摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩写词(ABBREVIATIONS) | 第9-13页 |
1. 文献综述 | 第13-22页 |
1.1 黑色素研究现状 | 第13-14页 |
1.1.1 黑色素的分类 | 第13页 |
1.1.2 黑色素的形成 | 第13-14页 |
1.2 影响黑色素形成的相关基因和信号通路 | 第14-17页 |
1.2.1 WNT信号通路 | 第14-15页 |
1.2.2 KIT和KITL信号通路 | 第15-16页 |
1.2.3 EDN3和EDNRB信号通路 | 第16页 |
1.2.4 α-MSH-ASIP调控通路 | 第16-17页 |
1.3 家禽羽色相关基因研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 黑色素皮质素受体家族基因MCRs | 第17-18页 |
1.3.2 酪氨酸酶相关蛋白家族基因TYRP | 第18页 |
1.3.3 鼠灰信号蛋白基因ASIP | 第18-19页 |
1.3.4 小眼畸形相关转录因子基因MITF | 第19页 |
1.3.5 原癌基因KIT | 第19-20页 |
1.4 羽色遗传研究常用理论与技术 | 第20-21页 |
1.4.1 限制性酶切片段长度多态性 | 第20页 |
1.4.2 扩增片段长度多态性 | 第20页 |
1.4.3 单链构象多态性 | 第20页 |
1.4.4 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
1.4.5 蛋白免疫印迹技术 | 第21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
2. 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 试验材料 | 第22-23页 |
2.2 试验试剂与主要仪器 | 第23-24页 |
2.2.1 主要试剂及试剂盒 | 第23页 |
2.2.2 常用试剂的配制 | 第23-24页 |
2.2.3 主要仪器 | 第24页 |
2.3 主要生物学软件 | 第24页 |
2.4 试验方法 | 第24-29页 |
2.4.1 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
2.4.2 引物设计与目的片段扩增 | 第25-26页 |
2.4.3 组织总RNA的提取 | 第26-27页 |
2.4.4 RNA反转录合成cDNA | 第27-28页 |
2.4.5 候选基因荧光定量PCR | 第28-29页 |
2.5 统计分析 | 第29-31页 |
2.5.1 等位基因频率和基因型频率 | 第29-30页 |
2.5.2 群体观测杂合度和预期杂合度 | 第30页 |
2.5.3 哈温平衡和多态信息含量 | 第30-31页 |
2.5.4 单倍型和单倍型组合分析 | 第31页 |
2.5.5 荧光定量分析 | 第31页 |
3. 结果与分析 | 第31-44页 |
3.1 DNA、RNA检测和PCR扩增结果 | 第31-33页 |
3.1.1 DNA提取结果 | 第31-32页 |
3.1.2 RNA提取结果 | 第32页 |
3.1.3 PCR扩增结果 | 第32-33页 |
3.2 MC1R、TYR和ASIP基因序列测定及SNP筛选 | 第33页 |
3.3 MC1R、TYR和ASIP基因多态位点与鸡的羽色表型相关性分析 | 第33-41页 |
3.3.1 基因SNPs位点纯合度、杂合度、多态信息含量等分析 | 第33-37页 |
3.3.2 基因SNPs位点基因型及基因频率分析 | 第37-39页 |
3.3.3 单倍型分析 | 第39-41页 |
3.4 MC1R、TYR和ASIP基因在各组织中定量结果分析 | 第41-44页 |
4. 讨论 | 第44-49页 |
4.1 MC1R、TYR和ASIP基因多态性与羽色表型分析 | 第44-46页 |
4.1.1 MC1R基因多态性分析 | 第44-45页 |
4.1.2 TYR基因多态性分析 | 第45-46页 |
4.1.3 ASIP基因多态性分析 | 第46页 |
4.2 MC1R、TYR和ASIP基因的表达量分析 | 第46-48页 |
4.2.1 实时荧光定量PCR技术 | 第46页 |
4.2.2 内参基因和试验样品的选择 | 第46-47页 |
4.2.3 MC1R、TYR和ASIP基因表达量调控分析 | 第47-48页 |
4.3 基因多态性、表达量差异与广元灰鸡灰羽形成关系 | 第48-49页 |
5. 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读硕士期间学术成果 | 第57页 |