符号说明 | 第5-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-29页 |
1.1 病原 | 第15-19页 |
1.1.1 病名定义与历史概述 | 第15-16页 |
1.1.2 坦布苏病毒的病原特点 | 第16-18页 |
1.1.3 坦布苏病毒的宿主 | 第18-19页 |
1.2 流行病学 | 第19-20页 |
1.3 鸭坦布苏病临床特征 | 第20-22页 |
1.3.1 临床病理变化 | 第20页 |
1.3.2 开产种(蛋)禽 | 第20-21页 |
1.3.3 后备种(蛋)禽 | 第21-22页 |
1.3.4 雄性家禽 | 第22页 |
1.4 病理组织学变化 | 第22-23页 |
1.5 鸭坦布苏病的检测和诊断 | 第23-27页 |
1.5.1 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第24页 |
1.5.2 乳胶凝集试验(LAT) | 第24-25页 |
1.5.3 RT-PCR技术 | 第25页 |
1.5.4 实时荧光定量RT-PCR技术 | 第25-26页 |
1.5.5 环介导等温扩增(RT-LAMP)技术 | 第26页 |
1.5.6 核酸探针技术 | 第26-27页 |
1.6 鸭坦布苏病毒的潜在威胁 | 第27页 |
1.7 防治措施 | 第27-28页 |
1.8 展望 | 第28页 |
1.9 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
2 材料和方法 | 第29-43页 |
2.1 材料 | 第29-32页 |
2.1.1 病料及毒株来源 | 第29页 |
2.1.2 主要仪器和试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 试剂的配制 | 第30-32页 |
2.2 方法 | 第32-43页 |
2.2.1 DTMUV斑点杂交方法的建立 | 第32-37页 |
2.2.2 一株TMUV野毒的分离鉴定与全基因组序列分析 | 第37页 |
2.2.3 鸭坦布苏病毒全基因序列的分析 | 第37-39页 |
2.2.4 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达 | 第39-43页 |
3 结果 | 第43-59页 |
3.1 核酸斑点杂交方法的建立与应用 | 第43-46页 |
3.1.1 TMUVNS5基因的扩增 | 第43页 |
3.1.2 探针的制备 | 第43-44页 |
3.1.3 核酸斑点杂交方法灵敏度检测 | 第44页 |
3.1.4 核酸斑点杂交方法特异性检测 | 第44-45页 |
3.1.5 核酸斑点杂交方法的应用 | 第45-46页 |
3.2 一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定和全基因组序列分析 | 第46-51页 |
3.2.1 一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定 | 第46-47页 |
3.2.2 TMUVSD1601株全基因组序列的分析 | 第47-51页 |
3.3 E蛋白的原核表达 | 第51-59页 |
3.3.1 E基因的扩增结果 | 第51-52页 |
3.3.2 重组质粒pGEX-E的酶切鉴定 | 第52页 |
3.3.3 GST-E融合蛋白的诱导表达 | 第52-53页 |
3.3.4 重组E蛋白最佳表达条件的探索 | 第53-56页 |
3.3.5 重组E蛋白的Westernblot鉴定 | 第56-57页 |
3.3.6 GST-E融合蛋白纯化 | 第57-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
硕士期间发表的论文 | 第74页 |