摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-27页 |
·iPSCS 的发现及其研究进展 | 第9-10页 |
·iPSCS 的重编程因子及其功能 | 第10-15页 |
·重编程因子 | 第10-14页 |
·重编程因子的相互作用 | 第14-15页 |
·iPSCS 的表观遗传修饰 | 第15-18页 |
·DNA 甲基化 | 第16-17页 |
·组蛋白修饰 | 第17-18页 |
·iPSCS 的诱导方法 | 第18-23页 |
·基于基因组整合的诱导方法 | 第18-19页 |
·基于非基因组整合的诱导方法 | 第19-21页 |
·基于蛋白质的诱导方法 | 第21页 |
·其他的诱导方法 | 第21-23页 |
·iPSCS 的应用前景与展望 | 第23-25页 |
·本研究的目标及意义 | 第25-27页 |
2 材料和方法 | 第27-43页 |
·实验材料 | 第27-30页 |
·实验动物、细胞及质粒 | 第27页 |
·主要试剂与溶液的配置 | 第27-30页 |
·实验室仪器设备 | 第30页 |
·主要耗材 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-43页 |
·鼠尾胶原蛋白的制备 | 第30-31页 |
·大鼠原代肝细胞的分离及培养 | 第31-32页 |
·饲养层细胞的制备 | 第32-33页 |
·HEK293T 细胞的复苏及培养 | 第33-34页 |
·慢病毒载体的病毒包装与检测 | 第34-36页 |
·大鼠肝细胞的诱导及诱导多能干细胞的培养 | 第36-37页 |
·诱导的多能干细胞的检测 | 第37-43页 |
3 结果和讨论 | 第43-59页 |
·鼠尾胶原的制备结果 | 第43页 |
·原代大鼠肝细胞分离鉴定与培养结果 | 第43-44页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养结果 | 第44-45页 |
·四种重组慢病毒的制备结果 | 第45-46页 |
·四种重组慢病毒侵染性能的检测结果与分析 | 第46-48页 |
·大鼠肝细胞的 iPSCS 诱导结果及分析 | 第48-49页 |
·诱导克隆的碱性磷酸酶 (AP)检测结果及分析 | 第49-50页 |
·诱导克隆多能性基因表达状况的 RNA 水平检测与分析 | 第50-51页 |
·诱导克隆多能性基因表达状况的蛋白质水平检测与分析 | 第51-53页 |
·小结 | 第53页 |
·讨论 | 第53-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |