摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
1. 前言 | 第13-42页 |
1.1. 拟南芥雌蕊及果实发育 | 第13-21页 |
1.1.1. 野生型雌蕊及果实结构 | 第13-16页 |
1.1.2. 拟南芥雌蕊及果实发育阶段 | 第16-19页 |
1.1.3. 影响果实形态发育的基因 | 第19-21页 |
1.2. 植株激素对植株株大小及其形态发育的影响 | 第21-31页 |
1.2.1. 生长素的影响 | 第23-26页 |
1.2.2. 赤霉素的影响 | 第26-29页 |
1.2.3. 油菜素内酯的影响 | 第29-30页 |
1.2.4. 控制分枝的新激素通路 | 第30-31页 |
1.3. 转基因技术在植物基因研究中的应用 | 第31-32页 |
1.4. 人工MIRNA基因沉默的应用 | 第32-40页 |
1.4.1. amiRNA的设计 | 第34-36页 |
1.4.2. amiRNA对单靶基因的效应 | 第36-37页 |
1.4.3. amiRNA对多靶基因的效应 | 第37-40页 |
1.4.4. amiRNA骨架的影响 | 第40页 |
1.5. 本研究要解决的问题和目的 | 第40-42页 |
2. 材料与方法 | 第42-56页 |
2.1. 实验材料与试剂 | 第42-46页 |
2.1.1. 植物材料与种植条件 | 第42页 |
2.1.2. 质粒与菌柱 | 第42页 |
2.1.3. 引物 | 第42-43页 |
2.1.4. 工具酶 | 第43页 |
2.1.5. 培养基 | 第43-45页 |
2.1.6. 其他试剂及耗材 | 第45-46页 |
2.2. 实验仪器 | 第46页 |
2.3. 分析软件 | 第46-47页 |
2.4. 实验方法 | 第47-56页 |
2.4.1. 克隆及载体构建 | 第47页 |
2.4.2. 核酸分析相关方法 | 第47-50页 |
2.4.3. 细菌的遗传转化 | 第50-52页 |
2.4.5. 拟南芥的遗传转化、筛选与杂交 | 第52-53页 |
2.4.6. 转基因拟南芥表型分析的相关方法 | 第53页 |
2.4.7 石蜡切片技术 | 第53-55页 |
2.4.8 统计分析方法 | 第55页 |
2.4.9. 图像处理 | 第55-56页 |
3. 结果与分析 | 第56-95页 |
3.1. 拟南芥ATSST基因家族序列生物信息学分析 | 第56-61页 |
3.1.1. TAIR数据库信息分析 | 第56-58页 |
3.1.2. BLAST序列分析及进化树分析 | 第58-61页 |
3.2. ATSST基因的表达模式分析 | 第61-66页 |
3.2.1. 载体构建 | 第63-64页 |
3.2.2. AtSST1的表达模式分析 | 第64-65页 |
3.2.3. AtSS7-2的表达模式分析 | 第65-66页 |
3.2.4. AtSST3的表达模式分析 | 第66页 |
3.3. T-DNA突变植株与过表达转基因植株的表型分析 | 第66-81页 |
3.3.1. T-DNA突变植株的鉴定 | 第67-68页 |
3.3.2. GFP融合蛋白过表达转基因植株构建 | 第68-70页 |
3.3.3. AtSST基因蛋白亚细胞定位 | 第70-71页 |
3.3.4. 荧光定量PCR检测基因表达水平 | 第71-72页 |
3.3.5. 突变体和过表达转基因植株表型分析 | 第72-81页 |
3.3.5.1. 莲座叶表型分析 | 第72-73页 |
3.3.5.2. 植株高度分析 | 第73-75页 |
3.3.5.3. 花序结构分析 | 第75-77页 |
3.3.5.4. 角果大小分析 | 第77-78页 |
3.3.5.5. 种子大小及排列分析 | 第78-80页 |
3.3.5.6. 花柱特化缺陷 | 第80-81页 |
3.4. 过表达转基因植株中生长素极性分布 | 第81-82页 |
3.5. 人工MIRNA干扰沉默ATSST基因家族 | 第82-87页 |
3.5.1. amiR-AtSST载体构建 | 第83-84页 |
3.5.2. amiR-AtSST转基因植株AtSST基因表达水平检测 | 第84-85页 |
3.5.3. amiR-AtSST转基因植株表型分析 | 第85-87页 |
3.6. 上游NGA转录因子对SST基因的调控作用 | 第87-88页 |
3.7. SST基因与NAC基因在基因组上排列位置的相关性分析 | 第88-95页 |
4. 讨论 | 第95-101页 |
4.1. SST是来源于基因组片段复制的植物特有的一类新基因家族 | 第95-96页 |
4.2. ATSST基因对植物有性生殖有广泛的作用 | 第96-97页 |
4.3. ATSST基因参与果实伸长与空间伸展方向的调控 | 第97-98页 |
4.4. ATSST基因存在功能冗余且受NGA转录因子调控 | 第98-99页 |
4.5. SST基因与NAC基因连锁且相互调控其表达 | 第99-101页 |
5. 参考文献 | 第101-114页 |
在读期间发表的论文 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |