中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 杨树 | 第12页 |
1.2 次生生长 | 第12-17页 |
1.2.1 次生生长的含义 | 第12页 |
1.2.2 次生生长的过程 | 第12-14页 |
1.2.3 次生生长的分子调控 | 第14-17页 |
1.3 LOB家族简介 | 第17-24页 |
1.3.1 LBD转录因子 | 第17-18页 |
1.3.2 LBD基因的发现 | 第18页 |
1.3.3 LOB结构域 | 第18-19页 |
1.3.4 LBD基因的分类 | 第19-21页 |
1.3.5 LBD基因的功能 | 第21-24页 |
1.3.5.1 LBD基因对植物根发育的影响 | 第21-22页 |
1.3.5.2 LBD基因对植物叶片发育的影响 | 第22页 |
1.3.5.3 LBD基因对花序形态建成的影响 | 第22-23页 |
1.3.5.4 LBD基因对植物发育和代谢的影响 | 第23页 |
1.3.5.5 LBD蛋白参与植物体对病原体侵染的响应 | 第23-24页 |
1.3.6 植物激素对LBD基因表达的调控 | 第24页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-46页 |
2.1 材料 | 第25-28页 |
2.1.1 植物材料的准备 | 第25页 |
2.1.2 载体与菌株 | 第25页 |
2.1.3 试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 培养基的配方 | 第26-27页 |
2.1.5 主要试剂的配方 | 第27-28页 |
2.1.6 引物和测序 | 第28页 |
2.1.7 主要仪器 | 第28页 |
2.2 试验方法 | 第28-46页 |
2.2.1 LBD1-30和PzP211+35s+PolyA载体的引物设计 | 第28-30页 |
2.2.1.1 LBD1-30基因CDNA的下载 | 第28-29页 |
2.2.1.2 PzP211+35s+PolyA载体图谱 | 第29页 |
2.2.1.3 引物的确定和合成 | 第29-30页 |
2.2.2 植物总RNA的提取 | 第30-32页 |
2.2.2.1 材料的准备 | 第30页 |
2.2.2.2 试剂的准备 | 第30-31页 |
2.2.2.3 植物总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.2.2.4 DNaseI,RNase-free处理 | 第32页 |
2.2.2.5 RNA的纯化 | 第32页 |
2.2.2.6 浓度的测定 | 第32页 |
2.2.3 RNA的反转录 | 第32-33页 |
2.2.4 LBD1-30+PzP211+35s+PolyA基因表达载体的构建 | 第33-40页 |
2.2.4.1 LBD1-30基因的扩增 | 第33-34页 |
2.2.4.2 将LBD1-30基因插入克隆载体 | 第34-36页 |
2.2.4.3 将LBD1-30基因连入杨树转化的表达载体PzP211+35s+PolyA | 第36-39页 |
2.2.4.4 PzP211+35s+LBD1-30+PolyA转化农杆菌 | 第39-40页 |
2.2.5 农杆菌介导的目的基因转化84K杨 | 第40-42页 |
2.2.6 转基因苗的基因鉴定 | 第42-43页 |
2.2.6.1 转基因苗的DNA提取 | 第42页 |
2.2.6.2 PCR鉴定 | 第42-43页 |
2.2.7 QPCR检测LBD1-30基因的表达量 | 第43-44页 |
2.2.8 组培苗移栽方法 | 第44页 |
2.2.9 茎段徒手切片和染色 | 第44-46页 |
3 结果与分析 | 第46-58页 |
3.1 LBD家族基因在木质部与韧皮部的测序结果分析 | 第46-47页 |
3.2 杨树LBD1-30基因的克隆及序列分析 | 第47-50页 |
3.3 35S:LBD1-30不同株系转基因苗DNA鉴定 | 第50页 |
3.4 转基因苗LBD1-30基因表达水平定量和表型分析 | 第50-53页 |
3.5 35S:LBD1-30转基因对次生生长的调控 | 第53-55页 |
3.6 35S:LBD1-30转基因苗生长量的变化 | 第55-57页 |
3.7 35S:LBD1-30转基因苗次生生长变化的验证 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
4.1 LBD基因在韧皮部和木质部的表达水平 | 第58页 |
4.2 LBD1-30基因对次生生长的影响 | 第58-59页 |
4.3 LBD1-30基因对正向生长的影响 | 第59页 |
4.4 LBD1-30基因对植株体内激素的影响 | 第59-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70-78页 |