| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写词 | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 ATG58基因影响植物生长发育 | 第10-11页 |
| 1.2 肌球蛋白的结构与功能 | 第11-12页 |
| 1.3 微丝骨架 | 第12-13页 |
| 1.3.1 微丝骨架的结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.3.2 微丝骨架参与拟南芥对盐胁迫的耐受性 | 第13页 |
| 1.4 植物抗逆性相关研究 | 第13-16页 |
| 1.4.1 盐胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| 1.4.2 植物响应盐胁迫的信号转导途径 | 第14-15页 |
| 1.4.3 其他逆境胁迫对植物的影响 | 第15-16页 |
| 1.5 脱落酸对植物早期生长发育的影响 | 第16-18页 |
| 1.5.1 ABA对植物萌发的影响 | 第17页 |
| 1.5.2 ABA对植物幼苗生长的影响 | 第17-18页 |
| 1.6 立题依据 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 质粒载体与菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 常用培养基配置 | 第20-21页 |
| 2.1.5 常用培养液配置 | 第21页 |
| 2.1.6 引物的设计与合成 | 第21页 |
| 2.1.7 PCR引物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 材料的种植 | 第21-22页 |
| 2.2.2 拟南芥基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.3 基因扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.4 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 2.2.5 拟南芥总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.6 反转录制备拟南芥c DNA | 第24页 |
| 2.2.7 盐胁迫下种子萌发率及子叶变绿的统计 | 第24页 |
| 2.2.8 渗透胁迫处理下种子的萌发率 | 第24-25页 |
| 2.2.9 ABA处理 | 第25页 |
| 2.3 载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.3.1 目的基因扩增 | 第25页 |
| 2.3.2 酶切产物的连接和质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.3.3 重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| 2.3.4 农杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| 2.3.5 农杆菌的转化 | 第27页 |
| 2.3.6 农杆菌转染拟南芥 | 第27-28页 |
| 2.3.7 拟南芥转基因植物的筛选 | 第28页 |
| 2.4 β-葡萄糖苷酸酶GUS组织化学分析 | 第28页 |
| 2.4.1 GUS组织化学染色溶液配制 | 第28页 |
| 2.4.2 GUS组织化学染色过程 | 第28页 |
| 2.5 共聚焦显微镜观察GFP荧光 | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-44页 |
| 3.1 研究材料的获得与鉴定及其半定量分析 | 第30页 |
| 3.1.1 拟南芥T-DNA插入突变体atg58和atg990的获得与鉴定 | 第30页 |
| 3.2 盐胁迫下ATG990及其同源基因对种子萌发和幼苗生长的影响 | 第30-38页 |
| 3.2.1 atg990突变体萌发延迟 | 第30-31页 |
| 3.2.2 ABA对突变体萌发的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.3 ABA不敏感突变体中ATG990的表达分析 | 第32-33页 |
| 3.2.4 在不同NaCl浓度梯度下的萌发 | 第33-34页 |
| 3.2.5 盐胁迫下幼苗的生长状况 | 第34-35页 |
| 3.2.6 100 m M Na Cl处理下脯氨酸含量测定 | 第35页 |
| 3.2.7 在不同Na Cl浓度梯度下ATG990表达量 | 第35-36页 |
| 3.2.8 在不同Na Cl浓度下根伸长的差异 | 第36-37页 |
| 3.2.9 atg58 × atg990双突变体植株的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 ATG58与ATG990基因GUS植株的构建与鉴定 | 第38-41页 |
| 3.3.1 ATG58::p CAMBIA1391-GUS载体构建 | 第38-39页 |
| 3.3.2 ATG58基因GUS植株的构建与鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.3 ATG990::p CAMBIA1391-GUS载体构建 | 第40-41页 |
| 3.4 ATG990基因回补载体以及超表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.4.1 ATG990::p CAMBIA1300-GFP超表达载体构建 | 第41-42页 |
| 3.4.2 ATG990::p CAMBIA1300-EGFP回补载体构建 | 第42-43页 |
| 3.5 YC3.6 转atg58与atg990植株的筛选与鉴定 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 ATG58和ATG990基因对生长发育早期的影响 | 第44页 |
| 4.2 ATG990基因可能参与盐胁迫信号途径 | 第44-45页 |
| 4.3 ABA处理对ATG990基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
