| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 缩写和符号清单 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-26页 |
| 1 畜禽遗传资源保护的意义及现状 | 第14-18页 |
| 1.1 畜禽遗传资源保护的意义 | 第14页 |
| 1.2 我国畜禽遗传资源的现状 | 第14-16页 |
| 1.3 动物遗传资源保护的方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 活体保种 | 第16页 |
| 1.3.2 生物技术保种 | 第16-18页 |
| 2 皖东牛遗传资源概况 | 第18-21页 |
| 2.1 皖东牛的资源背景及分布 | 第18-19页 |
| 2.2 皖东牛的品质特性及生产性能 | 第19-20页 |
| 2.3 皖东牛遗传资源保护现状 | 第20-21页 |
| 3 细胞系的建立及应用 | 第21-26页 |
| 3.1 细胞系建立的特点及方法 | 第22-23页 |
| 3.1.1 建立特点 | 第22页 |
| 3.1.2 建立方法 | 第22-23页 |
| 3.2 细胞的生物学检测 | 第23-25页 |
| 3.2.1 细胞形态学鉴定 | 第23-24页 |
| 3.2.2 细胞活力检测 | 第24页 |
| 3.2.3 遗传学性状分析 | 第24页 |
| 3.2.4 污染检测 | 第24-25页 |
| 3.3 细胞系的应用 | 第25-26页 |
| 试验研究 | 第26-52页 |
| 1 材料与方法 | 第27-35页 |
| 1.1 生物材料 | 第27页 |
| 1.2 主要仪器及试验耗材 | 第27-30页 |
| 1.2.1 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.2.2 试验试剂 | 第28-29页 |
| 1.2.3 试验耗材 | 第29页 |
| 1.2.4 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
| 1.3 试验方法 | 第30-35页 |
| 1.3.1 皖东牛耳组织成纤维细胞的原代培养 | 第30页 |
| 1.3.2 皖东牛冻精中上皮细胞的原代培养 | 第30-31页 |
| 1.3.3 成纤维细胞传代 | 第31-32页 |
| 1.3.4 成纤维细胞冻存 | 第32页 |
| 1.3.5 成纤维细胞复苏 | 第32页 |
| 1.3.6 成纤维细胞冻存前和复苏后的活率测定 | 第32页 |
| 1.3.7 成纤维细胞生长曲线的绘制——细胞计数法 | 第32页 |
| 1.3.8 不同品牌、不同浓度血清对成纤维细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 1.3.9 不同代次的细胞增殖情况 | 第33页 |
| 1.3.10 成纤维细胞的染色体分析 | 第33-34页 |
| 1.3.11 成纤维细胞的微生物检测 | 第34-35页 |
| 2 结果 | 第35-47页 |
| 2.1 成纤维细胞形态学观察 | 第35-37页 |
| 2.2 上皮细胞形态学观察及检测 | 第37-39页 |
| 2.3 冻存前及复苏后细胞活率测定 | 第39-40页 |
| 2.4 细胞生长曲线的绘制 | 第40-41页 |
| 2.5 不同品牌血清对成纤维细胞的影响 | 第41-42页 |
| 2.6 不同浓度血清对成纤维细胞的影响 | 第42-43页 |
| 2.7 不同代次的细胞生长比较 | 第43页 |
| 2.8 核型分析 | 第43-45页 |
| 2.9 微生物检测 | 第45-47页 |
| 3 讨论 | 第47-51页 |
| 3.1 构建体细胞系的重要意义 | 第47页 |
| 3.2 成纤维原代细胞培养 | 第47-48页 |
| 3.3 上皮细胞原代培养阴性结果分析 | 第48-49页 |
| 3.4 成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究 | 第49页 |
| 3.4.1 成纤维的体外培养 | 第49页 |
| 3.4.2 核型分析 | 第49页 |
| 3.4.3 微生物污染 | 第49页 |
| 3.5 试验试剂优化及代次间比对 | 第49-51页 |
| 3.5.1 不同品牌、不同浓度血清对细胞的影响 | 第50页 |
| 3.5.2 不同代次的细胞对比 | 第50-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 附录A | 第59-61页 |
| 附录B | 第61-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |