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鸭坦布苏病毒核酸斑点杂交方法的建立及E蛋白的原核表达

符号说明第5-10页
中文摘要第10-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第15-29页
    1.1 病原第15-19页
        1.1.1 病名定义与历史概述第15-16页
        1.1.2 坦布苏病毒的病原特点第16-18页
        1.1.3 坦布苏病毒的宿主第18-19页
    1.2 流行病学第19-20页
    1.3 鸭坦布苏病临床特征第20-22页
        1.3.1 临床病理变化第20页
        1.3.2 开产种(蛋)禽第20-21页
        1.3.3 后备种(蛋)禽第21-22页
        1.3.4 雄性家禽第22页
    1.4 病理组织学变化第22-23页
    1.5 鸭坦布苏病的检测和诊断第23-27页
        1.5.1 酶联免疫吸附试验(ELISA)第24页
        1.5.2 乳胶凝集试验(LAT)第24-25页
        1.5.3 RT-PCR技术第25页
        1.5.4 实时荧光定量RT-PCR技术第25-26页
        1.5.5 环介导等温扩增(RT-LAMP)技术第26页
        1.5.6 核酸探针技术第26-27页
    1.6 鸭坦布苏病毒的潜在威胁第27页
    1.7 防治措施第27-28页
    1.8 展望第28页
    1.9 本研究的目的和意义第28-29页
2 材料和方法第29-43页
    2.1 材料第29-32页
        2.1.1 病料及毒株来源第29页
        2.1.2 主要仪器和试剂第29-30页
        2.1.3 试剂的配制第30-32页
    2.2 方法第32-43页
        2.2.1 DTMUV斑点杂交方法的建立第32-37页
        2.2.2 一株TMUV野毒的分离鉴定与全基因组序列分析第37页
        2.2.3 鸭坦布苏病毒全基因序列的分析第37-39页
        2.2.4 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达第39-43页
3 结果第43-59页
    3.1 核酸斑点杂交方法的建立与应用第43-46页
        3.1.1 TMUVNS5基因的扩增第43页
        3.1.2 探针的制备第43-44页
        3.1.3 核酸斑点杂交方法灵敏度检测第44页
        3.1.4 核酸斑点杂交方法特异性检测第44-45页
        3.1.5 核酸斑点杂交方法的应用第45-46页
    3.2 一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定和全基因组序列分析第46-51页
        3.2.1 一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定第46-47页
        3.2.2 TMUVSD1601株全基因组序列的分析第47-51页
    3.3 E蛋白的原核表达第51-59页
        3.3.1 E基因的扩增结果第51-52页
        3.3.2 重组质粒pGEX-E的酶切鉴定第52页
        3.3.3 GST-E融合蛋白的诱导表达第52-53页
        3.3.4 重组E蛋白最佳表达条件的探索第53-56页
        3.3.5 重组E蛋白的Westernblot鉴定第56-57页
        3.3.6 GST-E融合蛋白纯化第57-59页
4 讨论第59-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-73页
致谢第73-74页
硕士期间发表的论文第74页

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