| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一部分 前言 | 第9-23页 |
| 1.1 雌配子体的发生过程 | 第9-12页 |
| 1.1.1 大孢子发生 | 第10页 |
| 1.1.2 雌配子体形成 | 第10-12页 |
| 1.2 雌配子体发生的遗传控制 | 第12-14页 |
| 1.2.1 大孢子发生的基因控制 | 第12-13页 |
| 1.2.2 雌配子体形成的基因控制 | 第13-14页 |
| 1.3 雄配子体的发生过程 | 第14-15页 |
| 1.3.1 小孢子发生 | 第15页 |
| 1.3.2 雄配子体形成 | 第15页 |
| 1.4 雄配子体发生的遗传控制 | 第15-17页 |
| 1.4.1 小孢子发生的基因控制 | 第15-16页 |
| 1.4.2 雄配子体形成的基因控制 | 第16-17页 |
| 1.5 双受精的形态发生过程 | 第17-19页 |
| 1.5.1 花粉管伸长与导向 | 第17-18页 |
| 1.5.2 双受精过程 | 第18-19页 |
| 1.6 双受精形态发生的遗传控制 | 第19-21页 |
| 1.6.1 花粉管伸长与导向的机制研究 | 第19-20页 |
| 1.6.2 双受精过程的机制研究 | 第20-21页 |
| 1.7 胚胎发生过程 | 第21-22页 |
| 1.8 胚胎起始发育的遗传控制 | 第22页 |
| 1.9 实验目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒载体与细菌菌株 | 第23-24页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 常用抗生素 | 第24页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 染液与培养基 | 第25-26页 |
| 2.2.1 染液与配制方法 | 第25页 |
| 2.2.2 培养基与配制方法 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-35页 |
| 2.3.1 种子种植与突变体筛选体系 | 第26页 |
| 2.3.2 表型观察实验方法 | 第26-28页 |
| 2.3.2.1 亚历山大染色 | 第26-27页 |
| 2.3.2.2 DAPI染色 | 第27页 |
| 2.3.2.3 苯胺蓝染色 | 第27页 |
| 2.3.2.4 花粉萌发 | 第27页 |
| 2.3.2.5 胚囊观察(CLSM) | 第27-28页 |
| 2.3.2.6 胚胎透明 | 第28页 |
| 2.3.2.7 GUS染色 | 第28页 |
| 2.3.2.8 扫描电子显微镜观察 | 第28页 |
| 2.3.3 遗传学实验分析方法 | 第28-29页 |
| 2.3.4 Ds/T-DNA基因组定位与纯杂合分子鉴定方法 | 第29-32页 |
| 2.3.4.1 CTAB法提取植物DNA | 第29页 |
| 2.3.4.2 TAIL PCR | 第29-31页 |
| 2.3.4.3 测序结果比对 | 第31页 |
| 2.3.4.4 纯杂合分子鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.5 基因表达的半定量检测方法 | 第32页 |
| 2.3.6 载体构建 | 第32-33页 |
| 2.3.6.1 目的片段获取 | 第32页 |
| 2.3.6.2 重组子构建过程 | 第32-33页 |
| 2.3.7 植株转染实验 | 第33页 |
| 2.3.8 转基因植株筛选与表型恢复 | 第33-34页 |
| 2.3.8.1 转基因植株系获取和纯合植株筛选与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.8.2 Ds/T-DNA纯合转基因植株筛选与表型恢复鉴定 | 第34页 |
| 2.3.8.3 kd361转基因植株与等位之间的杂交和纯合植株表型恢复实验 | 第34页 |
| 2.3.9 基因表达的组织与亚细胞定位分析 | 第34-35页 |
| 第三部分 实验结果 | 第35-51页 |
| 3.1 突变体筛选 | 第35-36页 |
| 3.2 突变体表型 | 第36-40页 |
| 3.2.1 雌配子体发育异常 | 第37-38页 |
| 3.2.2 花粉管适应性缺陷 | 第38-39页 |
| 3.2.3 胚囊受精与胚胎发育缺陷 | 第39-40页 |
| 3.3 等位突变体与kd361缺陷表型异同 | 第40-42页 |
| 3.3.1 胚胎发育之前缺陷表型比较 | 第40-41页 |
| 3.3.2 胚胎发育比较 | 第41-42页 |
| 3.4 Ds/T-DNA转座子基因组定位 | 第42-44页 |
| 3.4.1 kd361 Ds插入位点克隆 | 第42-43页 |
| 3.4.2 cs832013、Salk_141636突变体T-DNA插入位点克隆 | 第43-44页 |
| 3.5 遗传学分析结果 | 第44-45页 |
| 3.6 载体构建结果 | 第45-46页 |
| 3.7 分子互补与表型恢复实验 | 第46-49页 |
| 3.7.1 转基因纯合植株筛选 | 第46-47页 |
| 3.7.2 转基因纯合植株表型恢复验证 | 第47-49页 |
| 3.8 At4g00620基因在kd361和cs832013突变体间效应的验证 | 第49-50页 |
| 3.9 转基因纯合植株620转kd361-③后代遗传学实验分析 | 第50-51页 |
| 第四部分 分析与结论 | 第51-54页 |
| 4.1 突变体表型分析与结论 | 第51-52页 |
| 4.2 突变体遗传分析与结论 | 第52页 |
| 4.3 分子互补实验表型恢复分析与结论 | 第52-53页 |
| 4.4 研究展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
