中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语/符号说明 | 第13-15页 |
前言 | 第15-18页 |
研究现状、成果 | 第15-16页 |
研究目的、方法 | 第16-18页 |
一、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶逆转录病毒载体的构建及其稳定表达细胞系的筛选 | 第18-37页 |
1.1 对象和方法 | 第18-25页 |
1.1.1 细胞株及细胞培养用品 | 第18页 |
1.1.2 细菌菌株、质粒和载体 | 第18页 |
1.1.3 相关抗体 | 第18页 |
1.1.4 工具酶、转染等试剂 | 第18页 |
1.1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
1.1.6 实验方法 | 第19-25页 |
1.2 结果 | 第25-31页 |
1.2.1 F-TrCP-Shc泛素连接酶与ErbB家族蛋白相互作用研究 | 第25-28页 |
1.2.2 重组质粒pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc、pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc(m)的构建和鉴定 | 第28-30页 |
1.2.3 稳定表达pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc、pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc(m)的乳腺癌细胞系SKBR3、BT474的建立 | 第30-31页 |
1.3 讨论 | 第31-35页 |
1.4 小结 | 第35-37页 |
二、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白的抗乳腺癌作用及其机制研究 | 第37-62页 |
2.1 对象和方法 | 第37-45页 |
2.1.1 细胞株、实验小鼠、细胞培养用品 | 第37页 |
2.1.2 实验试剂 | 第37-39页 |
2.1.3 主要仪器 | 第39页 |
2.1.4 实验方法 | 第39-45页 |
2.2 结果 | 第45-56页 |
2.2.1 F-TrCP-Shc在蛋白水平通过泛素-蛋白酶体途径降解整个ErbB家族磷化蛋白 | 第45-48页 |
2.2.2 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶有效降低ErbB2膜蛋白的表达 | 第48-50页 |
2.2.3 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白抑制下游信号活性 | 第50-51页 |
2.2.4 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白抑制细胞增殖 | 第51-52页 |
2.2.5 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白诱导细胞周期阻滞于G0/G1期 | 第52-53页 |
2.2.6 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白诱导细胞凋亡 | 第53-54页 |
2.2.7 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶能增强乳腺癌细胞对顺铂的敏感性 | 第54页 |
2.2.8 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白能明显抑制乳腺癌细胞体内、外成瘤能力 | 第54-56页 |
2.3 讨论 | 第56-60页 |
2.4 小结 | 第60-62页 |
三、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶在乳腺上皮细胞MCF-10A中的作用研究 | 第62-69页 |
3.1 对象和方法 | 第62-65页 |
3.1.1 细胞株、实验小鼠、细胞培养用品 | 第62页 |
3.1.2 实验试剂 | 第62-63页 |
3.1.3 主要仪器 | 第63页 |
3.1.4 实验方法 | 第63-65页 |
3.2 结果 | 第65-67页 |
3.2.1 F-Trcp-Shc E3泛素连接酶可降解乳腺上皮细胞MCF-10A内ErbB家族磷酸化蛋白 | 第65页 |
3.2.2 F-Trcp-Shc E3泛素连接酶降解MCF-10A内ErbB磷酸化蛋白对细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及对顺铂杀伤敏感性均无明显影响 | 第65-67页 |
3.3 讨论 | 第67-68页 |
3.4 小结 | 第68-69页 |
全文结论 | 第69-70页 |
论文创新点 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第78-79页 |
综述 | 第79-100页 |
综述参考文献 | 第93-100页 |
致谢 | 第100页 |