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LBD1-30基因调控杨树茎干次生生长的功能分析

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-25页
    1.1 杨树第12页
    1.2 次生生长第12-17页
        1.2.1 次生生长的含义第12页
        1.2.2 次生生长的过程第12-14页
        1.2.3 次生生长的分子调控第14-17页
    1.3 LOB家族简介第17-24页
        1.3.1 LBD转录因子第17-18页
        1.3.2 LBD基因的发现第18页
        1.3.3 LOB结构域第18-19页
        1.3.4 LBD基因的分类第19-21页
        1.3.5 LBD基因的功能第21-24页
            1.3.5.1 LBD基因对植物根发育的影响第21-22页
            1.3.5.2 LBD基因对植物叶片发育的影响第22页
            1.3.5.3 LBD基因对花序形态建成的影响第22-23页
            1.3.5.4 LBD基因对植物发育和代谢的影响第23页
            1.3.5.5 LBD蛋白参与植物体对病原体侵染的响应第23-24页
        1.3.6 植物激素对LBD基因表达的调控第24页
    1.4 研究的目的与意义第24-25页
2 材料与方法第25-46页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 植物材料的准备第25页
        2.1.2 载体与菌株第25页
        2.1.3 试剂第25-26页
        2.1.4 培养基的配方第26-27页
        2.1.5 主要试剂的配方第27-28页
        2.1.6 引物和测序第28页
        2.1.7 主要仪器第28页
    2.2 试验方法第28-46页
        2.2.1 LBD1-30和PzP211+35s+PolyA载体的引物设计第28-30页
            2.2.1.1 LBD1-30基因CDNA的下载第28-29页
            2.2.1.2 PzP211+35s+PolyA载体图谱第29页
            2.2.1.3 引物的确定和合成第29-30页
        2.2.2 植物总RNA的提取第30-32页
            2.2.2.1 材料的准备第30页
            2.2.2.2 试剂的准备第30-31页
            2.2.2.3 植物总RNA的提取第31-32页
            2.2.2.4 DNaseI,RNase-free处理第32页
            2.2.2.5 RNA的纯化第32页
            2.2.2.6 浓度的测定第32页
        2.2.3 RNA的反转录第32-33页
        2.2.4 LBD1-30+PzP211+35s+PolyA基因表达载体的构建第33-40页
            2.2.4.1 LBD1-30基因的扩增第33-34页
            2.2.4.2 将LBD1-30基因插入克隆载体第34-36页
            2.2.4.3 将LBD1-30基因连入杨树转化的表达载体PzP211+35s+PolyA第36-39页
            2.2.4.4 PzP211+35s+LBD1-30+PolyA转化农杆菌第39-40页
        2.2.5 农杆菌介导的目的基因转化84K杨第40-42页
        2.2.6 转基因苗的基因鉴定第42-43页
            2.2.6.1 转基因苗的DNA提取第42页
            2.2.6.2 PCR鉴定第42-43页
        2.2.7 QPCR检测LBD1-30基因的表达量第43-44页
        2.2.8 组培苗移栽方法第44页
        2.2.9 茎段徒手切片和染色第44-46页
3 结果与分析第46-58页
    3.1 LBD家族基因在木质部与韧皮部的测序结果分析第46-47页
    3.2 杨树LBD1-30基因的克隆及序列分析第47-50页
    3.3 35S:LBD1-30不同株系转基因苗DNA鉴定第50页
    3.4 转基因苗LBD1-30基因表达水平定量和表型分析第50-53页
    3.5 35S:LBD1-30转基因对次生生长的调控第53-55页
    3.6 35S:LBD1-30转基因苗生长量的变化第55-57页
    3.7 35S:LBD1-30转基因苗次生生长变化的验证第57-58页
4 讨论第58-61页
    4.1 LBD基因在韧皮部和木质部的表达水平第58页
    4.2 LBD1-30基因对次生生长的影响第58-59页
    4.3 LBD1-30基因对正向生长的影响第59页
    4.4 LBD1-30基因对植株体内激素的影响第59-61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-69页
致谢第69-70页
附录第70-78页

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