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先天感染ALV-J对鸡马立克病疫苗免疫保护效果的影响及不同马立克病疫苗的分子鉴别

符号说明第5-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
1 前言第14-27页
    1.1 鸡马立克病(MD)的研究进展第14-23页
        1.1.1 MDV分类及病原学特点第14-15页
        1.1.2 MDV的基因组结构第15-16页
        1.1.3 MDV特有基因第16-18页
        1.1.4 MDV的发病机理第18-19页
            1.1.4.1 早期溶细胞感染第18页
            1.1.4.2 潜伏感染第18页
            1.1.4.3 第二次溶细胞感染第18-19页
            1.1.4.4 肿瘤细胞增生期第19页
        1.1.5 MDV的免疫抑制第19-20页
        1.1.6 流行病学第20页
        1.1.7 临床症状及病理变化第20-21页
        1.1.8 诊断技术第21-22页
            1.1.8.1 常规诊断第21页
            1.1.8.2 病毒分离与鉴定第21页
            1.1.8.3 聚合酶链反应技术(PCR)第21-22页
            1.1.8.4 实时荧光定量PCR技术第22页
        1.1.9 MD疫苗的研究进展第22-23页
            1.1.9.1 疫苗的免疫机理第22页
            1.1.9.2 疫苗的种类第22-23页
    1.2 禽白血病(AL)的研究进展第23-25页
        1.2.1 病原学特点第24页
        1.2.2 流行病学特征第24页
        1.2.3 免疫抑制机制与致病性第24-25页
    1.3 MDV与ALV混合感染第25-26页
    1.4 本研究的目的和意义第26-27页
        1.4.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响第26页
        1.4.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立第26-27页
2 材料和方法第27-39页
    2.1 试验材料第27-28页
        2.1.1 病毒第27页
        2.1.2 疫苗与质粒第27页
        2.1.3 主要试剂与仪器第27-28页
        2.1.4 其他试剂的配制第28页
        2.1.5 试验动物与SPF饲养设施第28页
    2.2 方法第28-39页
        2.2.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备第28-29页
        2.2.2 MDV的增殖与定量第29页
        2.2.3 ALV的增殖与定量第29-30页
        2.2.4 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响第30-34页
            2.2.4.1 试验设计第30-31页
            2.2.4.2 鸡的死亡率及肿瘤发生率第31页
            2.2.4.3 体重和免疫器官指数的测定第31页
            2.2.4.4 AIV-H9和NDV灭活疫苗的免疫和抗体水平的测定第31-32页
            2.2.4.5 外周血淋巴细胞DNA的提取第32-33页
            2.2.4.6 GX0101的增殖动态第33-34页
            2.2.4.7 病理学检测第34页
            2.2.4.8 统计学分析第34页
        2.2.5 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立第34-39页
            2.2.5.1 PCR引物的设计与合成第34页
            2.2.5.2 疫苗DNA的提取第34页
            2.2.5.3 PCR扩增体系及条件优化第34-37页
            2.2.5.4 地高辛标记DNA探针的制备第37页
            2.2.5.5 核酸斑点杂交检测第37-39页
3 试验结果第39-49页
    3.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响第39-45页
        3.1.1 MDV毒株GX0101以及ALV-J毒株NX0101含量测定结果第39页
        3.1.2 SPF鸡的死亡率及肿瘤发生率第39-41页
        3.1.3 SPF鸡各组体重第41-42页
        3.1.4 SPF鸡AIV-H9疫苗免疫后抗体水平测定第42-43页
        3.1.5 SPF鸡NDV疫苗免疫后抗体水平测定第43-44页
        3.1.6 SPF鸡中枢免疫器官指数第44-45页
        3.1.7 SPF鸡GX0101病毒增殖动态第45页
    3.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立第45-49页
        3.2.1 PCR方法对MDVmeq基因缺失疫苗SC9-1与商品化疫苗的鉴别结果第45-46页
        3.2.2 核酸斑点杂交方法对MDVmeq基因缺失疫苗SC9-1与商品化疫苗的鉴别结果.第46-49页
            3.2.2.1 探针标记结果第46-47页
            3.2.2.2 核酸斑点杂交结果第47-49页
4 讨论第49-52页
    4.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响第49-50页
    4.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立第50-52页
5 结论第52-53页
6 参考文献第53-62页
7 致谢第62-63页
8 攻读学位期间发表论文情况第63页

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