| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-31页 |
| 1 细胞色素P450 的特性(多样性) | 第12-17页 |
| ·细胞色素P450 命名与分布 | 第12-13页 |
| ·细胞色素P450 结构与功能 | 第13-15页 |
| ·细胞色素P450 分子特征 | 第15-16页 |
| ·细胞色系P450 基因表达调控的多样性 | 第16-17页 |
| 2 鱼类细胞色素P450 功能与应用 | 第17-20页 |
| ·药理学研究 | 第17-19页 |
| ·环境毒理学研究 | 第19-20页 |
| 3 鱼类细胞色素P450 3A | 第20-22页 |
| 4 孕烷X 受体(PXR) | 第22-26页 |
| ·PXR 组成及其分布特征 | 第22-24页 |
| ·PXR 对CYP3A 的转录调节作用 | 第24-25页 |
| ·PXR 与CYP3A 的诱导表达及参与药物代谢和转运 | 第25页 |
| ·PXR-CYP3A 途径在药物相互作用研究中的意义 | 第25-26页 |
| 5 鱼类CYP3A 与PXR 研究 | 第26-27页 |
| 6 鱼类细胞系的研究现状与应用 | 第27-28页 |
| 7 本论文研究目的、意义与主要内容 | 第28-31页 |
| 第一部分 | 第31-88页 |
| 第一章 鱼类细胞色素P450 亚型相关基因克隆及其序列生物信息学分析 | 第32-76页 |
| 第一节 草鱼CYP3A 和鲫鱼CYP1A 基因克隆及序列分析 | 第32-49页 |
| 1. 材料和方法 | 第33-43页 |
| 2. 结果 | 第43-49页 |
| 第二节 生物信息学分析 | 第49-73页 |
| 1 核苷酸分析 | 第49-51页 |
| 2 氨基酸分析 | 第51-73页 |
| 第三节 讨论 | 第73-76页 |
| 1. 底物结合位点特征分析 | 第73-74页 |
| 2. CYP450 系统中蛋白质和脂类的相互作用 | 第74页 |
| 3. 蛋白质一级结构特征分析 | 第74-76页 |
| 第二章 草鱼PXR 基因cDNA 片段的克隆与鉴定 | 第76-88页 |
| 1. 材料和方法 | 第76-82页 |
| 2. 结果 | 第82-87页 |
| 3. 讨论 | 第87-88页 |
| 第二部分 | 第88-136页 |
| 第三章 鱼类细胞生长特性及药物毒性研究 | 第89-104页 |
| 第一节 细胞培养及基本指标检测 | 第89-98页 |
| 1. 材料与方法 | 第89-91页 |
| 2. 结果 | 第91-93页 |
| 3. 讨论 | 第93-98页 |
| 第二节 利福平和氧氟沙星对草鱼肾细胞的毒性实验 | 第98-104页 |
| 1 材料和方法 | 第98-100页 |
| 2 结果 | 第100-101页 |
| 3. 讨论 | 第101-104页 |
| 第四章 体外诱导条件CYP3A 与PXR 功能初步研究 | 第104-129页 |
| 第一节 qRT-PCR 目的和内参基因引物筛选及标准曲线制作 | 第104-113页 |
| 1. 材料与方法 | 第105-108页 |
| 2. 结果 | 第108-110页 |
| 3. 讨论 | 第110-113页 |
| 第二节 最佳诱导条件CYP3A 基因表达与CYP3A 酶活 | 第113-120页 |
| 1 材料与方法 | 第113-117页 |
| 2 结果 | 第117-120页 |
| 第三节 最佳诱导CYP3A 与PXR 基因表达 | 第120-124页 |
| 1 材料与方法 | 第120-122页 |
| 2 结果 | 第122-124页 |
| 第四节 CYP3A 基因-CYP3A 酶活性-PXR 基因相关性分析 | 第124-129页 |
| 1. CYP3A 基因表达调控 | 第124-125页 |
| 2. PXR 基因表达调控 | 第125-126页 |
| 3. PXR 与CYP3A 的诱导表达 | 第126页 |
| 4. CYP3A 基因-CYP3A 酶活性-PXR 基因相关性分析 | 第126-129页 |
| 第五章 氧氟沙星验证CYP3A-PXR 相关性 | 第129-136页 |
| 第一节 氧氟沙星对CYP3A 酶活-CYP3A-PXR m RNA 相关性影响 | 第129-134页 |
| 1 材料与方法 | 第129-131页 |
| 2 结果 | 第131-134页 |
| 第二节 讨论 | 第134-136页 |
| 1 OFLX-草鱼CYP3A 底物 | 第134页 |
| 2 OFLX-草鱼CYP3A 诱导剂 | 第134-135页 |
| 3 OFLX-CYP3A-PXR 相关性 | 第135-136页 |
| 第三部分 小结 | 第136-138页 |
| 一 结论 | 第136页 |
| 二 主要创新点 | 第136-138页 |
| 参考文献 | 第138-152页 |
| 附录 | 第152-157页 |
| 附录A 主要缩略词 | 第152-153页 |
| 附录B 本文中所需要的网络资源 | 第153-154页 |
| 附录C 实验溶液的配制 | 第154-156页 |
| 附录D 在读期间发表的相关论文 | 第156-157页 |
| 致谢 | 第157页 |
