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重组真菌免疫调节蛋白基因的表达及抗肿瘤作用初步研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
符号说明第13-15页
第一章 绪论第15-31页
    1.1 真菌活性蛋白的研究进展第15-22页
        1.1.1 真菌免疫调节蛋白第15-19页
        1.1.2 真菌凝集素第19-21页
        1.1.3 核糖体失活蛋白第21页
        1.1.4 漆酶第21-22页
    1.2 真菌蛋白药理特性和抗肿瘤作用第22-26页
        1.2.1 药理特性第22-24页
        1.2.2 抗肿瘤特性第24-26页
    1.3 FIPs抗肿瘤作用的机理第26-29页
        1.3.1 间接抗肿瘤作用第27-28页
        1.3.2 直接抗肿瘤作用第28-29页
    1.4 展望第29页
    1.5 本论文研究目的第29-31页
第二章 FIP-SN15、FIP-glu的原核表达第31-48页
    2.1 材料第31页
    2.2 试剂与培养基第31-33页
        2.2.1 试剂盒第31页
        2.2.2 相关试剂第31-32页
        2.2.3 其他试剂第32页
        2.2.4 培养基第32-33页
    2.3 主要仪器和设备第33页
    2.4 实验方法第33-40页
        2.4.1 原核表达载体构建第33-38页
        2.4.2 重组蛋白reFIPs诱导表达第38-40页
        2.4.3 重组蛋白reFIPs浓度的测定第40页
    2.5 实验结果第40-46页
        2.5.1 原核表达载体构建第40-42页
        2.5.2 reFIPs诱导表达第42-44页
        2.5.3 重组真菌免疫调节蛋白reFIPs浓度和表达量测定第44-46页
    2.6 讨论第46-48页
第三章 FIP-SN15、FIP-glu生物学特性及功能第48-70页
    3.1 材料第48页
    3.2 试剂与培养基第48-49页
        3.2.1 试剂盒第48页
        3.2.2 相关试剂第48-49页
        3.2.3 其他试剂第49页
        3.2.4 培养基第49页
    3.3 主要仪器和设备第49页
    3.4 实验方法第49-54页
        3.4.1 重组蛋白FIP-SN15的鉴定及结构分析第49-50页
        3.4.2 浓缩蛋白并更换reFIPs蛋白溶解液第50-51页
        3.4.3 重组蛋白reFIPs中内毒素(LPS)含量测定第51-52页
        3.4.4 重组蛋白FIP-SN15对不同癌细胞的细胞毒性实验第52-53页
        3.4.5 重组蛋白FIP-SN15和FIP-glu对人胶质瘤细胞凝集功能分析第53-54页
        3.4.6 重组蛋白FIP-SN15和FIP-glu诱导细胞凋亡和细胞周期实验第54页
    3.5 实验结果第54-68页
        3.5.1 重组蛋白FIP-SN15的鉴定和结构预测第54-57页
        3.5.2 重组蛋白中LPS含量测定第57-58页
        3.5.3 MTT法进行的细胞毒性实验第58-65页
        3.5.4 reFIPs对人星形胶质瘤细胞系U-251的凝集作用第65-66页
        3.5.5 reFIPs诱导人胶质瘤细胞凋亡分析第66-67页
        3.5.6 reFIPs对细胞周期影响第67-68页
    3.6 讨论第68-70页
第四章 FIPs真核表达载体的构建第70-86页
    4.1 材料第70-71页
    4.2 试剂与培养基第71-72页
        4.2.1 试剂盒第71页
        4.2.2 相关试剂第71-72页
        4.2.3 其他试剂第72页
        4.2.4 培养基第72页
    4.3 主要仪器和设备第72-73页
    4.4 实验方法第73-80页
        4.4.1 构建表达载体PV2+-FIPs第73-78页
        4.4.2 构建表达载体PV2+-FIP-HyB第78-80页
    4.5 结果分析第80-85页
        4.5.1 构建克隆载体第80-81页
        4.5.2 构建表达载体PV2+-FIP第81-83页
        4.5.3 克隆pAN7-1中的潮霉素抗性基因表达盒第83-84页
        4.5.4 构建真菌表达载体PV2+-FIP-HyB第84-85页
    4.6 讨论第85-86页
第五章 总结与展望第86-90页
    5.1 研究总结第86-87页
        5.1.1 reFIPs原核表达载体的构建及表达第86页
        5.1.2 reFIPs生物学特征及功能分析第86-87页
        5.1.3 reFIPs的真核表达载体的构建第87页
    5.2 创新点第87-88页
    5.3 研究展望第88-90页
        5.3.1 reFIPs原核表达载体的构建及表达量测定第88页
        5.3.2 reFIPs生物学特征分析及功能鉴定第88-89页
        5.3.3 reFIPs真核表达载体的构建第89-90页
参考文献第90-96页
附录第96-98页
致谢第98-100页
攻读学位期间发表的学术论文和申请的专利第100-103页

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