符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 前言 | 第14-27页 |
1.1 鸡马立克病(MD)的研究进展 | 第14-23页 |
1.1.1 MDV分类及病原学特点 | 第14-15页 |
1.1.2 MDV的基因组结构 | 第15-16页 |
1.1.3 MDV特有基因 | 第16-18页 |
1.1.4 MDV的发病机理 | 第18-19页 |
1.1.4.1 早期溶细胞感染 | 第18页 |
1.1.4.2 潜伏感染 | 第18页 |
1.1.4.3 第二次溶细胞感染 | 第18-19页 |
1.1.4.4 肿瘤细胞增生期 | 第19页 |
1.1.5 MDV的免疫抑制 | 第19-20页 |
1.1.6 流行病学 | 第20页 |
1.1.7 临床症状及病理变化 | 第20-21页 |
1.1.8 诊断技术 | 第21-22页 |
1.1.8.1 常规诊断 | 第21页 |
1.1.8.2 病毒分离与鉴定 | 第21页 |
1.1.8.3 聚合酶链反应技术(PCR) | 第21-22页 |
1.1.8.4 实时荧光定量PCR技术 | 第22页 |
1.1.9 MD疫苗的研究进展 | 第22-23页 |
1.1.9.1 疫苗的免疫机理 | 第22页 |
1.1.9.2 疫苗的种类 | 第22-23页 |
1.2 禽白血病(AL)的研究进展 | 第23-25页 |
1.2.1 病原学特点 | 第24页 |
1.2.2 流行病学特征 | 第24页 |
1.2.3 免疫抑制机制与致病性 | 第24-25页 |
1.3 MDV与ALV混合感染 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
1.4.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响 | 第26页 |
1.4.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立 | 第26-27页 |
2 材料和方法 | 第27-39页 |
2.1 试验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 病毒 | 第27页 |
2.1.2 疫苗与质粒 | 第27页 |
2.1.3 主要试剂与仪器 | 第27-28页 |
2.1.4 其他试剂的配制 | 第28页 |
2.1.5 试验动物与SPF饲养设施 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28-39页 |
2.2.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第28-29页 |
2.2.2 MDV的增殖与定量 | 第29页 |
2.2.3 ALV的增殖与定量 | 第29-30页 |
2.2.4 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响 | 第30-34页 |
2.2.4.1 试验设计 | 第30-31页 |
2.2.4.2 鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第31页 |
2.2.4.3 体重和免疫器官指数的测定 | 第31页 |
2.2.4.4 AIV-H9和NDV灭活疫苗的免疫和抗体水平的测定 | 第31-32页 |
2.2.4.5 外周血淋巴细胞DNA的提取 | 第32-33页 |
2.2.4.6 GX0101的增殖动态 | 第33-34页 |
2.2.4.7 病理学检测 | 第34页 |
2.2.4.8 统计学分析 | 第34页 |
2.2.5 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立 | 第34-39页 |
2.2.5.1 PCR引物的设计与合成 | 第34页 |
2.2.5.2 疫苗DNA的提取 | 第34页 |
2.2.5.3 PCR扩增体系及条件优化 | 第34-37页 |
2.2.5.4 地高辛标记DNA探针的制备 | 第37页 |
2.2.5.5 核酸斑点杂交检测 | 第37-39页 |
3 试验结果 | 第39-49页 |
3.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响 | 第39-45页 |
3.1.1 MDV毒株GX0101以及ALV-J毒株NX0101含量测定结果 | 第39页 |
3.1.2 SPF鸡的死亡率及肿瘤发生率 | 第39-41页 |
3.1.3 SPF鸡各组体重 | 第41-42页 |
3.1.4 SPF鸡AIV-H9疫苗免疫后抗体水平测定 | 第42-43页 |
3.1.5 SPF鸡NDV疫苗免疫后抗体水平测定 | 第43-44页 |
3.1.6 SPF鸡中枢免疫器官指数 | 第44-45页 |
3.1.7 SPF鸡GX0101病毒增殖动态 | 第45页 |
3.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立 | 第45-49页 |
3.2.1 PCR方法对MDVmeq基因缺失疫苗SC9-1与商品化疫苗的鉴别结果 | 第45-46页 |
3.2.2 核酸斑点杂交方法对MDVmeq基因缺失疫苗SC9-1与商品化疫苗的鉴别结果. | 第46-49页 |
3.2.2.1 探针标记结果 | 第46-47页 |
3.2.2.2 核酸斑点杂交结果 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 先天感染ALV-J对马立克病疫苗免疫保护效果的影响 | 第49-50页 |
4.2 不同马立克病疫苗分子鉴别方法的建立 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
6 参考文献 | 第53-62页 |
7 致谢 | 第62-63页 |
8 攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |