| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 益生菌概述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 益生菌定义 | 第12页 |
| 1.1.2 适用于益生菌制品的菌株 | 第12-14页 |
| 1.1.3 益生菌的益生性 | 第14-16页 |
| 1.2 益生菌与抗氧化性 | 第16-18页 |
| 1.2.1 生物氧化概述 | 第16页 |
| 1.2.2 自由基及自由基清除的基本概念 | 第16-17页 |
| 1.2.3 益生菌的抗氧化作用 | 第17-18页 |
| 1.2.4 益生菌的抗氧化机制 | 第18页 |
| 1.3 超氧化物歧化酶 | 第18-22页 |
| 1.3.1 抗氧化酶类 | 第18页 |
| 1.3.2 SOD 概述 | 第18-19页 |
| 1.3.3 SOD 分类比较 | 第19页 |
| 1.3.4 SOD 的分布和定位 | 第19-20页 |
| 1.3.5 SOD 的应用前景 | 第20-22页 |
| 1.4 干酪乳杆菌 | 第22-25页 |
| 1.4.1 干酪乳杆菌概述 | 第22-23页 |
| 1.4.2 干酪乳杆菌的益生功能 | 第23-24页 |
| 1.4.3 干酪乳杆菌与SOD 酶 | 第24-25页 |
| 第二章 课题的研究意义和研究方案 | 第25-28页 |
| 2.1 研究意义 | 第25-26页 |
| 2.2 研究方案 | 第26-28页 |
| 第三章 几株乳杆菌抗氧化性评价 | 第28-40页 |
| 3.1 仪器、试剂与材料 | 第28-30页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第28-29页 |
| 3.1.2 主要药品和试剂 | 第29-30页 |
| 3.1.3 实验菌株 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-33页 |
| 3.2.1 菌种活化和保藏 | 第30-31页 |
| 3.2.2 革兰氏染色和形态观察 | 第31页 |
| 3.2.3 生长曲线测定 | 第31-32页 |
| 3.2.4 乳杆菌完整细胞及无细胞提取液制备 | 第32页 |
| 3.2.5 超氧阴离子清除率评价方法 | 第32页 |
| 3.2.6 过氧化氢清除率评价方法 | 第32-33页 |
| 3.2.7 脂质过氧化物清除率评价方法 | 第33页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第33-40页 |
| 3.3.1 乳杆菌生长曲线 | 第33-36页 |
| 3.3.2 6 株乳杆菌抗氧化性评价 | 第36-40页 |
| 第四章 目的sod 基因获取 | 第40-51页 |
| 4.1 仪器、试剂和材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第40页 |
| 4.1.2 主要药品与试剂 | 第40-41页 |
| 4.1.3 实验菌株 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 4.2.1 基因组DNA 的提取与纯化 | 第42页 |
| 4.2.2 sod 基因片段扩增 | 第42-43页 |
| 4.2.3 凝胶电泳 | 第43-44页 |
| 4.2.4 DNA 片段的纯化 | 第44-45页 |
| 4.2.5 感受态细胞制备 | 第45页 |
| 4.2.6 连接pMD19-T 载体克隆测序 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第46-51页 |
| 4.3.1 16s rDNA 测序菌株鉴定 | 第46-47页 |
| 4.3.2 引物设计及PCR 扩增 | 第47-49页 |
| 4.3.3 PCR 产物测序鉴定 | 第49-51页 |
| 第五章 sod 基因转化宿主菌 | 第51-60页 |
| 5.1 仪器、试剂和材料 | 第51-52页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第51页 |
| 5.1.2 主要药品与试剂 | 第51-52页 |
| 5.1.3 实验菌株 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 5.2.1 空质粒扩增与抽提 | 第52-53页 |
| 5.2.2 质粒与目的基因酶切、连接及转化DH5α | 第53-54页 |
| 5.2.3 pETsod 重组质粒转化DH5α | 第54-55页 |
| 5.2.4 重组质粒电转化大肠杆菌BL21(DE3) | 第55-56页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第56-60页 |
| 5.3.1 DH5α阳性克隆子检验 | 第56-57页 |
| 5.3.2 重组质粒双酶切检验 | 第57-58页 |
| 5.3.3 重组质粒电转化BL21(DE3)检验 | 第58-60页 |
| 第六章 重组菌蛋白诱导表达、纯化、鉴定和酶活检测 | 第60-72页 |
| 6.1 仪器、试剂和材料 | 第60-62页 |
| 6.1.1 实验仪器 | 第60-61页 |
| 6.1.2 主要药品与试剂 | 第61-62页 |
| 6.1.3 实验菌株 | 第62页 |
| 6.2 实验方法 | 第62-68页 |
| 6.2.1 重组菌诱导表达及粗蛋白提取 | 第62-63页 |
| 6.2.2 SDS-PAGE 钠十二烷基的硫酸盐(SDS)聚丙烯酰胺凝胶电泳法 | 第63-64页 |
| 6.2.3 Ni-NTA 蛋白亲和纯化 | 第64-65页 |
| 6.2.4 蛋白浓度及活性测定 | 第65-68页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第68-72页 |
| 6.3.1 重组菌诱导表达，粗蛋白提取物SDS-PAGE 检验 | 第68-69页 |
| 6.3.2 Ni-NTA 亲和纯化和SDS-PAGE 检测 | 第69-71页 |
| 6.3.3 纯化SOD 蛋白活性测定 | 第71-72页 |
| 第七章 重组菌抗氧化性评价 | 第72-78页 |
| 7.1 仪器、试剂与材料 | 第72-74页 |
| 7.1.1 实验仪器 | 第72-73页 |
| 7.1.2 主要药品和试剂 | 第73-74页 |
| 7.1.3 实验菌株 | 第74页 |
| 7.2 实验方法 | 第74-75页 |
| 7.2.1 大肠杆菌完整细胞及无细胞提取液制备 | 第74页 |
| 7.2.2 超氧阴离子清除率评价方法 | 第74-75页 |
| 7.2.3 过氧化氢清除率评价方法 | 第75页 |
| 7.2.4 脂质过氧化物清除率评价方法 | 第75页 |
| 7.3 结果与讨论 | 第75-78页 |
| 第八章 SOD 氨基酸序列对比分析 | 第78-81页 |
| 8.1 实验材料 | 第78页 |
| 8.2 结果与讨论 | 第78-81页 |
| 第九章 结论、展望和创新点 | 第81-84页 |
| 9.1 结论 | 第81-82页 |
| 9.2 创新点 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或投稿的学术论文 | 第90-92页 |
