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基于DNA探针构建的生物传感技术检测肿瘤标志物及肿瘤细胞

中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-25页
    1.1 生物传感技术第14-16页
        1.1.1 生物传感器的分类第14-15页
        1.1.2 生物传感器的应用第15-16页
            1.1.2.1 医学领域第15-16页
            1.1.2.2 食品工业第16页
            1.1.2.3 环境监测第16页
    1.2 纳米通道单分子检测技术第16-18页
        1.2.1 纳米通道单分子检测技术的原理第17页
        1.2.2 生物纳米通道单分子技术概述第17页
        1.2.3 生物纳米通道单分子技术的应用第17-18页
            1.2.3.1 基于生物纳米通道的DNA单分子测序第17-18页
            1.2.3.2 基于生物纳米通道的生物超分子组装体的单分子分析第18页
    1.3 肿瘤第18-21页
        1.3.1 肿瘤抗原第18-19页
        1.3.2 肿瘤标志物第19页
        1.3.3 肿瘤细胞第19页
        1.3.4 常见的肿瘤标志物分析方法第19-21页
            1.3.4.1 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法第20页
            1.3.4.2 蛋白质组学技术第20页
            1.3.4.3 双向电泳技术第20页
            1.3.4.4 胶体金层析技术第20-21页
            1.3.4.5 生物芯片技术第21页
        1.3.5 常见的肿瘤细胞的分析方法第21页
    1.4 本课题的提出以及主要研究内容第21-25页
2 材料与方法第25-37页
    2.1 仪器与试剂第25-29页
        2.1.1 仪器第25-26页
        2.1.2 试剂第26-28页
        2.1.3 实验中主要缓冲溶液的配置第28-29页
    2.2 试验方法第29-37页
        2.2.1 基于DNA杂交链式反应结合SYBRGreenI荧光检测人胃癌血清中microRNA第29-31页
            2.2.1.1 DNA杂交链式反应第29页
            2.2.1.2 荧光染料的结合与荧光检测第29-30页
            2.2.1.3 microRNA荧光传感器校正曲线的测定第30页
            2.2.1.4 特异性检测第30页
            2.2.1.5 人胃癌血清样品中microRNA表达量的检测第30-31页
        2.2.2 基于发夹型DNA构建的电化学生物传感器灵敏检测甲基化RNA第31-33页
            2.2.2.1 电化学信号启动子HRP-IgG-AuNPs的制备第31页
            2.2.2.2 金电极预处理第31页
            2.2.2.3 电沉积纳米金第31-32页
            2.2.2.4 连接反应第32页
            2.2.2.5 电化学信号检测第32-33页
            2.2.2.6 甲基化RNA免疫感器校正曲线的测定第33页
            2.2.2.7 甲基化RNA免疫传感器灵敏性检测第33页
            2.2.2.8 直线型探针和发夹型探针分别构建的甲基化RNA免疫传感器的区别第33页
            2.2.2.9 电化学信号启动子HRP-IgG-AuNP和HRP-IgG分别构建的免疫传感器的区别第33页
        2.2.3 基于生物蛋白纳米孔结合限制性核酸内切酶放大技术实现肿瘤细胞的灵敏检测第33-37页
            2.2.3.1 构建磷脂双分子层第34-35页
            2.2.3.4 连接反应与outputDNA的释放第35页
            2.2.3.5 纳米孔信号记录与数据处理第35-36页
            2.2.3.6 纳米孔道单分子检测细胞的校正曲线测定第36页
            2.2.3.7 特异性检测第36页
            2.2.3.8 人血清样品中肿瘤细胞的检测第36-37页
3 结果与分析第37-57页
    3.1 基于DNA杂交链式反应结合SYBRGreenI荧光检测人胃癌血清中microRNA第37-42页
        3.1.1 不同反应情况的荧光检测体系的荧光信号表征第37-38页
        3.1.2 条件优化第38-39页
        3.1.3 校正曲线和线性范围第39页
        3.1.4 传感器的选择性和稳定性第39-41页
        3.1.5 正常人与胃癌患者血清中microRNA-21表达量的测定第41-42页
    3.2 基于发夹型DNA构建的电化学生物传感器灵敏检测甲基化RNA第42-50页
        3.2.1 实验可行性分析第42-44页
        3.2.2 DPV检测的可行性分析第44页
        3.2.3 条件优化第44-46页
        3.2.4 标准曲线的测定第46-47页
        3.2.5 免疫传感器的重复性、稳定性和选择性第47-48页
        3.2.6 直线型探针和发夹型探针分别构建的甲基化RNA免疫传感器的区别第48-49页
        3.2.7 电化学信号启动子HRP-IgG-AuNP和HRP-IgG分别构建的免疫传感器的区别第49-50页
    3.3 基于生物蛋白纳米孔结合限制性核酸内切酶放大技术实现肿瘤细胞的灵敏检测第50-57页
        3.3.1 对称电解质和不对称电解质体系在检测核酸的灵敏性分析第50-51页
        3.3.2 预实验信号分析第51-52页
        3.3.3 实验可行性分析第52-54页
        3.3.4 标准曲线的绘制第54-55页
        3.3.5 纳米孔结合酶放大技术选择性的研究第55-56页
        3.3.6 血清样品中纳米孔结合酶放大技术检测Ramos细胞的灵敏性分析第56-57页
4 讨论第57-60页
    4.1 基于DNA杂交链式反应结合SYBRGreenI荧光检测人胃癌血清中microRNA第57-58页
    4.2 基于发夹型DNA构建的电化学生物传感器灵敏检测甲基化RNA第58-59页
    4.3 基于生物蛋白纳米孔结合限制性核酸内切酶放大技术实现肿瘤细胞的灵敏检测第59-60页
5 结论第60-61页
    5.1 基于DNA杂交链式反应结合SYBRGreenI荧光检测人胃癌血清中microRNA第60页
    5.2 基于发夹型DNA构建的电化学生物传感器灵敏检测甲基化RNA第60页
    5.3 基于生物蛋白纳米孔结合限制性核酸内切酶放大技术实现肿瘤细胞的灵敏检测第60-61页
6 创新之处第61-62页
7 参考文献第62-71页
8 致谢第71-72页
9 攻读学位期间发表论文情况第72页

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