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猪PILRs变异剪接体的克隆和功能分析

摘要第8-9页
Abstract第9页
1 引言第10-19页
    1.1 PILRs家族简介第10-12页
        1.1.1 PILRa第11页
        1.1.2 PILRβ第11-12页
    1.2 PILRs家族的研究进展第12-14页
        1.2.1 PILRα的研究进展第12-13页
        1.2.2 PILRβ的研究进展第13页
        1.2.3 本实验室的研究进展第13-14页
    1.3 真核生物mRNA的选择性剪接第14-17页
        1.3.1 选择性剪接的形成过程第14-15页
        1.3.2 选择性剪接的模式第15-16页
        1.3.3 选择性剪接的调控第16-17页
    1.4 真核生物的3’非翻译区第17-18页
    1.5 本研究的目的和意义第18-19页
2 材料与方法第19-27页
    2.1 试验材料第19-21页
        2.1.1 试验动物第19页
        2.1.2 载体和菌株第19页
        2.1.3 主要仪器设备第19-20页
        2.1.4 主要药品及试剂盒第20页
        2.1.5 缓冲液与主要试剂的配制第20-21页
        2.1.6 主要分子生物学软件第21页
        2.1.7 相关生物信息学网站第21页
    2.2 试验方法第21-26页
        2.2.1 样本采集第21页
        2.2.2 总RNA的提取第21-22页
        2.2.3 反转录合成cDNA第22页
        2.2.4 引物的设计与合成第22-23页
        2.2.5 PCR扩增第23-24页
        2.2.6 PCR产物的纯化第24页
        2.2.7 回收的PCR产物与T载体连接第24页
        2.2.8 转化第24页
        2.2.9 转化菌落的PCR鉴定第24页
        2.2.10 质粒DNA的小规模提取第24页
        2.2.11 质粒的酶切鉴定第24页
        2.2.12 重组质粒的测序与序列分析第24-25页
        2.2.13 猪PILRB 3'UTR区双荧光素酶报告基因载体构建第25页
        2.2.14 细胞的培养、诱导、转染和检测第25-26页
        2.2.15 实时荧光定量PCR第26页
    2.3 统计分析第26-27页
3 结果与分析第27-43页
    3.1 猪PILRA基因的克隆与序列分析第27-33页
        3.1.1 克隆第27-28页
        3.1.2 猪PILRA基因核苷酸序列的分析第28-31页
        3.1.3 猪PILRA基因蛋白一级结构分析第31页
        3.1.4 猪PILRA基因蛋白三级结构分析第31-32页
        3.1.5 猪PILRA同源性分析第32-33页
    3.2 PILRs的表达第33-37页
        3.2.1 组织表达谱的构建第33-35页
        3.2.2 诱导表达第35-37页
    3.3 猪PILRB基因3’UTR区缺失的功能研究第37-43页
        3.3.1 猪PILRB基因3’UTR区序列分析第37-38页
        3.3.2 猪PILRB基因3’UTR区的克隆第38-40页
        3.3.3 猪PILRB基因3’UTR区报告基因载体构建第40-41页
        3.3.4 3 ’UTR区变异剪接对PILRB基因表达的影响第41-43页
4 讨论第43-46页
    4.1 猪PILRA基因的克隆、同源性和蛋白结构分析第43页
    4.2 猪PILRs基因的表达与分析第43-44页
        4.2.1 组织表达第43-44页
        4.2.2 诱导表达第44页
    4.3 猪PILRB基因3’UTR区双荧光素酶活性分析第44-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-54页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第54页

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