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应用蛋白敲除技术降解ErbB家族的抗乳腺癌作用及其机制研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
缩略语/符号说明第13-15页
前言第15-18页
    研究现状、成果第15-16页
    研究目的、方法第16-18页
一、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶逆转录病毒载体的构建及其稳定表达细胞系的筛选第18-37页
    1.1 对象和方法第18-25页
        1.1.1 细胞株及细胞培养用品第18页
        1.1.2 细菌菌株、质粒和载体第18页
        1.1.3 相关抗体第18页
        1.1.4 工具酶、转染等试剂第18页
        1.1.5 主要仪器第18-19页
        1.1.6 实验方法第19-25页
    1.2 结果第25-31页
        1.2.1 F-TrCP-Shc泛素连接酶与ErbB家族蛋白相互作用研究第25-28页
        1.2.2 重组质粒pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc、pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc(m)的构建和鉴定第28-30页
        1.2.3 稳定表达pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc、pBMN-GFP-FLAG-Trcp-Shc(m)的乳腺癌细胞系SKBR3、BT474的建立第30-31页
    1.3 讨论第31-35页
    1.4 小结第35-37页
二、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白的抗乳腺癌作用及其机制研究第37-62页
    2.1 对象和方法第37-45页
        2.1.1 细胞株、实验小鼠、细胞培养用品第37页
        2.1.2 实验试剂第37-39页
        2.1.3 主要仪器第39页
        2.1.4 实验方法第39-45页
    2.2 结果第45-56页
        2.2.1 F-TrCP-Shc在蛋白水平通过泛素-蛋白酶体途径降解整个ErbB家族磷化蛋白第45-48页
        2.2.2 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶有效降低ErbB2膜蛋白的表达第48-50页
        2.2.3 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白抑制下游信号活性第50-51页
        2.2.4 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白抑制细胞增殖第51-52页
        2.2.5 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白诱导细胞周期阻滞于G0/G1期第52-53页
        2.2.6 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白诱导细胞凋亡第53-54页
        2.2.7 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶能增强乳腺癌细胞对顺铂的敏感性第54页
        2.2.8 F-TrCP-Shc E3泛素连接酶降解ErbB家族蛋白能明显抑制乳腺癌细胞体内、外成瘤能力第54-56页
    2.3 讨论第56-60页
    2.4 小结第60-62页
三、F-Trcp-Shc E3泛素连接酶在乳腺上皮细胞MCF-10A中的作用研究第62-69页
    3.1 对象和方法第62-65页
        3.1.1 细胞株、实验小鼠、细胞培养用品第62页
        3.1.2 实验试剂第62-63页
        3.1.3 主要仪器第63页
        3.1.4 实验方法第63-65页
    3.2 结果第65-67页
        3.2.1 F-Trcp-Shc E3泛素连接酶可降解乳腺上皮细胞MCF-10A内ErbB家族磷酸化蛋白第65页
        3.2.2 F-Trcp-Shc E3泛素连接酶降解MCF-10A内ErbB磷酸化蛋白对细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及对顺铂杀伤敏感性均无明显影响第65-67页
    3.3 讨论第67-68页
    3.4 小结第68-69页
全文结论第69-70页
论文创新点第70-71页
参考文献第71-78页
发表论文和参加科研情况说明第78-79页
综述第79-100页
    综述参考文献第93-100页
致谢第100页

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