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RNA干扰沉默sAC基因对大鼠精子超活化的影响

摘要第11-14页
ABSTRACT第14-16页
缩略词表 ABBREVIATION第17-18页
第一章 文献综述第18-42页
    1 精子超活化调控机制研究进展第18-23页
        1.1 精子超活化的形态研究第18页
        1.2 精子超活化的生理生化研究第18-21页
        1.3 精子超活化的分子生物学研究第21-23页
    2 sAC研究进展第23-24页
    3 成熟精子基因表达与蛋白合成研究进展第24-26页
        3.1 成熟精子中的mRNA第24-25页
        3.2 成熟精子中的RNAi第25页
        3.3 精子中蛋白合成第25-26页
    4 RNAI在精子研究中的应用第26-29页
        4.1 RNAi的作用机制第26-27页
        4.2 RNAi技术应用于精子的研究第27-28页
        4.3 RNAi在男性避孕中的应用第28-29页
    5 本研究的目的与意义第29-31页
    参考文献第31-42页
第二章 大鼠SAC基因的生物信息学分析第42-58页
    前言第42页
    1 材料和方法第42-43页
        1.1 大鼠sAC结构和功能分析第42-43页
        1.2 构建动物AC系统发育树第43页
    2 结果与分析第43-53页
        2.1 大鼠sAC蛋白特征分析第43-44页
        2.2 sAC蛋白质跨膜结构域分析第44页
        2.3 sAC信号肽分析第44-45页
        2.4 sAC二级结构分析第45-46页
        2.5 sAC功能结构域分析第46-47页
        2.6 sAC三级结构分析第47页
        2.7 sAC基因结构分析第47-48页
        2.8 动物AC和GC系统发育树分析第48-52页
        2.9 动物sAC系统发育分析第52-53页
    3 讨论第53-55页
    参考文献第55-58页
第三章 SIRNA干扰大鼠SAC对体外精子超活化的影响第58-80页
    前言第58-59页
    1 材料第59-61页
        1.1 实验动物第59页
        1.2 siRNA序列的设计与合成第59-60页
        1.3 实验引物与试剂第60-61页
    2 方法第61-66页
        2.1 大鼠精子的获得与培养第61页
        2.2 最佳电转化体系的建立第61页
        2.3 siRNA干涉序列筛选和基因表达分析第61-65页
        2.4 大鼠精子超活化相关基因表达分析第65页
        2.5 数据统计分析第65-66页
    3 结果与分析第66-75页
        3.1 最佳电转化体系的建立第66页
        3.2 大鼠精子RNA的提取分析第66-67页
        3.3 siRNA干涉效率分析第67-74页
        3.4 下调sAC基因对其它精子超活化相关基因的影响第74-75页
    4 讨论第75-77页
    参考文献第77-80页
第四章 SHRNA介导SAC沉默对大鼠精子超活化的影响第80-100页
    前言第80-81页
    1 实验材料第81-82页
        1.1 实验动物第81页
        1.2 shRNA序列的设计与合成第81页
        1.3 实验引物与试剂第81-82页
    2 实验方法第82-84页
        2.1 shRNA载体构建第82-83页
        2.2 睾丸网微注射shRNA质粒第83-84页
        2.3 精子分析第84页
        2.4 数据统计与分析第84页
    3 结果与分析第84-92页
        3.1 shRNA载体构建第84-85页
        3.2 睾丸网活体微注射转染干涉质粒的效率评价第85-91页
        3.3 sAC下调影响cAMP的生成和酪蛋白磷酸化第91-92页
        3.4 sAC下调影响精子超活化水平第92页
    4 讨论第92-96页
    参考文献第96-100页
附录第100-106页
致谢第106-108页
攻读博士学位期间发表的学术论文第108页

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