3 实验试剂 | 第52页 |
4.3 云木香石油醚提取物(ALPE)的制备 | 第52页 |
4.4 体外实验 | 第52-53页 |
4.4.1 细胞活力的测定 | 第52-53页 |
4.4.2 显微镜下观察形态学变化 | 第53页 |
4.5 体内实验 | 第53页 |
4.5.1 实验动物 | 第53页 |
4.5.2 H22移植瘤的建立及血液检查 | 第53页 |
4.6 实验结果 | 第53-57页 |
4.6.1 MTT法检测肝癌细胞的活力 | 第53-54页 |
4.6.2 显微镜下观察形态学变化 | 第54页 |
4.6.3 ALPE对H22荷瘤小鼠脏器指数的影响 | 第54-55页 |
4.6.4 荧光染色观察移植瘤的变化 | 第55-56页 |
4.6.5 ALPE对H22荷瘤小鼠血常规及肝肾功能的影响 | 第56-57页 |
4.7 讨论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
第五章 苦参的体外抗肝癌活性研究 | 第59-66页 |
5.1 前言 | 第59页 |
5.2 实验材料、仪器与试剂 | 第59-60页 |
5.2.1 实验材料 | 第59页 |
5.2.2 实验仪器 | 第59-60页 |
5.2.3 实验试剂 | 第60页 |
5.3 实验部分 | 第60-61页 |
5.3.1 药材的提取与分离 | 第60-61页 |
5.3.2 苦参单体化合物体外抗肝癌活性筛选 | 第61页 |
5.4 实验结果 | 第61-63页 |
5.4.1 化学成分分析 | 第61-62页 |
5.4.2 抗肝癌活性筛选结果 | 第62-63页 |
5.5 讨论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-66页 |
结论 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录A ABBREVIATIONS | 第68-69页 |
附录B 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |