| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩略词简表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-19页 |
| 参考文献 | 第17-19页 |
| 第一部分 血浆MIRNAS预测结肠癌远处转移和化疗耐药性研究 | 第19-42页 |
| 引言 | 第19-20页 |
| 材料与方法 | 第20-29页 |
| 1.1 实验试剂和材料 | 第20-24页 |
| 1.1.1 实验试剂 | 第20-21页 |
| 1.1.2 实验器材 | 第21-22页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第22-24页 |
| 1.2 患者 | 第24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 1.3.1 术后化疗 | 第24页 |
| 1.3.2 转移性和复发性肿瘤的化疗 | 第24页 |
| 1.3.3 随访 | 第24-25页 |
| 1.3.4 血清采集 | 第25页 |
| 1.3.5 RNA分离和实时PCR | 第25-28页 |
| 1.4 统计分析 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-36页 |
| 1.5.1 基本临床特点 | 第29-30页 |
| 1.5.2 结肠癌患者结肠癌相关性肿瘤组织中血清miR-155、miR-200c和miR-210的表达明显增高 | 第30-32页 |
| 1.5.3 血清miRNA水平对复发、转移、化疗敏感和预后的预测作用 | 第32-36页 |
| 讨论 | 第36-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 第二部分 MIR-200C在结肠癌中的作用及相关机制研究 | 第42-66页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| 材料与方法 | 第43-51页 |
| 2.1 主要试剂与材料 | 第43-44页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第43-44页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第44页 |
| 2.1.3 研究对象 | 第44页 |
| 2.1.4 细胞 | 第44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-51页 |
| 2.2.1 细胞培养用品的准备 | 第44-45页 |
| 2.2.2 HT-29和HCT116细胞培养 | 第45页 |
| 2.2.3 HCT-116细胞和HT-29细胞的复苏 | 第45页 |
| 2.2.4 HCT-116细胞的传代方法 | 第45-46页 |
| 2.2.5 HCT-116细胞的冻存 | 第46-47页 |
| 2.2.6 实时定量PCR | 第47页 |
| 2.2.7 miR-200c表达的沉默 | 第47页 |
| 2.2.8 Hoechst染色观察细胞凋亡 | 第47页 |
| 2.2.9 克隆形成实验 | 第47页 |
| 2.2.10 细胞迁移实验 | 第47页 |
| 2.2.11 基质胶侵袭实验 | 第47-48页 |
| 2.2.12 miR-200c对肿瘤生长的作用 | 第48-49页 |
| 2.2.13 免疫印迹HT-29和HCT116细胞 | 第49-50页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第50-51页 |
| 结果 | 第51-59页 |
| 2.3.1 miR-200c表达与临床特征的相关性 | 第51页 |
| 2.3.2 miR-200c表达沉默 | 第51-52页 |
| 2.3.3 miR-200c的沉默诱导细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的存活,和致敏Ara-C的作用效果 | 第52-54页 |
| 2.3.4 miR-200c的沉默抑制肿瘤细胞迁移和侵袭 | 第54-56页 |
| 2.3.5 miR-200c沉默在异种移植动物模型中抑制肿瘤生长 | 第56-58页 |
| 2.3.6 信号转导检测 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 第三部分 全文结论 | 第66-67页 |
| 综述 | 第67-98页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
