摘要 | 第11-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
缩略词表 ABBREVIATION | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-42页 |
1 精子超活化调控机制研究进展 | 第18-23页 |
1.1 精子超活化的形态研究 | 第18页 |
1.2 精子超活化的生理生化研究 | 第18-21页 |
1.3 精子超活化的分子生物学研究 | 第21-23页 |
2 sAC研究进展 | 第23-24页 |
3 成熟精子基因表达与蛋白合成研究进展 | 第24-26页 |
3.1 成熟精子中的mRNA | 第24-25页 |
3.2 成熟精子中的RNAi | 第25页 |
3.3 精子中蛋白合成 | 第25-26页 |
4 RNAI在精子研究中的应用 | 第26-29页 |
4.1 RNAi的作用机制 | 第26-27页 |
4.2 RNAi技术应用于精子的研究 | 第27-28页 |
4.3 RNAi在男性避孕中的应用 | 第28-29页 |
5 本研究的目的与意义 | 第29-31页 |
参考文献 | 第31-42页 |
第二章 大鼠SAC基因的生物信息学分析 | 第42-58页 |
前言 | 第42页 |
1 材料和方法 | 第42-43页 |
1.1 大鼠sAC结构和功能分析 | 第42-43页 |
1.2 构建动物AC系统发育树 | 第43页 |
2 结果与分析 | 第43-53页 |
2.1 大鼠sAC蛋白特征分析 | 第43-44页 |
2.2 sAC蛋白质跨膜结构域分析 | 第44页 |
2.3 sAC信号肽分析 | 第44-45页 |
2.4 sAC二级结构分析 | 第45-46页 |
2.5 sAC功能结构域分析 | 第46-47页 |
2.6 sAC三级结构分析 | 第47页 |
2.7 sAC基因结构分析 | 第47-48页 |
2.8 动物AC和GC系统发育树分析 | 第48-52页 |
2.9 动物sAC系统发育分析 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
第三章 SIRNA干扰大鼠SAC对体外精子超活化的影响 | 第58-80页 |
前言 | 第58-59页 |
1 材料 | 第59-61页 |
1.1 实验动物 | 第59页 |
1.2 siRNA序列的设计与合成 | 第59-60页 |
1.3 实验引物与试剂 | 第60-61页 |
2 方法 | 第61-66页 |
2.1 大鼠精子的获得与培养 | 第61页 |
2.2 最佳电转化体系的建立 | 第61页 |
2.3 siRNA干涉序列筛选和基因表达分析 | 第61-65页 |
2.4 大鼠精子超活化相关基因表达分析 | 第65页 |
2.5 数据统计分析 | 第65-66页 |
3 结果与分析 | 第66-75页 |
3.1 最佳电转化体系的建立 | 第66页 |
3.2 大鼠精子RNA的提取分析 | 第66-67页 |
3.3 siRNA干涉效率分析 | 第67-74页 |
3.4 下调sAC基因对其它精子超活化相关基因的影响 | 第74-75页 |
4 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-80页 |
第四章 SHRNA介导SAC沉默对大鼠精子超活化的影响 | 第80-100页 |
前言 | 第80-81页 |
1 实验材料 | 第81-82页 |
1.1 实验动物 | 第81页 |
1.2 shRNA序列的设计与合成 | 第81页 |
1.3 实验引物与试剂 | 第81-82页 |
2 实验方法 | 第82-84页 |
2.1 shRNA载体构建 | 第82-83页 |
2.2 睾丸网微注射shRNA质粒 | 第83-84页 |
2.3 精子分析 | 第84页 |
2.4 数据统计与分析 | 第84页 |
3 结果与分析 | 第84-92页 |
3.1 shRNA载体构建 | 第84-85页 |
3.2 睾丸网活体微注射转染干涉质粒的效率评价 | 第85-91页 |
3.3 sAC下调影响cAMP的生成和酪蛋白磷酸化 | 第91-92页 |
3.4 sAC下调影响精子超活化水平 | 第92页 |
4 讨论 | 第92-96页 |
参考文献 | 第96-100页 |
附录 | 第100-106页 |
致谢 | 第106-108页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第108页 |