中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略词与中英文对照表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 猕猴桃溃疡病及其病原菌 | 第13-15页 |
1.2.1 猕猴桃溃疡病及其主要危害 | 第13-14页 |
1.2.2 猕猴桃溃疡病病原菌的分类 | 第14页 |
1.2.3 猕猴桃溃疡病病原菌的主要生物学特性 | 第14-15页 |
1.3 猕猴桃溃疡病病原菌检测方法的研究现状 | 第15-16页 |
1.3.1 病原菌的常规鉴定 | 第15页 |
1.3.2 病原菌的分子鉴定 | 第15-16页 |
1.4 LAMP技术原理及应用 | 第16-21页 |
1.4.1 LAMP技术原理 | 第16-19页 |
1.4.2 LAMP技术的优缺点 | 第19-20页 |
1.4.3 LAMP技术在植物病害检疫中的应用 | 第20-21页 |
1.5 研究目的、研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
1.5.1 研究目的 | 第21页 |
1.5.2 研究内容 | 第21页 |
1.5.3 技术路线 | 第21-23页 |
1.6 本研究的创新点 | 第23-24页 |
2 重庆猕猴桃溃疡病病原菌的分离与鉴定 | 第24-40页 |
2.1 材料与仪器 | 第24-26页 |
2.1.1 猕猴桃溃疡病病原菌分离材料 | 第24页 |
2.1.2 供试菌株 | 第24页 |
2.1.3 培养基 | 第24-25页 |
2.1.4 主要试剂 | 第25页 |
2.1.5 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-33页 |
2.2.1 猕猴桃溃疡病病原菌的分离 | 第26页 |
2.2.2 猕猴桃溃疡病病原菌的形态学及生理生化特性分析 | 第26-27页 |
2.2.3 病原菌的致病性测定 | 第27-28页 |
2.2.4 细菌基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.5 病原菌 16S rDNA片段扩增 | 第29页 |
2.2.6 PCR产物纯化、克隆与测序 | 第29-31页 |
2.2.7 序列分析与系统发育树的构建 | 第31页 |
2.2.8 不同引物对病原菌的扩增 | 第31-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-38页 |
2.3.1 猕猴桃溃疡病病原菌分离结果 | 第33-34页 |
2.3.2 病原菌的形态学及生理生化特性分析 | 第34-35页 |
2.3.3 病原菌的致病性测定 | 第35页 |
2.3.4 病原菌 16S rDNA的扩增 | 第35-36页 |
2.3.5 对系统发育树的分析 | 第36-37页 |
2.3.6 不同引物对病原菌的扩增 | 第37-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
3 猕猴桃溃疡病LAMP快速检测方法的建立 | 第40-53页 |
3.1 材料与仪器 | 第40页 |
3.1.1 供试材料 | 第40页 |
3.1.2 供试菌株 | 第40页 |
3.1.3 培养基 | 第40页 |
3.1.4 主要试剂 | 第40页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第40页 |
3.2 方法 | 第40-43页 |
3.2.1 猕猴桃内生细菌的分离与鉴定 | 第40-41页 |
3.2.2 细菌基因组DNA的提取 | 第41页 |
3.2.3 LAMP靶序列的选取与引物设计 | 第41-42页 |
3.2.4 LAMP检测体系的建立及优化 | 第42页 |
3.2.5 LAMP外引物反应产物的分析 | 第42页 |
3.2.6 LAMP扩增产物的分析 | 第42-43页 |
3.2.7 LAMP特异性检测 | 第43页 |
3.2.8 LAMP与定量PCR和双重PCR灵敏度的比较 | 第43页 |
3.2.9 实际样品的应用检测 | 第43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-51页 |
3.3.1 猕猴桃内生细菌的分离与鉴定 | 第43-44页 |
3.3.2 LAMP靶序列与引物 | 第44页 |
3.3.3 LAMP检测体系的优化 | 第44-48页 |
3.3.4 LAMP外引物反应产物的分析 | 第48页 |
3.3.5 LAMP扩增产物的分析 | 第48-49页 |
3.3.6 LAMP检测方法的特异性 | 第49页 |
3.3.7 LAMP与定量PCR和双重PCR灵敏度的比较 | 第49-50页 |
3.3.8 实际样品的应用检测 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
4 主要研究结论与展望 | 第53-54页 |
4.1 主要研究结论 | 第53页 |
4.2 后续工作展望 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
附录 | 第62页 |
A. 作者在攻读学位期间发表的论文 | 第62页 |
B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第62页 |