摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 TCP基因的研究进展 | 第12-18页 |
1.1.1 TCP基因家族的命名 | 第12页 |
1.1.2 TCP基因家族的进化 | 第12-14页 |
1.1.3 TCP基因的相关功能 | 第14-18页 |
第二章 引言 | 第18-20页 |
2.1 研究背景、目的及意义 | 第18-19页 |
2.2 技术路线 | 第19-20页 |
第三章 矮牵牛ECE支TCP基因的克隆及序列分析 | 第20-36页 |
3.1 实验材料 | 第20-21页 |
3.1.1 植物材料 | 第20页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第20页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
3.1.4 试剂盒及主要试剂 | 第20页 |
3.1.5 常用试剂配制 | 第20-21页 |
3.2 实验方法 | 第21-26页 |
3.2.1 植物材料的处理 | 第21页 |
3.2.2 矮牵牛DNA的提取 | 第21页 |
3.2.3 矮牵牛总RNA提取 | 第21-22页 |
3.2.4 cDNA第一链的合成 | 第22-23页 |
3.2.5 ECE支TCP基因片段扩增 | 第23页 |
3.2.6 hiTAIL-PCR法扩增ECE支TCP基因未知片段 | 第23-24页 |
3.2.7 RACE技术克隆基因5'端和3'端cDNA序列 | 第24-25页 |
3.2.8 目的基因的PCR扩增、DNA片段的回收、连接、转化、鉴定和测序 | 第25-26页 |
3.2.9 基因的生物信息学分析 | 第26页 |
3.3 结果与分析 | 第26-33页 |
3.3.1 矮牵牛ECE支TCP基因TCP-R区序列的扩增及分析 | 第26-27页 |
3.3.2 PhTCP1-4基因的全长序列的克隆及序列分析 | 第27-32页 |
3.3.3 矮牵牛ECE支TCP基因的进化树分析 | 第32-33页 |
3.4 小结与讨论 | 第33-36页 |
3.4.1 未知序列的获得 | 第33页 |
3.4.2 矮牵牛ECE支TCP基因全长的获得及序列分析 | 第33页 |
3.4.3 生物信息学分析 | 第33-36页 |
第四章 矮牵牛ECE支TCP基因的序列变异研究 | 第36-42页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第36页 |
4.1.1 实验材料、载体 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂及设备 | 第36页 |
4.2 实验方法 | 第36页 |
4.3 结果与分析 | 第36-40页 |
4.4 小结与讨论 | 第40-42页 |
第五章 矮牵牛ECE支TCP基因的表达分析 | 第42-48页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第42页 |
5.1.1 实验材料 | 第42页 |
5.1.2 试剂盒及主要设备 | 第42页 |
5.2 实验方法 | 第42页 |
5.2.1 植物的取材 | 第42页 |
5.2.2 基因的表达分析 | 第42页 |
5.3 结果及分析 | 第42-45页 |
5.3.1 PhTCP1-4基因的在矮牵牛不同组织中的表达分析 | 第42-43页 |
5.3.2 PhTCP1-4基因的在矮牵牛腋芽中的表达分析 | 第43-45页 |
5.4 小结与讨论 | 第45-48页 |
5.4.1 PhTCP1-4基因在矮牵牛中不同部位的表达特异性分析 | 第45-47页 |
5.4.2 PhTCP1-4基因在矮牵牛腋芽中的表达差异 | 第47-48页 |
第六章 PhTCP1基因的超量表达研究 | 第48-58页 |
6.1 材料与试剂 | 第48-49页 |
6.1.1 实验材料、菌株及载体 | 第48页 |
6.1.2 主要仪器设备 | 第48页 |
6.1.3 试剂盒及主要试剂 | 第48页 |
6.1.4 常用试剂配制 | 第48-49页 |
6.1.5 矮牵牛转化基本培养基 | 第49页 |
6.2 实验方法 | 第49-52页 |
6.2.1 植物材料的处理 | 第49页 |
6.2.2 植物表达载体的构建 | 第49-50页 |
6.2.3 农杆菌电转化感受态的制备 | 第50-51页 |
6.2.4 电击杯的处理及农杆菌电转化感受态细胞的转化 | 第51页 |
6.2.5 农杆菌介导矮牵牛的转化 | 第51-52页 |
6.2.7 转PhTCP1基因矮牵牛的检测 | 第52页 |
6.3 结果与分析 | 第52-56页 |
6.3.1 PhTCP1基因超表达(pCMF505)和沉默(pCMF506)表达载体构建 | 第52-53页 |
6.3.2 转基因矮牵牛的获得和检测 | 第53-56页 |
6.4 小结与讨论 | 第56-58页 |
第七章 总结 | 第58-60页 |
7.1 结论 | 第58页 |
7.2 特色 | 第58-59页 |
7.3 下一步工作计划 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
缩略词表 | 第66-68页 |
附录 | 第68-70页 |
攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |