| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1.前言 | 第14-30页 |
| 1.1 植物抗病机制的研究进展 | 第14-24页 |
| 1.1.1 植物与病原体的相互作用 | 第14-16页 |
| 1.1.1.1 植物与病原体相互作用的结构基础 | 第14-15页 |
| 1.1.1.2 植物与病原体相互作用的遗传模式 | 第15-16页 |
| 1.1.2 植物抗病基因 | 第16-20页 |
| 1.1.2.1 植物抗病基因的分类 | 第17-18页 |
| 1.1.2.2 抗病基因的作用机制 | 第18-20页 |
| 1.1.3 植物抗病信号传导 | 第20-23页 |
| 1.1.3.1 SA信号传导途径 | 第20-21页 |
| 1.1.3.2 JA信号传导途径 | 第21页 |
| 1.1.3.3 钙离子(Ca2+)信号转导途径 | 第21-22页 |
| 1.1.3.4 活性氧(ROS)信号转导途径 | 第22-23页 |
| 1.1.4 桑树抗病分子机制的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2 植物抗病突变体的研究进展 | 第24-28页 |
| 1.2.1 植物抗病细胞突变体的筛选 | 第24-26页 |
| 1.2.2 植物类病变坏死突变体发生机制 | 第26-28页 |
| 1.2.2.1 植物正常程序性细胞死亡的失控 | 第26页 |
| 1.2.2.2 植物新陈代谢的紊乱 | 第26-27页 |
| 1.2.2.3 植物抗病基因的突变或异常表达 | 第27页 |
| 1.2.2.4 植物抗病机制中信号因子的参与 | 第27-28页 |
| 1.2.2.5 环境因素的影响 | 第28页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第28-30页 |
| 2.材料与方法 | 第30-47页 |
| 2.1 材料 | 第30-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第30-32页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 方法 | 第32-47页 |
| 2.2.1 莒选1号抗病性鉴定 | 第32-34页 |
| 2.2.1.1 病原细菌的接种 | 第32-33页 |
| 2.2.1.2 病原真菌的接种 | 第33-34页 |
| 2.2.2 莒选1号与湖桑32号的形态特征观察 | 第34页 |
| 2.2.3 莒选1号与湖桑32号叶片扫描电镜观察 | 第34页 |
| 2.2.4 莒选1号与湖桑32号植株染色体倍性观察 | 第34-35页 |
| 2.2.4.1 根尖细胞有丝分裂中期染色体制片 | 第34-35页 |
| 2.2.4.2 根尖细胞有丝分裂中期染色体镜检 | 第35页 |
| 2.2.5 SSR标记分析 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 桑树基因组DNA提取 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 引物筛选 | 第36页 |
| 2.2.5.3 SSR-PCR反应体系 | 第36页 |
| 2.2.5.4 SSR-PCR扩增程序 | 第36页 |
| 2.2.5.5 电泳及拍照 | 第36-37页 |
| 2.2.6 莒选1号和湖桑32号转录组测序文库的构建和测序分析 | 第37-39页 |
| 2.2.6.1 总RNA的提取 | 第37页 |
| 2.2.6.2 转录组文库构建及测序 | 第37-38页 |
| 2.2.6.3 测序数据处理过滤 | 第38页 |
| 2.2.6.4 Denovo组装 | 第38页 |
| 2.2.6.5 基因表达量计算及功能注释 | 第38页 |
| 2.2.6.6 Unigene的CDS预测 | 第38页 |
| 2.2.6.7 Unigene的TF编码能力预测 | 第38页 |
| 2.2.6.8 差异表达基因检测 | 第38页 |
| 2.2.6.9 差异表达基因GO功能分析 | 第38-39页 |
| 2.2.6.10 植物抗病基因预测 | 第39页 |
| 2.2.7 差异表达基因的qRT-PCR分析 | 第39-40页 |
| 2.2.7.1 RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.7.2 RNA的纯化 | 第39-40页 |
| 2.2.7.3 mRNA的荧光定量PCR | 第40页 |
| 2.2.8 桑树类甜蛋白基因(Mul-TLP)的克隆及生物信息学分析 | 第40-43页 |
| 2.2.8.1 Trizol法提取桑树总RNA | 第40页 |
| 2.2.8.2 mRNA的反转录 | 第40页 |
| 2.2.8.3 Mul-TLP基因的PCR扩增 | 第40-41页 |
| 2.2.8.4 目的片段的回收 | 第41页 |
| 2.2.8.5 Mul-TLP扩增片段与克隆载体的连接 | 第41-42页 |
| 2.2.8.6 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第42页 |
| 2.2.8.7 连接产物转化大肠杆菌 | 第42页 |
| 2.2.8.8 阳性克隆鉴定 | 第42页 |
| 2.2.8.9 Mul-TLP基因的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2.2.9 Mul-TLP的功能分析 | 第43-47页 |
| 2.2.9.1 Mul-TLP基因植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 2.2.9.2 农杆菌GV3101感受态的制备 | 第44页 |
| 2.2.9.3 农杆菌GV3101感受态的转化 | 第44页 |
| 2.2.9.4 转化拟南芥 | 第44-45页 |
| 2.2.9.5 转基因植株的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
| 2.2.9.6 转Mul-TLP基因拟南芥表型分析 | 第46页 |
| 2.2.9.7 拟南芥植株接种PstDC | 第46页 |
| 2.2.9.8 PstDC3000的CFU值测定 | 第46页 |
| 2.2.9.9 拟南芥植株接种灰霉菌 | 第46-47页 |
| 3.结果与分析 | 第47-75页 |
| 3.1 莒选1号的抗病性鉴定 | 第47页 |
| 3.2 莒选1号与湖桑32号的表型差异分析 | 第47-48页 |
| 3.3 莒选1号与湖桑32号的叶片微观差异分析 | 第48-50页 |
| 3.4 湖桑抗病突变体—莒选1号的染色体核型分析 | 第50页 |
| 3.5 湖桑32号与莒选1号遗传多态性的SSR标记分析 | 第50页 |
| 3.6 莒选1号和湖桑32号转录组差异分析 | 第50-67页 |
| 3.6.1 转录组测序质量评估 | 第50-51页 |
| 3.6.2 Denovo组装 | 第51-53页 |
| 3.6.3 Unigene的功能注释 | 第53-54页 |
| 3.6.4 转录本GO功能分析 | 第54-55页 |
| 3.6.5 莒选1号和湖桑32号转录组差异分析 | 第55-56页 |
| 3.6.6 差异表达基因GO功能分析 | 第56-57页 |
| 3.6.7 植物抗病基因预测 | 第57-62页 |
| 3.6.8 转录因子的预测及差异表达分析 | 第62-66页 |
| 3.6.9 差异表达基因的差异显著性验证 | 第66-67页 |
| 3.7 桑树类甜蛋白基因Mul-TLP的功能研究 | 第67-75页 |
| 3.7.1 Mul-TLP基因的克隆 | 第67-68页 |
| 3.7.2 Mul-TLP基因的生物信息学分析 | 第68-71页 |
| 3.7.2.1 Mul-TLP所编码的蛋白质结构和基本理化性质分析 | 第68-69页 |
| 3.7.2.2 Mul-TLP基因的进化分析 | 第69-71页 |
| 3.7.3 桑树Mul-TLP基因的生物学功能分析 | 第71-75页 |
| 3.7.3.1 Mul-TLP基因植物表达载体的构建与鉴定 | 第71-72页 |
| 3.7.3.2 转Mul-TLP拟南芥的获得及鉴定 | 第72页 |
| 3.7.3.3 转Mul-TLP基因拟南芥表型分析 | 第72-73页 |
| 3.7.3.4 转Mul-TLP基因拟南芥对PstDC3000的抗性分析 | 第73-74页 |
| 3.7.3.5 转Mul-TLP基因拟南芥对灰霉菌的抗性分析 | 第74-75页 |
| 4.讨论 | 第75-78页 |
| 4.1 莒选1号的抗病机制 | 第75-76页 |
| 4.2 Mul-TLP基因的生物功能和抗病机制 | 第76-78页 |
| 5.结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第88页 |
