| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 卵菌概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 卵菌系统发育 | 第13页 |
| 1.1.2 卵菌病害 | 第13-17页 |
| 1.2 植物与卵菌互作的分子机制 | 第17-21页 |
| 1.2.1 植物免疫系统 | 第17-18页 |
| 1.2.2 胞内NLR受体的识别模式 | 第18-19页 |
| 1.2.3 ETI和PTI下游信号 | 第19-20页 |
| 1.2.4 卵菌的致病机理 | 第20-21页 |
| 1.3 RXLR效应基因研究进展 | 第21-26页 |
| 1.3.1 RXLR效应基因大量存在于疫霉菌基因组 | 第21-23页 |
| 1.3.2 RXLR效应蛋白的分泌及转运 | 第23-24页 |
| 1.3.3 RXLR效应蛋白的生物学功能研究策略 | 第24-25页 |
| 1.3.4 RXLR效应蛋白抑制植物免疫 | 第25-26页 |
| 1.3.5 RXLR效应蛋白的寄主靶标 | 第26页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 致病疫霉菌RXLR效应蛋白初步分析 | 第28-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-33页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 候选RXLR效应基因的克隆及载体构建 | 第29-31页 |
| 2.1.3 农杆菌介导的瞬时表达分析 | 第31-32页 |
| 2.1.4 亚细胞定位观察 | 第32页 |
| 2.1.5 蛋白免疫印迹 | 第32页 |
| 2.1.6 寄生疫霉接菌分析 | 第32页 |
| 2.1.7 植物培养及拟南芥转化 | 第32-33页 |
| 2.1.8 RNA提取及半定量PCR | 第33页 |
| 2.2 结果与分析 | 第33-47页 |
| 2.2.1 候选PiRXLR效应基因的分析及克隆 | 第33-34页 |
| 2.2.2 候选PiRXLR效应基因在烟草中的瞬时表达分析 | 第34-37页 |
| 2.2.3 候选PiRXLR效应蛋白在本氏烟草中的亚细胞定位分析 | 第37-38页 |
| 2.2.4 致病疫霉菌和寄生疫霉菌Avrblb2同源基因的亚细胞定位 | 第38-43页 |
| 2.2.5 Avrblb2同源基因激发烟草细胞坏死 | 第43-45页 |
| 2.2.6 Avrblb2同源基因对植物生长表型以及感病性的影响 | 第45-47页 |
| 2.3 讨论 | 第47-50页 |
| 2.3.1 RXLR效应蛋白靶向不同亚细胞结构抑制植物免疫 | 第47-48页 |
| 2.3.2 Avrblb2同源蛋白特异定位于植物细胞核 | 第48页 |
| 2.3.3 Avrblb2同源基因激发植物细胞坏死 | 第48页 |
| 2.3.4 Avrblb2同源基因对植物的影响 | 第48-50页 |
| 第三章 寄生疫霉菌RXLR效应基因PpE4功能分析 | 第50-86页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-55页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第51-52页 |
| 3.1.2 载体构建 | 第52页 |
| 3.1.3 DNA、RNA提取及实时定量PCR | 第52-53页 |
| 3.1.4 农杆菌介导的瞬时表达 | 第53页 |
| 3.1.5 病毒诱导的基因沉默 | 第53页 |
| 3.1.6 植物培养及拟南芥转化 | 第53-54页 |
| 3.1.7 寄生疫霉菌培养及转化子制备 | 第54页 |
| 3.1.8 寄生疫霉菌接菌分析 | 第54-55页 |
| 3.1.9 荧光显微镜观察 | 第55页 |
| 3.1.10 蛋白免疫印迹 | 第55页 |
| 3.2 结果与分析 | 第55-81页 |
| 3.2.1 PpE4在寄生疫霉菌侵染早期高度上调表达 | 第55-57页 |
| 3.2.2 PpE4的多态性分析 | 第57-63页 |
| 3.2.3 PpE4激发细胞坏死的分析 | 第63-67页 |
| 3.2.4 PpE4的分泌及转运 | 第67-74页 |
| 3.2.5 植物中表达PpE4使植物更感病 | 第74-76页 |
| 3.2.6 PpE4沉默减弱寄生疫霉菌的致病性 | 第76-81页 |
| 3.3 讨论 | 第81-86页 |
| 3.3.1 PpE4在侵染早期高度上调表达 | 第81页 |
| 3.3.2 PpE4从吸器分泌并转运至植物细胞 | 第81-82页 |
| 3.3.3 PpE4对病原菌毒性的贡献 | 第82-83页 |
| 3.3.4 PpE4激发的细胞死亡与植物识别相关 | 第83-84页 |
| 3.3.5 PpE4的缺失以及变异分析 | 第84-86页 |
| 第四章 与PiAvr3a共线性的寄生疫霉菌基因PpAvh3a的功能分析 | 第86-100页 |
| 4.1 材料与方法 | 第86-88页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第86-87页 |
| 4.1.2 载体构建 | 第87页 |
| 4.1.3 RNA提取及实时定量PCR | 第87页 |
| 4.1.4 PpAvh3a-mCherry过表达转化子制备及分析 | 第87-88页 |
| 4.1.5 荧光显微镜观察 | 第88页 |
| 4.1.6 PpAvh3a的瞬时表达分析 | 第88页 |
| 4.1.7 PpAvh3a转基因拟南芥的分析 | 第88页 |
| 4.1.8 胼胝质沉积分析 | 第88页 |
| 4.2 结果与分析 | 第88-98页 |
| 4.2.1 PpAvh3a与致病疫霉菌Avr3a以及寄生霜霉ATR1共线性 | 第88-90页 |
| 4.2.2 PpAvh3a与Avr3a和ATR1蛋白序列差异较大 | 第90-91页 |
| 4.2.3 PpAvh3a在寄生疫霉菌中相对保守 | 第91-92页 |
| 4.2.4 侵染过程中PpAvh3a在吸器特异积累 | 第92-94页 |
| 4.2.5 PpAvh3a-mCherry过表达转化子致病力减弱 | 第94-95页 |
| 4.2.6 PpAvh3a在烟草中不激发细胞坏死 | 第95-96页 |
| 4.2.7 PpAvh3a不抑制PTI或ETI | 第96-97页 |
| 4.2.8 在植物中表达PpAvh3a不促进病原菌侵染 | 第97-98页 |
| 4.3 讨论 | 第98-100页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第100-102页 |
| 5.1 结论 | 第100页 |
| 5.2 创新点 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
| 附录 | 第116-131页 |
| 附录1 培养基及试剂配方 | 第116-118页 |
| 附录2 候选RXLR效应基因引物 | 第118-123页 |
| 附录3 RXLR效应基因构建情况以及亚细胞定位 | 第123-125页 |
| 附录4 PpE4以及PpAvh3a相关引物及载体构建 | 第125-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
| 作者简介 | 第133页 |
