| 前言 | 第4-6页 |
| 中文摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 综述 | 第20-42页 |
| 1.1 microRNA概述 | 第20-21页 |
| 1.2 甲状腺癌 | 第21-22页 |
| 1.3 甲状腺癌和MICRORNA的关系 | 第22-40页 |
| 1.3.1 microRNA与PTC的关系 | 第22-25页 |
| 1.3.2 microRNA与FTC的关系 | 第25页 |
| 1.3.3 microRNA与ATC的关系 | 第25-28页 |
| 1.3.4 microRNA与PDTC的关系 | 第28页 |
| 1.3.5 microRNA与MTC的关系 | 第28-30页 |
| 1.3.6 microRNA的合成关键蛋白和甲状腺肿瘤的关系 | 第30-31页 |
| 1.3.7 甲状腺癌患者循环系统中microRNA的价值 | 第31-32页 |
| 1.3.8 microRNA在甲状腺癌中的诊断价值 | 第32-37页 |
| 1.3.9 microRNA在甲状腺癌中的筛查和判断治疗效果中价值： | 第37-40页 |
| 1.4 总结 | 第40-42页 |
| 第2章 材料和方法 | 第42-62页 |
| 2.1 伦理审核 | 第42页 |
| 2.2 患者资料和标本收集 | 第42页 |
| 2.3 所用细胞系的培养和转染 | 第42-44页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第42页 |
| 2.3.2 所用细胞系的培养及传代 | 第42-43页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第43页 |
| 2.3.4 细胞转染 | 第43-44页 |
| 2.3.5 化学合成microRNAs以及转染 | 第44页 |
| 2.4 定量逆转录聚合酶链反应步骤 | 第44-48页 |
| 2.4.1 试剂和器具的处理方法 | 第44页 |
| 2.4.2 总RNA提取 | 第44-45页 |
| 2.4.3 电泳分析总RNA | 第45-46页 |
| 2.4.4 逆转录反应步骤 | 第46-47页 |
| 2.4.5 Real-time PCR | 第47页 |
| 2.4.6 qRT-PCR实验结果分析 | 第47-48页 |
| 2.5 TPC-1 甲状腺癌细胞活性以及克隆能力的测定 | 第48-49页 |
| 2.5.1 MTT法检测细胞活性 | 第48页 |
| 2.5.2 TPC-1 甲状腺癌细胞克隆能力检测 | 第48-49页 |
| 2.6 细胞迁移实验/划伤模型 | 第49-50页 |
| 2.7 细胞侵袭实验 | 第50页 |
| 2.8 荧光报告质粒构建 | 第50-55页 |
| 2.8.1 质粒构建 | 第50-51页 |
| 2.8.2 所需溶液和试剂的配置 | 第51页 |
| 2.8.3 目的片段PCR扩增 | 第51-52页 |
| 2.8.4 质粒载体以及PCR产物的双酶切鉴定及凝胶回收 | 第52-53页 |
| 2.8.5 粘性末端的连接 | 第53页 |
| 2.8.6 质粒DNA的转化 | 第53页 |
| 2.8.7 质粒DNA的小量提取 | 第53-54页 |
| 2.8.8 酶切鉴定 | 第54页 |
| 2.8.9 质粒大量提取 | 第54页 |
| 2.8.10 紫外分光光度计定量 | 第54页 |
| 2.8.11 点突变质粒载体的构建 | 第54-55页 |
| 2.9 荧光报告系统检测 | 第55-56页 |
| 2.10 Western blot实验步骤 | 第56-60页 |
| 2.10.1 主要试剂和溶液的配置 | 第56-58页 |
| 2.10.2 细胞总蛋白的提取 | 第58页 |
| 2.10.3 组织总蛋白提取 | 第58页 |
| 2.10.4 实验步骤 | 第58-60页 |
| 2.11 小鼠移植瘤模型构建 | 第60页 |
| 2.11.1 实验动物购置 | 第60页 |
| 2.11.2 小鼠移植瘤模型构建步骤 | 第60页 |
| 2.12 材料和仪器 | 第60-61页 |
| 2.12.1 主要实验试剂 | 第60-61页 |
| 2.12.2 主要仪器和材料 | 第61页 |
| 2.13 数据处理和统计学检验 | 第61-62页 |
| 第3章 结果 | 第62-74页 |
| 3.1 在甲状腺乳头状癌组织和甲状腺肿瘤细胞系中miR3383p的表达显著下调 | 第62-64页 |
| 3.2 体内和体外实验证实miR3383p可以抑制甲状腺乳头状癌的生长 | 第64-67页 |
| 3.3 miR3383P可以抑制甲状腺乳头状癌的侵袭和转移 | 第67-68页 |
| 3.4 AKT3是miR3383p的调控靶点 | 第68-70页 |
| 3.5 AKT3可以促进甲状腺乳头状癌的发生发展 | 第70-72页 |
| 3.6 AKT3可以部分逆转miR3383p对甲状腺乳头状癌的抑制作用 | 第72-74页 |
| 第4章 讨论 | 第74-76页 |
| 第5章 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-97页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98页 |
