| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 香蒲富集重金属的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 香蒲简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 香蒲对重金属的富集特性 | 第11-12页 |
| 1.2 植物体内Pb~(2+)耐性基因的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 Pb~(2+)对植物的危害 | 第12-13页 |
| 1.2.2 与Pb~(2+)耐性相关的基因 | 第13-14页 |
| 1.3 RACE技术在全长cDNA克隆中的应用 | 第14-18页 |
| 1.3.1 RACE技术 | 第14-16页 |
| 1.3.2 RACE技术的特点 | 第16-17页 |
| 1.3.3 RACE技术的应用及其前景 | 第17-18页 |
| 1.4 谷胱甘肽S转移酶的作用 | 第18-20页 |
| 1.4.1 谷胱甘肽S转移酶在植物抵抗盐胁迫中的作用 | 第19页 |
| 1.4.2 谷胱甘肽S转移酶在植物抵抗低温胁迫中的作用 | 第19-20页 |
| 1.4.3 谷胱甘肽S转移酶在植物抵抗重金属胁迫中的作用 | 第20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 Pb~(2+)胁迫下香蒲的转录组测序分析 | 第21-47页 |
| 前言 | 第21页 |
| 2.1 实验材料与处理 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 RNA提取与纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.2 测序文库构建和转录组测序 | 第22-24页 |
| 2.2.3 基因功能注释 | 第24-25页 |
| 2.2.4 基因表达量分析 | 第25页 |
| 2.2.5 差异表达基因筛选 | 第25-26页 |
| 2.3 结果 | 第26-46页 |
| 2.3.1 RNA质检信息 | 第26页 |
| 2.3.2 转录组序列组装结果 | 第26-29页 |
| 2.3.3 功能注释 | 第29页 |
| 2.3.4 基因表达分析 | 第29-31页 |
| 2.3.5 差异基因表达水平聚类分析 | 第31-32页 |
| 2.3.6 差异表达基因的功能注释和富集分析 | 第32-44页 |
| 2.3.7 Pb~(2+)胁迫下差异表达基因分析 | 第44-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第三章 Pb~(2+)胁迫下香蒲差异表达基因的表达量验证 | 第47-59页 |
| 前言 | 第47页 |
| 3.1 实验材料与处理 | 第47页 |
| 3.2 实验试剂与仪器 | 第47-48页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第47页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-53页 |
| 3.3.1 TRIzol法提取RNA | 第48页 |
| 3.3.2 反转录 | 第48-49页 |
| 3.3.3 持家基因的筛选及引物设计 | 第49-50页 |
| 3.3.4 半定量分析持家基因表达谱 | 第50-51页 |
| 3.3.5 半定量PCR检测 | 第51页 |
| 3.3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测 | 第51-53页 |
| 3.4 结果 | 第53-57页 |
| 3.4.1 总RNA的提取 | 第53-54页 |
| 3.4.2 内参基因及其反应平台期的确定 | 第54-56页 |
| 3.4.3 半定量PCR检测 | 第56页 |
| 3.4.4 荧光定量PCR验证 | 第56-57页 |
| 3.5 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 香蒲谷胱甘肽S转移酶基因的克隆及分析 | 第59-89页 |
| 前言 | 第59页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 4.1.2 菌株 | 第59页 |
| 4.1.3 载体 | 第59页 |
| 4.1.4 试剂与试剂盒 | 第59-60页 |
| 4.1.5 培养基 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-72页 |
| 4.2.1 香蒲根RNA的提取 | 第60页 |
| 4.2.2 香蒲GST基因的克隆策略 | 第60-61页 |
| 4.2.3 引物的设计与合成 | 第61页 |
| 4.2.4 电泳技术 | 第61-62页 |
| 4.2.5 DNA/RNA OD值的测定 | 第62页 |
| 4.2.6 反转录 | 第62-65页 |
| 4.2.7 PCR扩增 | 第65-68页 |
| 4.2.8 PCR产物的胶回收 | 第68-70页 |
| 4.2.9 DNA片段和载体DNA的连接 | 第70页 |
| 4.2.10 大肠杆菌的转化 | 第70-71页 |
| 4.2.11 阳性克隆的筛选和鉴定 | 第71-72页 |
| 4.3 ToGST所编码蛋白的生物信息学分析 | 第72-73页 |
| 4.3.1 生物信息学软件 | 第72页 |
| 4.3.2 主要数据库及用途 | 第72-73页 |
| 4.4 结果 | 第73-87页 |
| 4.4.1 ToGST中间片段的克隆 | 第73-74页 |
| 4.4.2 ToGST中间片段的序列测定与分析 | 第74-75页 |
| 4.4.3 ToGST的3'端序列和5'端序列的克隆 | 第75-76页 |
| 4.4.4 ToGST的测定与分析 | 第76-77页 |
| 4.4.5 ToGST的CDS序列分析 | 第77-79页 |
| 4.4.6 基因编码蛋白的结构分析 | 第79-82页 |
| 4.4.7 ToGST编码蛋白的功能预测 | 第82-87页 |
| 4.5 讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 干旱与盐胁迫对香蒲ToGST基因的表达及其响应 | 第89-105页 |
| 前言 | 第89页 |
| 5.1 材料与方法 | 第89-92页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第89页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第89页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第89-90页 |
| 5.1.4 实验处理 | 第90-92页 |
| 5.1.5 实验方法 | 第92页 |
| 5.2 结果 | 第92-104页 |
| 5.2.1 干旱胁迫处理结果与分析 | 第92-101页 |
| 5.2.2 盐胁迫处理结果与分析 | 第101-104页 |
| 5.3 讨论 | 第104-105页 |
| 第六章 全文结论与展望 | 第105-107页 |
| 6.1 结论 | 第105-106页 |
| 6.2 本研究的创新点 | 第106页 |
| 6.3 展望 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 攻读学位期间发表的论文及参加的学术会议 | 第116-117页 |
