| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 课题提出 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状及水平 | 第12-18页 |
| 1.2.1 L-半乳糖合成途径 | 第12-14页 |
| 1.2.2 GDP-L-半乳糖磷酸化酶（GDP-L-galactose phosphorylase,GGP） | 第14-15页 |
| 1.2.3 植物启动子 | 第15-16页 |
| 1.2.4 AsA的调控因子 | 第16-18页 |
| 1.3 研究的目的意义及主要内容 | 第18-20页 |
| 1.3.1 研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 1.3.2 研究的主要内容 | 第19-20页 |
| 1.3.2.1 载体构建、遗传转化以及转基因植株筛选 | 第19页 |
| 1.3.2.2 RrGGP启动子在转基因拟南芥中的启动活性 | 第19页 |
| 1.3.2.3 RrGGP在转基因拟南芥中的表达效应 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料的培养和处理 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试验仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.4 酶及化学试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 引物 | 第21-22页 |
| 2.1.6 培养基及试剂配制 | 第22页 |
| 2.2 试验设计 | 第22-24页 |
| 2.2.1 植物表达载体构建及遗传转化拟南芥 | 第22-23页 |
| 2.2.2 转基因植株的筛选及验证 | 第23-24页 |
| 2.2.3 转基因拟南芥对环境及外源生长物质的响应 | 第24页 |
| 2.3 试验方法 | 第24-31页 |
| 2.3.1 植物总DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.2 植物总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.3.3 First-Strand cDNA合成 | 第25页 |
| 2.3.4 刺梨RrGGP及其启动子与报告基因GUS的分离 | 第25-26页 |
| 2.3.5 目的片段回收 | 第26页 |
| 2.3.6 真核表达载体的构建、遗传转化以及转基因植株筛选 | 第26-29页 |
| 2.3.6.1 连接反应 | 第26页 |
| 2.3.6.2 大肠杆菌转化及克隆筛选 | 第26-27页 |
| 2.3.6.3 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.6.4 表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.3.6.5 超量表达载体对拟南芥的遗传转化 | 第27-29页 |
| 2.3.7 非生物胁迫处理 | 第29页 |
| 2.3.8 GUS报告基因的定性定量检测 | 第29页 |
| 2.3.9 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第29页 |
| 2.3.10 转基因拟南芥筛选及AsA含量测定 | 第29-30页 |
| 2.3.11 试验数据处理方法 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.1 超量表达载体构建及转基因植株的筛选 | 第31-35页 |
| 3.1.1 超量表达载体构建 | 第31-33页 |
| 3.1.2 转基因植株的阳性检测 | 第33-34页 |
| 3.1.3 转基因拟南芥植株的PCR筛选 | 第34-35页 |
| 3.2 刺梨GGP基因启动子驱动GUS表达特征分析 | 第35-37页 |
| 3.2.1 刺梨GGP基因启动子活性分析 | 第35-36页 |
| 3.2.2 刺梨GGP基因启动子不同处理下的活性 | 第36-37页 |
| 3.3 转基因植株的表达量分析和AsA含量测定 | 第37-40页 |
| 3.3.1 转基因拟南芥叶片中GGP基因表达量的分析 | 第37-38页 |
| 3.3.2 转基因拟南芥叶片中AsA含量的分析 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 4.1 GGP基因在高等植物维生素合成中的作用及其异源表达效应 | 第40-41页 |
| 4.2 RrGGP基因启动子特征、效应及其对环境响应的机制 | 第41-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩略词表 | 第51-52页 |
| 在读硕士期间发表的论文 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
