| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 前言 | 第9页 |
| 1.2 研究进展 | 第9-18页 |
| 1.2.1 活性氧的产生及相关代谢途径 | 第9-13页 |
| 1.2.2 超氧化物歧化酶 | 第13-18页 |
| 1.3 研究的意义 | 第18页 |
| 1.4 本研究主要内容及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第18-19页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 2 家蚕 BMSOD3 基因的生物信息学分析 | 第20-29页 |
| 2.1 实验方法 | 第20页 |
| 2.1.1 Bmsod3 基因的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.2 BMSOD3 基因的生物信息学分析结果 | 第20-28页 |
| 2.2.1 家蚕免疫芯片数据分析 | 第21页 |
| 2.2.2 BmSOD 蛋白序列进化分析及 Bmsod3 基因染色体定位 | 第21-28页 |
| 2.3 讨论 | 第28-29页 |
| 3 家蚕 BMSOD3 基因的克隆及表达特征分析 | 第29-39页 |
| 3.1 试验材料、所用试剂与设备 | 第29-31页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂及配方 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.2 家蚕 BMSOD3 基因的克隆 | 第31-34页 |
| 3.2.1 总 RNA 的提取及检测消化 | 第31-32页 |
| 3.2.2 cDNA 的制备和检测 | 第32页 |
| 3.2.3 Bmsod3 基因的克隆 | 第32-34页 |
| 3.3 BMSOD3 基因的表达特征分析 | 第34-35页 |
| 3.3.1 Bmsod3 基因在家蚕中的组织表达模式分析 | 第34页 |
| 3.3.2 Bmsod3 基因的 NPV 诱导表达模式分析 | 第34-35页 |
| 3.4 结果分析 | 第35-38页 |
| 3.4.1 RNA 的提取 | 第35页 |
| 3.4.2 Bmsod3 基因的克隆 | 第35-36页 |
| 3.4.3 Bmsod3 基因在家蚕中的组织表达模式分析 | 第36-37页 |
| 3.4.4 NPV 诱导下 Bmsod3 基因的表达模式分析 | 第37-38页 |
| 3.5 讨论 | 第38-39页 |
| 4 家蚕 BMSOD3 基因原核表达纯化及酶学活性分析 | 第39-59页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第39-43页 |
| 4.1.1 载体、菌株、及主要试剂 | 第39-40页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第40页 |
| 4.1.3 主要试剂配制方法 | 第40-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-50页 |
| 4.2.1 Bmsod3 基因重组表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.2 Bmsod3 基因的原核表达 | 第44-46页 |
| 4.2.3 BmSOD3 蛋白镍柱亲和层析纯化 | 第46-48页 |
| 4.2.4 Western blotting 检测表达蛋白 | 第48-49页 |
| 4.2.5 BmSOD3 蛋白的透析复性和 SOD 酶活测定 | 第49-50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-57页 |
| 4.3.1 Bmsod3 基因重组表达质粒的构建 | 第50-51页 |
| 4.3.2 Bmsod3 基因的原核表达 | 第51-54页 |
| 4.3.3 BmSOD3 蛋白镍柱亲和层析纯化 | 第54页 |
| 4.3.4 Western blotting | 第54-55页 |
| 4.3.5 纯化蛋白的复性及酶活测定 | 第55-57页 |
| 4.4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 实验结论与工作展望 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| A. BMSOD3 基因的 CDS 序列及其所编码的氨基酸 | 第67-68页 |
| B. 原核表达载体 PET28(+)图谱 | 第68页 |
