| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 引言与文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 小鼠胚胎心脏发育简述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 小鼠模式生物简述 | 第11页 |
| 1.1.2 小鼠胚胎心脏发育简述 | 第11-12页 |
| 1.2 小鼠胚胎心脏发育的表观遗传机制 | 第12-17页 |
| 1.2.1 DNA甲基化与心脏发育 | 第13-14页 |
| 1.2.2 ATP依赖的染色质重塑与心脏发育 | 第14-15页 |
| 1.2.3 蛋白修饰与心脏发育 | 第15-17页 |
| 1.3 先天性心脏病 | 第17-18页 |
| 1.3.1 定义及临床表型 | 第17页 |
| 1.3.2 先心病发生遗传和环境因素 | 第17-18页 |
| 1.4 流感病毒与先心病发生 | 第18-21页 |
| 1.4.1 流感病毒致心脏发育异常 | 第18-19页 |
| 1.4.2 流感病毒致病机制 | 第19-20页 |
| 1.4.3 流感病毒与表观遗传机制 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 生物信息学分析软件 | 第23页 |
| 2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-36页 |
| 2.2.1 小鼠饲养及材料的收集 | 第25页 |
| 2.2.2 胚胎心脏总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 RNA逆转录 | 第26-27页 |
| 2.2.4 引物设计与PCR扩增 | 第27-30页 |
| 2.2.5 小鼠胚胎心脏蛋白提取及Western-blot分析 | 第30-31页 |
| 2.2.6 地高辛标记的RNA探针的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.7 小鼠胚胎原位杂交 | 第32-34页 |
| 2.2.8 切片免疫荧光 | 第34-36页 |
| 3 实验结果及分析 | 第36-54页 |
| 3.1 DGE中相关表观遗传学基因筛选 | 第36-38页 |
| 3.1.1 表观遗传相关基因在流感病毒感染后的变化情况 | 第36-37页 |
| 3.1.2 BAF染色质重塑相关基因在流感病毒感染后的变化情况 | 第37-38页 |
| 3.2 DGE结果中H1N1感染相关表观遗传学基因的RT-PCR验证 | 第38-43页 |
| 3.2.1 表观遗传相关基因RT-PCR检测 | 第38-41页 |
| 3.2.2 BAF染色质重塑相关基因及心脏发育标志基因RT-PCR检测 | 第41-43页 |
| 3.3 BAF染色质重塑相关基因及小鼠心脏发育标志基因免疫印迹检测结果 | 第43-48页 |
| 3.3.1 主要BAF染色质重塑相关基因免疫印迹检测结果 | 第43-45页 |
| 3.3.2 Wnt信号通路成员的免疫印迹检测结果 | 第45-46页 |
| 3.3.3 小鼠心脏发育标志性基因免疫印迹检测结果 | 第46-48页 |
| 3.4 整体胚胎原位杂交分析心脏发育关键基因的表达 | 第48-50页 |
| 3.4.1 整体胚胎原位杂交技术检测流感病毒对Bmp4的表达影响 | 第48-50页 |
| 3.5 BAF染色质重塑相关基因及小鼠心脏发育标志基因的切片免疫荧光检测 | 第50-54页 |
| 3.5.1 Baf60c的切片免疫荧光检测 | 第50-51页 |
| 3.5.2 小鼠胚胎心脏发育标志基因的免疫荧光检测 | 第51-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 5 结语 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录1 | 第66-68页 |
| 附录2 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
