| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| ·丝氨酸蛋白抑制剂的分类 | 第12-15页 |
| ·Kunitz家族 | 第12-13页 |
| ·Kazal家族 | 第13页 |
| ·Bowman-Birk家族 | 第13-14页 |
| ·serpin家族 | 第14-15页 |
| ·PI-家族 | 第15页 |
| ·其他 | 第15页 |
| ·昆虫丝氨酸蛋白酶级联反应的研究 | 第15-17页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联反应 | 第15-16页 |
| ·丝氨酸蛋白酶级联反应在昆虫免疫中的作用 | 第16-17页 |
| ·serpin研究进展 | 第17-18页 |
| ·生长因子及其一般特性 | 第18-19页 |
| ·类成虫盘生长因子(imaginal disc growth factor,IDGF)的简介 | 第19-21页 |
| ·成虫盘(imaginal disc) | 第19页 |
| ·几丁质酶 | 第19-20页 |
| ·IDGF研究进展 | 第20-21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21页 |
| ·Bmserpin-2的研究目的和意义 | 第21页 |
| ·BmIDGF的研究目的和意义 | 第21页 |
| ·主要研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| ·主要研究内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·菌种和载体 | 第23页 |
| ·昆虫、病毒、细胞系和细胞培养基 | 第23页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第23页 |
| ·其他试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂的配制 | 第24-26页 |
| ·方法 | 第26-31页 |
| ·氯化钙法制备感受态细胞 | 第26-27页 |
| ·连接、转化及质粒DNA的小量制备 | 第27-28页 |
| ·PCR反应 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第28页 |
| ·Western印迹 | 第28-29页 |
| ·蛋白纯化、多克隆抗体的制备及纯化 | 第29页 |
| ·家蚕组织总RNA提取及反转录PCR | 第29-30页 |
| ·质谱鉴定 | 第30-31页 |
| ·免疫荧光及共聚焦显微镜观察 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 第三章 家蚕Bmserpin-2基因的克隆鉴定及生物信息学分析 | 第32-38页 |
| ·材料和试剂 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·Bmserpin-2基因的克隆及测序 | 第32页 |
| ·Bmserpin-2基因的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·Bmserpin-2基因克隆与测序 | 第33-34页 |
| ·Bmserpin-2基因序列与结构分析 | 第34-35页 |
| ·Bmserpin-2的保守性分析及系统发育树的构建 | 第35-36页 |
| ·讨论与总结 | 第36-38页 |
| 第四章 家蚕Bmserpin-2的表达分析 | 第38-43页 |
| ·材料和试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·Bmserpin-2基因在家蚕幼虫不同发育时期的转录分析 | 第38-39页 |
| ·Bmserpin-2基因在家蚕五龄幼虫各组织的转录分析 | 第39页 |
| ·接种BmNPV后,Bmserpin-2在家蚕品系306和NB中肠的荧光定量分析 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-41页 |
| ·Bmserpin-2基因在家蚕幼虫不同发育时期和五龄幼虫各组织的转录分析 | 第40-41页 |
| ·接种BmNPV后,Bmserpin-2在家蚕品系306和NB中肠的荧光定量分析 | 第41页 |
| ·讨论与总结 | 第41-43页 |
| 第五章 家蚕Bmserpin-2基因的原核表达、抗体制备以及亚细胞定位 | 第43-49页 |
| ·材料和试剂 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·Bmserpin-2基因表达载体的构建 | 第43页 |
| ·Bmserpin-2基因在大肠杆菌中的表达 | 第43-44页 |
| ·质谱鉴定 | 第44页 |
| ·Bmserpin-2的蛋白纯化及抗体制备 | 第44页 |
| ·Bmserpin-2蛋白的亚细胞定位 | 第44页 |
| ·讨论与总结 | 第44-47页 |
| ·Bmserpin-2的表达载体构建和重组蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·蛋白纯化,抗体制备与抗体的检测 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的质谱鉴定 | 第46-47页 |
| ·Bmserpin-2在家蚕卵母细胞中的亚细胞定位 | 第47页 |
| ·讨论与总结 | 第47-49页 |
| 第六章 BmIDGF基因的克隆及生物信息学分析 | 第49-54页 |
| ·材料和试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·BmIDGF基因的克隆及测序 | 第49-50页 |
| ·BmIDGF基因的生物信息学分析 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·BmIDGF基因的克隆及测序 | 第50-51页 |
| ·基因序列分析和保守性分析 | 第51-52页 |
| ·基因的染色体定位分析 | 第52-53页 |
| ·讨论与总结 | 第53-54页 |
| 第七章 BmIDGF的原核表达、抗体制备及亚细胞结构定位 | 第54-59页 |
| ·材料和试剂 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| ·BmIDGF基因表达载体的构建 | 第54页 |
| ·BmIDGF基因在大肠杆菌中的表达 | 第54-55页 |
| ·质谱鉴定 | 第55页 |
| ·BmIDGF的蛋白纯化及抗体制备 | 第55页 |
| ·BmIDGF蛋白的亚细胞定位 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-58页 |
| ·表达载体的构建 | 第55页 |
| ·重组蛋白的表达,鉴定及纯化 | 第55-57页 |
| ·抗体制备与检测 | 第57页 |
| ·BmIDGF在家蚕卵母细胞中的亚细胞定位 | 第57-58页 |
| ·讨论与总结 | 第58-59页 |
| 第八章 BmIDGF的表达分析 | 第59-63页 |
| ·材料和试剂 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·BmIDGF基因在家蚕蚕卵及幼虫不同发育时期的转录分析 | 第59-60页 |
| ·BmIDGF基因在家蚕五龄幼虫各组织的转录分析 | 第60页 |
| ·BmIDGF在家蚕五龄幼虫各组织中的表达分析 | 第60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-62页 |
| ·基因在家蚕蚕卵、幼虫不同发育时期及五龄幼虫各组织的转录分析 | 第60页 |
| ·BmIDGF在家蚕五龄幼虫各组织中的表达分析 | 第60-62页 |
| ·讨论与总结 | 第62-63页 |
| 第九章 主要工作总结及工作展望 | 第63-65页 |
| ·主要工作总结 | 第63页 |
| ·工作展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第71页 |
| 参加课题 | 第71页 |
