摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第17-31页 |
1.1 植物小G蛋白Rop家族 | 第18-19页 |
1.2 Rop家族的调节因子 | 第19-20页 |
1.3 Rop家族在PTⅠ建立过程中的调控作用 | 第20-23页 |
1.3.1 Rop家族介入寄主PRRs受体参与的PTⅠ抗性的建立 | 第20-21页 |
1.3.2 Rop家族对ROS信号路径的调控 | 第21页 |
1.3.3 Rop家族对MAPK信号通路的调控 | 第21-22页 |
1.3.4 Rop家族调控寄主PTⅠ抗性建立的机制 | 第22-23页 |
1.4 Rop家族在ETⅠ建立过程中的调控作用 | 第23-24页 |
1.5 疫霉属病原菌 | 第24-27页 |
1.6 寄主的免疫蛋白在抗疫霉菌侵染过程中的功能 | 第27-28页 |
1.7 小G蛋白Rop家族在植物抗疫霉菌过程中的功能 | 第28-29页 |
1.8 水杨酸在植物防卫反应建立过程中的调控作用 | 第29-30页 |
1.9 研究目的和意义 | 第30-31页 |
2 不同地区辣椒疫霉菌生理小种的鉴定和生物学特性的研究 | 第31-39页 |
2.1 材料 | 第31-32页 |
2.1.1 菌株和植物材料 | 第31-32页 |
2.1.2 培养基 | 第32页 |
2.2 方法 | 第32-34页 |
2.2.1 辣椒疫霉菌的分离和纯化 | 第32页 |
2.2.2 辣椒疫霉菌的形态学和分子生物学鉴定 | 第32-33页 |
2.2.3 辣椒疫霉菌生长速度的测定 | 第33页 |
2.2.4 辣椒疫霉菌孢子囊产量的测定 | 第33页 |
2.2.5 辣椒疫霉菌生理小种的鉴定 | 第33-34页 |
2.3 数据分析 | 第34页 |
2.4 结果与分析 | 第34-38页 |
2.4.1 辣椒疫霉菌的分离与鉴定 | 第34-35页 |
2.4.2 不同地区的辣椒疫霉菌菌落和孢子囊形态的比较 | 第35页 |
2.4.3 不同地区的辣椒疫霉菌菌落生长速度的比较 | 第35-36页 |
2.4.4 不同地区的辣椒疫霉菌产孢能力的比较 | 第36-37页 |
2.4.5 不同地区的辣椒疫霉菌菌株生理小种的鉴定 | 第37-38页 |
2.5 讨论 | 第38-39页 |
3 辣椒种质资源材料对疫霉菌的抗性鉴定及疫霉菌的抗药性风险评估 | 第39-45页 |
3.1 材料 | 第39-40页 |
3.1.1 植物材料、菌株及化学药剂 | 第39-40页 |
3.1.2 培养基 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-41页 |
3.2.1 游动孢子囊的产生和游动孢子的释放 | 第40页 |
3.2.2 人工接种 | 第40-41页 |
3.2.3 氟啶胺和氰霜唑抑菌效果的测定 | 第41页 |
3.3 数据分析 | 第41页 |
3.4 结果与分析 | 第41-43页 |
3.4.1 辣椒种质资源材料的抗病性鉴定 | 第41-42页 |
3.4.2 氟啶胺和氰霜唑对疫霉菌抑菌效果的测定 | 第42-43页 |
3.5 讨论 | 第43-45页 |
4 小G蛋白在茄科植物中的全基因组筛查、蛋白功能域分析鉴定和系统进化树的聚类分析 | 第45-58页 |
4.1 材料 | 第46-47页 |
4.1.1 植物种类 | 第46页 |
4.1.2 植物基因组数据库 | 第46-47页 |
4.2 方法 | 第47-48页 |
4.2.1 ROPs蛋白的全基因组筛查 | 第47页 |
4.2.2 ROPs蛋白的功能域分析与鉴定 | 第47-48页 |
4.2.3 茄科植物ROPs的系统进化关系分析 | 第48页 |
4.3 结果与分析 | 第48-57页 |
4.3.1 ROPs在茄科植物中的全基因组筛查 | 第48页 |
4.3.2 茄科ROPs的功能域分析与鉴定 | 第48-54页 |
4.3.3 茄科植物中ROPs的系统进化树聚类分析 | 第54-56页 |
4.3.4 SlROPs在番茄不同组织中的本底表达水平的比较分析 | 第56-57页 |
4.4 讨论 | 第57-58页 |
5 茄科小G蛋白Rop-Ⅱ在植物发育与抗辣椒疫霉菌过程中的功能解析 | 第58-74页 |
5.1 材料 | 第58-60页 |
5.1.1 质粒、菌株及植物材料 | 第58-59页 |
5.1.2 试剂 | 第59页 |
5.1.3 培养基 | 第59-60页 |
5.1.3.1 常用培养基 | 第59-60页 |
5.1.3.2 大肠杆菌和农杆菌感受态细胞制备和转化所需培养基 | 第60页 |
5.1.3.3 病毒介导的基因沉默所需培养基 | 第60页 |
5.1.3.4 辣椒疫霉菌培养所需培养基 | 第60页 |
5.2 方法 | 第60-68页 |
5.2.1 植物DNA和RNA的提取 | 第60-61页 |
5.2.2 Q-PCR(quantitative real-timePCR)体系和程序 | 第61-62页 |
5.2.3 茄科植物通用沉默载体的构建 | 第62-64页 |
5.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第64-65页 |
5.2.5 质粒DNA提取 | 第65页 |
5.2.6 质粒DNA酶切验证 | 第65页 |
5.2.7 农杆菌感受态细胞的制备及农杆菌转化 | 第65-66页 |
5.2.8 农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第66页 |
5.2.9 病毒介导的基因沉默步骤 | 第66-67页 |
5.2.10 辣椒疫霉菌的人工接菌和病斑的测量 | 第67-68页 |
5.3 结果与分析 | 第68-73页 |
5.3.1 番茄接种P.capsici后SlROP-Ⅱ.1基因的表达谱分析 | 第68-70页 |
5.3.2 TRⅤ:PDS在本氏烟、番茄和辣椒中的沉默效率 | 第70页 |
5.3.3 TRⅤ:ROP-Ⅱ.1在本氏烟、番茄和辣椒中的沉默效率. | 第70-71页 |
5.3.4 茄科植物本氏烟、番茄和辣椒中ROP-Ⅱ基因在植物发育过程中的功能研究 | 第71-72页 |
5.3.5 Nb/Sl/CaROP-Ⅱ.1基因在抗辣椒疫霉菌过程中功能的初步研究 | 第72-73页 |
5.4 讨论 | 第73-74页 |
6 水杨酸(SA)在马铃薯小G蛋白StROP-Ⅱ.2介导的防卫反应体系建立过程中的功能初探 | 第74-89页 |
6.1 材料 | 第75-77页 |
6.1.1 质粒,菌株及植物材料 | 第75页 |
6.1.2 试剂 | 第75-76页 |
6.1.3 培养基 | 第76-77页 |
6.1.3.1 常用培养基 | 第76页 |
6.1.3.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化所需培养基 | 第76-77页 |
6.1.3.3 农杆菌介导的瞬时表达所需培养基 | 第77页 |
6.1.3.4 疫霉菌培养所需的培养基 | 第77页 |
6.2 方法 | 第77-82页 |
6.2.1 植物RNA的提取和cDNA的合成 | 第77页 |
6.2.2 Q-PCR(quantitative real-timePCR)体系和程序 | 第77-78页 |
6.2.3 农杆菌感受态细胞的制备及农杆菌转化 | 第78-79页 |
6.2.4 农杆菌阳性克隆的鉴定 | 第79页 |
6.2.5 农杆菌介导的瞬时表达 | 第79-80页 |
6.2.6 辣椒疫霉菌的人工接菌及植物病斑面积的测量 | 第80-81页 |
6.2.7 SA含量的测定及相应组织中基因表达量的测定 | 第81-82页 |
6.2.8 不同时间点StROP-Ⅱ.2基因表达谱的分析 | 第82页 |
6.3 结果与分析 | 第82-88页 |
6.3.1 马铃薯接种P.infestans后StROP-Ⅱ.2基因的表达谱分析 | 第82-83页 |
6.3.2 过量表达StROP-Ⅱ.2能够增强马铃薯对晚疫病菌的抗性水平 | 第83页 |
6.3.3 SA参与StROP-Ⅱ.2介导的马铃薯抗性建立过程 | 第83-86页 |
6.3.3.1 内源StROP-Ⅱ.2基因转录水平和SA积累水平的相关性 | 第83-85页 |
6.3.3.2 StROP-Ⅱ.2通过调控SA的积累进而调控马铃薯对晚疫病菌的抗性 | 第85-86页 |
6.3.4 异源表达StROP-Ⅱ.2能够提高烟草对P.capsici的抗性水平 | 第86-87页 |
6.3.5 SA参与调控NbROP-Ⅱ.1所介导的本氏烟抵抗P.capsici的抗病过程 | 第87-88页 |
6.4 讨论 | 第88-89页 |
7 全文结论 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-93页 |
参考文献 | 第93-106页 |
附录 | 第106-115页 |
作者简介 | 第115-116页 |