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茄科植物小G蛋白ROPs在抗疫霉菌过程中的功能研究

摘要第3-5页
abstract第5-6页
1 引言第17-31页
    1.1 植物小G蛋白Rop家族第18-19页
    1.2 Rop家族的调节因子第19-20页
    1.3 Rop家族在PTⅠ建立过程中的调控作用第20-23页
        1.3.1 Rop家族介入寄主PRRs受体参与的PTⅠ抗性的建立第20-21页
        1.3.2 Rop家族对ROS信号路径的调控第21页
        1.3.3 Rop家族对MAPK信号通路的调控第21-22页
        1.3.4 Rop家族调控寄主PTⅠ抗性建立的机制第22-23页
    1.4 Rop家族在ETⅠ建立过程中的调控作用第23-24页
    1.5 疫霉属病原菌第24-27页
    1.6 寄主的免疫蛋白在抗疫霉菌侵染过程中的功能第27-28页
    1.7 小G蛋白Rop家族在植物抗疫霉菌过程中的功能第28-29页
    1.8 水杨酸在植物防卫反应建立过程中的调控作用第29-30页
    1.9 研究目的和意义第30-31页
2 不同地区辣椒疫霉菌生理小种的鉴定和生物学特性的研究第31-39页
    2.1 材料第31-32页
        2.1.1 菌株和植物材料第31-32页
        2.1.2 培养基第32页
    2.2 方法第32-34页
        2.2.1 辣椒疫霉菌的分离和纯化第32页
        2.2.2 辣椒疫霉菌的形态学和分子生物学鉴定第32-33页
        2.2.3 辣椒疫霉菌生长速度的测定第33页
        2.2.4 辣椒疫霉菌孢子囊产量的测定第33页
        2.2.5 辣椒疫霉菌生理小种的鉴定第33-34页
    2.3 数据分析第34页
    2.4 结果与分析第34-38页
        2.4.1 辣椒疫霉菌的分离与鉴定第34-35页
        2.4.2 不同地区的辣椒疫霉菌菌落和孢子囊形态的比较第35页
        2.4.3 不同地区的辣椒疫霉菌菌落生长速度的比较第35-36页
        2.4.4 不同地区的辣椒疫霉菌产孢能力的比较第36-37页
        2.4.5 不同地区的辣椒疫霉菌菌株生理小种的鉴定第37-38页
    2.5 讨论第38-39页
3 辣椒种质资源材料对疫霉菌的抗性鉴定及疫霉菌的抗药性风险评估第39-45页
    3.1 材料第39-40页
        3.1.1 植物材料、菌株及化学药剂第39-40页
        3.1.2 培养基第40页
    3.2 方法第40-41页
        3.2.1 游动孢子囊的产生和游动孢子的释放第40页
        3.2.2 人工接种第40-41页
        3.2.3 氟啶胺和氰霜唑抑菌效果的测定第41页
    3.3 数据分析第41页
    3.4 结果与分析第41-43页
        3.4.1 辣椒种质资源材料的抗病性鉴定第41-42页
        3.4.2 氟啶胺和氰霜唑对疫霉菌抑菌效果的测定第42-43页
    3.5 讨论第43-45页
4 小G蛋白在茄科植物中的全基因组筛查、蛋白功能域分析鉴定和系统进化树的聚类分析第45-58页
    4.1 材料第46-47页
        4.1.1 植物种类第46页
        4.1.2 植物基因组数据库第46-47页
    4.2 方法第47-48页
        4.2.1 ROPs蛋白的全基因组筛查第47页
        4.2.2 ROPs蛋白的功能域分析与鉴定第47-48页
        4.2.3 茄科植物ROPs的系统进化关系分析第48页
    4.3 结果与分析第48-57页
        4.3.1 ROPs在茄科植物中的全基因组筛查第48页
        4.3.2 茄科ROPs的功能域分析与鉴定第48-54页
        4.3.3 茄科植物中ROPs的系统进化树聚类分析第54-56页
        4.3.4 SlROPs在番茄不同组织中的本底表达水平的比较分析第56-57页
    4.4 讨论第57-58页
5 茄科小G蛋白Rop-Ⅱ在植物发育与抗辣椒疫霉菌过程中的功能解析第58-74页
    5.1 材料第58-60页
        5.1.1 质粒、菌株及植物材料第58-59页
        5.1.2 试剂第59页
        5.1.3 培养基第59-60页
            5.1.3.1 常用培养基第59-60页
            5.1.3.2 大肠杆菌和农杆菌感受态细胞制备和转化所需培养基第60页
            5.1.3.3 病毒介导的基因沉默所需培养基第60页
            5.1.3.4 辣椒疫霉菌培养所需培养基第60页
    5.2 方法第60-68页
        5.2.1 植物DNA和RNA的提取第60-61页
        5.2.2 Q-PCR(quantitative real-timePCR)体系和程序第61-62页
        5.2.3 茄科植物通用沉默载体的构建第62-64页
        5.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第64-65页
        5.2.5 质粒DNA提取第65页
        5.2.6 质粒DNA酶切验证第65页
        5.2.7 农杆菌感受态细胞的制备及农杆菌转化第65-66页
        5.2.8 农杆菌阳性克隆的鉴定第66页
        5.2.9 病毒介导的基因沉默步骤第66-67页
        5.2.10 辣椒疫霉菌的人工接菌和病斑的测量第67-68页
    5.3 结果与分析第68-73页
        5.3.1 番茄接种P.capsici后SlROP-Ⅱ.1基因的表达谱分析第68-70页
        5.3.2 TRⅤ:PDS在本氏烟、番茄和辣椒中的沉默效率第70页
        5.3.3 TRⅤ:ROP-Ⅱ.1在本氏烟、番茄和辣椒中的沉默效率.第70-71页
        5.3.4 茄科植物本氏烟、番茄和辣椒中ROP-Ⅱ基因在植物发育过程中的功能研究第71-72页
        5.3.5 Nb/Sl/CaROP-Ⅱ.1基因在抗辣椒疫霉菌过程中功能的初步研究第72-73页
    5.4 讨论第73-74页
6 水杨酸(SA)在马铃薯小G蛋白StROP-Ⅱ.2介导的防卫反应体系建立过程中的功能初探第74-89页
    6.1 材料第75-77页
        6.1.1 质粒,菌株及植物材料第75页
        6.1.2 试剂第75-76页
        6.1.3 培养基第76-77页
            6.1.3.1 常用培养基第76页
            6.1.3.2 农杆菌感受态细胞的制备和转化所需培养基第76-77页
            6.1.3.3 农杆菌介导的瞬时表达所需培养基第77页
            6.1.3.4 疫霉菌培养所需的培养基第77页
    6.2 方法第77-82页
        6.2.1 植物RNA的提取和cDNA的合成第77页
        6.2.2 Q-PCR(quantitative real-timePCR)体系和程序第77-78页
        6.2.3 农杆菌感受态细胞的制备及农杆菌转化第78-79页
        6.2.4 农杆菌阳性克隆的鉴定第79页
        6.2.5 农杆菌介导的瞬时表达第79-80页
        6.2.6 辣椒疫霉菌的人工接菌及植物病斑面积的测量第80-81页
        6.2.7 SA含量的测定及相应组织中基因表达量的测定第81-82页
        6.2.8 不同时间点StROP-Ⅱ.2基因表达谱的分析第82页
    6.3 结果与分析第82-88页
        6.3.1 马铃薯接种P.infestans后StROP-Ⅱ.2基因的表达谱分析第82-83页
        6.3.2 过量表达StROP-Ⅱ.2能够增强马铃薯对晚疫病菌的抗性水平第83页
        6.3.3 SA参与StROP-Ⅱ.2介导的马铃薯抗性建立过程第83-86页
            6.3.3.1 内源StROP-Ⅱ.2基因转录水平和SA积累水平的相关性第83-85页
            6.3.3.2 StROP-Ⅱ.2通过调控SA的积累进而调控马铃薯对晚疫病菌的抗性第85-86页
        6.3.4 异源表达StROP-Ⅱ.2能够提高烟草对P.capsici的抗性水平第86-87页
        6.3.5 SA参与调控NbROP-Ⅱ.1所介导的本氏烟抵抗P.capsici的抗病过程第87-88页
    6.4 讨论第88-89页
7 全文结论第89-90页
致谢第90-93页
参考文献第93-106页
附录第106-115页
作者简介第115-116页

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