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ERK5促进PC12细胞分化的分子机制研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
英文缩略词表第13-15页
前言第15-19页
1.材料第19-25页
    1.1 主要材料试剂第19-20页
    1.2 试剂配制第20-23页
    1.3 仪器设备第23-25页
2.实验方法第25-39页
    2.1 细胞培养第25页
        2.1.1 细胞培养第25页
    2.2 慢病毒感染实验第25-26页
        2.2.1 慢病毒包装第25-26页
        2.2.2 细胞感染慢病毒实验第26页
    2.3 细胞增殖实验第26-27页
        2.3.1 细胞生长曲线第26页
        2.3.2 CCK-8检测细胞增殖第26-27页
    2.4 分化实验第27-33页
        2.4.1 NGF诱导PC12细胞分化第27页
        2.4.2 对分化细胞拍照并计数第27-28页
        2.4.3 Westernblotting检测蛋白水平第28-29页
        2.4.4 RT-PCR第29-31页
        2.4.5 RealTimePCR第31-32页
        2.4.6 免疫荧光第32-33页
    2.5 GSTPULL-DOWN实验第33-34页
        2.5.1 原核诱导第33页
        2.5.2 GST纯化第33页
        2.5.3 PULL-DOWN第33-34页
    2.6 基因组DNA的提取第34页
    2.7 CHIP实验第34-39页
        2.7.1 引物设计第34-35页
        2.7.2 预测转录因子结合位点的引物设计第35-36页
        2.7.3 ChIP实验第36-39页
3.实验结果第39-53页
    3.1 GSTPULL-DOWN结果第39-40页
        3.1.1 pGEX-6p-1-PTEN和pGEX-6p-1诱导结果第39页
        3.1.2 GST-PTEN和GST的纯化结果第39-40页
        3.1.3 GSTpulldown-Westernblotting第40页
    3.2 ERK5过表达或沉默稳定细胞株的建立第40-41页
    3.3 ERK5对PC12细胞增殖的影响第41-43页
        3.3.1 生长曲线实验结果第41-42页
        3.3.2 CCK-8实验结果第42-43页
    3.4 ERK5促进PC12细胞分化第43-46页
        3.4.1 ERK5促进PC12细胞突起增多第43-44页
        3.4.2 ERK5影响分化Marker表达水平第44-46页
    3.5 XMD8-92抑制PC12细胞分化第46-50页
        3.5.1 XMD8-92抑制ERK5活性第46-47页
        3.5.2 XMD8-92抑制PC12细胞突起第47-48页
        3.5.4 XMD8-92影响分化Marker表达水平的变化第48-50页
    3.6 ERK5过表达、沉默后对下游靶基因MRNA水平的影响第50-51页
    3.7 CHIP实验结果第51-53页
4.讨论第53-59页
5.结论第59-61页
参考文献第61-67页
综述第67-77页
    参考文献第73-77页
致谢第77-79页
攻读硕士期间发表的论文目录第79-80页

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